鄒元生,徐 瑞,樊柏林

(1.高原圣果沙棘制品有限公司,北京,100037;2.湖北省疾病預防控制中心,武漢,430079)

現(xiàn)代醫(yī)學研究表明,中老年人生理機能隨年齡的增加而下降,特別是人體內(nèi)源性抗氧化酶的活性下降,過多的氧自由基不能得到及時的清除。自由基學說表明人體的許多疾病和衰老與氧自由基作用有關(guān)[1]。通過獲取天然抗氧劑來應對自由基的損傷是一條重要的途徑。沙棘籽富含原花青素,因它的提取物含有更多的二聚體、三聚體,其生物活性可能要優(yōu)于葡萄籽原花青素提取物[2-3]。本試驗對沙棘籽原花青素抗氧化活性進行研究,擬研制沙棘原花青素抗氧化功能保健食品。

1 材料和方法

1.1 樣品來源及處理

受試物由高原圣果沙棘制品有限公司提供的有沙棘原花青素為功效成分的高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊制劑,內(nèi)容物為棕色油狀液體,用大豆油配制成所需濃度,灌胃給予。

1.2 實驗動物

SPF級昆明種雌性11月齡小鼠55只,雌性1月齡小鼠11只,由湖北省實驗動物研究中心提供,實驗動物生產(chǎn)許可證號為 SCXK(鄂)2003～0005,實驗動物使用許可證號為 SYXK(鄂)2003-0014。動物飼養(yǎng)室溫度為20～24℃,濕度為40%～70%。

1.3 劑量分組

將11月齡小鼠55只按血中丙二醛 (MDA)水平隨機分為5組,分別為老齡對照組、溶劑對照組及低、中、高劑量組。低、中、高劑量組分別以0.2167、0.4333、0.8667g/kg BW 連續(xù)經(jīng)口灌胃30d,相當于人群推薦日攝入量2.6g/60kg BW(即 0.04333g/kg BW)的 5、10、20倍。老齡陰性對照組給予等容量的蒸餾水,溶劑對照組給予等容量的大豆油。

樣品配制:準確稱取受試樣品 1.08g、2.17g、4.33g,分別用大豆油定容至100ml,配制濃度分別為 0.0108、0.0207、0.0433g/ml。各劑量組均按0.20ml/10g BW容量灌胃。

1.4 實驗方法

受試物動物連續(xù)灌胃30d后,處死動物,取肝臟勻漿,制備1%的肝勻漿進行丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活力及谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH-PX)活力測定 (試劑盒購自南京建成生物工程研究所)。

1.5 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計

實驗數(shù)據(jù)用Microsoft Excel及SPSS軟件建立數(shù)據(jù)庫,采用方差分析法先進行方差齊性檢驗。方差齊,采用多組比較進行顯著性檢驗,如P＞0.05,認為各組均數(shù)間差異無顯著性;如P≤0.05,還應將多個實驗組和對照組間均數(shù)進行兩兩比較。方差不齊時采用非參數(shù)法 (秩和檢驗)進行顯著性檢驗。

2 結(jié)果

2.1 對老齡小鼠體重的影響

由表1可見,各組動物給予受試物30d后體重無顯著性差異 (p＞0.05),說明高原圣果牌沙棘清基軟膠囊對老齡小鼠體重無影響。

2.2 對老齡小鼠肝勻漿中MDA含量的影響

由表2可見,高劑量組可明顯減少老齡小鼠1%肝勻漿中MDA含量,與老齡陰性對照組及溶劑對照組比較,差異均有顯著性(p＜0.01,p＜0.01)。

表1 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠體重的影響( ±s)

表1 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠體重的影響( ±s)

劑 量(g/kgBW)動 物 數(shù)(只)體重(g)試驗前 p值 試驗后 p值老齡陰性對照 11 54.4±5.9 0.653 52.6±6.1 0.267溶劑對照 11 52.3±4.9 52.7±3.7 0.2167 11 54.8±4.0 54.9±4.2 0.4333 11 52.6±3.4 50.8±3.2 0.8667 11 53.7±4.6 52.0±3.8

表2 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠MDA含量的影響(±s)

表2 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠MDA含量的影響(±s)

劑 量(g/kgBW)動物數(shù)(只)MDA(nmol/mgprot)試 驗 前 試 驗 后1%溶血液 p值 1%肝勻漿 p值(與老齡對照比)p值(與溶劑對照比)老齡陰性對照 11 8.25±1.09 1.000 6.39±1.50 - 1.000溶劑對照 11 8.33±0.97 6.30±1.53 1.000 -0.2167 11 8.32±0.78 6.17±1.26 0.996 1.000 0.4333 11 8.34±0.77 5.78±2.06 0.776 0.870 0.8667 11 8.35±0.78 4.20±1.09 0.003 0.005少齡對照 11 - 3.95±0.88 0.001 0.001

2.3 對老齡小鼠SOD、GSH-PX活力的影響

由表3可見,高劑量組老齡小鼠1%肝勻漿中SOD活性升高,與老齡陰性對照組及溶劑對照組比較有顯著性差異 (p＜0.05,p＜0.05)。各劑量組老齡小鼠1%肝勻漿中GSH-PX活性與老齡陰性對照組及溶劑對照組比較無顯著性差異(p＞0.05,p＞0.05)。

表3 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠1%肝勻漿SOD、GSH-PX活力的影響 (±s)

表3 高原圣果牌沙棘花青素軟膠囊對老齡小鼠1%肝勻漿SOD、GSH-PX活力的影響 (±s)

劑 量(g/kgBW)動物數(shù)(只)SOD活力(U/mgprot)p值(與老齡陰性對照比)p值(與溶劑對照比)GSH-PX(U/mgprot)p值(與老齡陰性對照比)p值(與溶劑對照比)老齡陰性對照 11 148.8±35.8 - 1.000 1293.6±352.7 - 1.000溶劑對照 11 146.5±31.1 1.000 - 1297.0±274.4 1.000 -0.2167 11 157.0±17.3 0.151 0.300 1216.3±412.8 0.980 0.976 0.4333 11 169.9±20.1 0.047 0.065 1434.7±361.7 0.811 0.824 0.8667 11 178.2±11.6 0.010 0.034 1324.0±339.5 1.000 1.000少齡對照 11 182.6±22.0 0.013 0.016 1697.1±350.0 0.038 0.040

3 小結(jié)

根據(jù)以上結(jié)果,受試樣品組與老齡陰性對照組及溶劑對照組比較,MDA含量降低及SOD活力升高均有統(tǒng)計學意義,判定高原圣果牌沙棘清基軟膠囊抗氧化功能試驗結(jié)果為陽性。

[1]蔡美琴主編.《醫(yī)學營養(yǎng)學》[M],上?？茖W技術(shù)文獻出版社,上海.

[2]劉朵花,等.沙棘和葡萄籽中原花青素的對比研究[J].沙棘,2000,13(1):35-37.

[3]金海英,等.沙棘籽原花青素提取物抗氧化作用研究[J].沙棘,2005,18(1):35-37.