羅 成，魯曉翔，周 達(dá)

（天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300134）

雞油菌多糖降血糖作用研究

羅 成，魯曉翔*，周 達(dá)

（天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300134）

通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，研究雞油菌多糖（CCPS）的降血糖作用。測(cè)定小鼠血清血糖值，研究雞油菌多糖的降血糖效果；測(cè)定小鼠肝組織中SOD活性、GSH-Px活性及MDA含量，探討雞油菌多糖對(duì)小鼠的抗氧化酶系的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，灌胃3種雞油菌多糖低、中、高劑量組的小鼠血糖值均顯著性降低（P＜0.01），降糖率分別達(dá)到15.9%、23.9%和29.2%，雞油菌多糖具有一定的降血糖功效；結(jié)果還表明，雞油菌多糖可以提高四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病小鼠機(jī)體的SOD活性和GSH-Px活性，極顯著抑制糖尿病模型小鼠的脂質(zhì)過(guò)氧化。

雞油菌，多糖，降血糖，機(jī)理

雞油菌（Cantharelles cibarius）別名黃絲菌、杏菌，是一種外生根真菌，屬真菌界、擔(dān)子菌門、同擔(dān)子菌綱、雞油菌目、雞油菌科和雞油菌屬［1］。研究表明，雞油菌富含胡蘿卜素、VA、VC和鈣、鐵、磷等多種礦質(zhì)元素，其性平、味甘，具有清肝、明目、利肺、和胃、益腸、減肥、美容和抗衰老等功效［2-3］。大量的研究表明［4-7］，真菌多糖作為一類天然活性產(chǎn)物，具有很好的降血糖作用，但有關(guān)雞油菌多糖的降血糖作用還未見(jiàn)報(bào)道。本文對(duì)雞油菌多糖進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，確定其具有降血糖作用，并對(duì)其降血糖機(jī)制進(jìn)行初步探討，以期為雞油菌的合理開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

雞油菌 購(gòu)自天津市林果所食用菌養(yǎng)殖場(chǎng)；昆明種小鼠120只 體重28±2g，雌雄各半，購(gòu)于天津市春樂(lè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；鹽酸二甲雙胍緩釋片 濟(jì)南東方制藥有限公司，批號(hào)：081202；四氧嘧啶 Sigma公司；葡萄糖測(cè)定試劑盒（GOD-PAP法） 中生北控生物科技股份有限公司；SOD（超氧化物歧化酶）測(cè)試盒、MDA（丙二醛）測(cè)試盒、GSH-Px（谷胱甘肽過(guò)氧化物酶）測(cè)試盒、總蛋白（考馬斯亮藍(lán)）測(cè)試盒 均購(gòu)自南京建成生物技術(shù)公司；其它常用化學(xué)試劑 均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 雞油菌多糖制備 雞油菌多糖的提取，采用微波萃取法，Sevag法除蛋白，S-8大孔樹(shù)脂脫色，濃縮后經(jīng)4倍95%乙醇沉淀，無(wú)水乙醇、乙醚、丙酮多次洗滌除雜，最后用真空冷凍干燥至多糖粉末備用。測(cè)定時(shí)以生理鹽水溶解多糖，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物糖尿病模型的建立與分組 小鼠購(gòu)入進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，分成3大組。其中正常對(duì)照組和正常中劑量灌胃組各15只，另取90只為糖尿病造模組。糖尿病造模組小鼠禁食 12h后，以200mg/kg體重的劑量給小鼠腹腔注射2%的四氧嘧啶溶液，72h后取尾血測(cè)量小鼠血糖值（空腹12h），取血糖值高于11.1mmol/L的小鼠70只，并按血糖值均衡的原則將造模成功小鼠分成5組：模型對(duì)照組，鹽酸二甲雙胍組（200mg/kg·d），雞油菌多糖低、中、高劑量組（100、200、400mg/kg·d），每組14只小鼠。正常對(duì)照組每天灌胃等體積的生理鹽水，未造模給藥組灌胃200mg/kg多糖溶液。動(dòng)物自由飲水取食，分組后次日按要求每天灌胃相應(yīng)濃度的藥物或等體積生理鹽水，共灌胃28d。給藥28d后，動(dòng)物禁食12h，稱體重，斷頭處死小鼠取血、取肝臟。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各指標(biāo)的測(cè)定 血糖值的測(cè)定：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死后取血液，4000r/min離心10min，制得血清，按葡萄糖試劑盒說(shuō)明測(cè)定血糖值。

肝臟中抗氧化酶系的測(cè)定：動(dòng)物處死后，迅速取肝組織在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱取1g肝組織，用眼科小剪盡快剪碎組織塊，加入9mL生理鹽水，充分研碎，使組織勻漿化，制出10%的肝組織勻漿，備用。應(yīng)用制備的肝組織勻漿分別按SOD、MDA、GSH-Px試劑盒法對(duì)其進(jìn)行超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶測(cè)定，總蛋白質(zhì)值的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞油菌多糖對(duì)正常小鼠血糖的影響

由表1可知，實(shí)驗(yàn)4周后，與正常對(duì)照組相比，每天給予灌胃200mg/kg劑量多糖的小鼠的血糖值有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。由于正常小鼠體內(nèi)存在完整高效的調(diào)節(jié)機(jī)制，故降糖效果不明顯，血糖維持在相對(duì)恒定范圍內(nèi)。說(shuō)明雞油菌多糖對(duì)正常小鼠血糖無(wú)影響。

表1 雞油菌多糖對(duì)正常小鼠血糖的影響

2.2 雞油菌多糖對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響

由表2可知，正常對(duì)照組小鼠的血糖值在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)無(wú)顯著性差異。5組糖尿病小鼠的血糖值在造模后升高幅度較大，與正常對(duì)照組的值相比，表現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），說(shuō)明造模成功。同時(shí)模型對(duì)照組小鼠在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)，其血糖值始終處在較高水平，表明實(shí)驗(yàn)所用造模方法效果穩(wěn)定。由表2還可知，與模型對(duì)照組相比，給藥28d后，雞油菌多糖低、中、高劑量組血糖均顯著性降低（P＜0.01），降糖率分別達(dá)到15.9%、23.9%和29.2%；其中，中劑量組降糖效果已與降糖藥鹽酸二胍的效果相當(dāng)，說(shuō)明一定劑量的雞油菌多糖具有較好的降糖效果。

表2 雞油菌多糖對(duì)高血糖小鼠血糖的影響

2.3 雞油菌多糖對(duì)糖尿病小鼠體內(nèi)酶活性的影響

從表3看出，與正常對(duì)照組相比，糖尿病模型對(duì)照組小鼠的肝臟SOD活性和GSH-Px活性均顯著低于正常組的值，而其肝勻漿的MDA含量卻顯著高于正常組的值（P＜0.01）。與糖尿病模型對(duì)照組相比，雞油菌多糖可顯著提高小鼠肝SOD活性和GSH-Px活性（P＜0.05），降低小鼠肝勻漿MDA含量，且雞油多糖中劑量組與降糖藥鹽酸二胍的效果相當(dāng)，說(shuō)明雞油菌多糖在糖尿病小鼠體內(nèi)發(fā)揮了顯著的抗氧化作用。從表3結(jié)果也可看出，雞油菌多糖不能使糖尿病小鼠SOD活性及肝勻漿MDA含量恢復(fù)到正常小鼠水平。

表3 雞油菌多糖對(duì)糖尿病小鼠肝臟SOD活性、MDA含量和GSH-Px活性的影響

2.4 雞油菌多糖降血糖機(jī)理探討

研究表明［8-11］，許多食用菌多糖都具有很好的降血糖作用，食用菌多糖降血糖作用的主要機(jī)理有：促進(jìn)胰島素分泌，增加血清胰島素含量；改善胰島素抵抗；加速肝葡萄糖代謝；減少對(duì)葡萄糖的吸收。

本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，四氧嘧啶產(chǎn)生的自由基不僅直接損傷胰腺，破壞胰島B細(xì)胞，降低體內(nèi)胰島素水平，使血糖明顯升高。而且還累積到其他臟器，如肝臟，使肝臟糖原合成及葡萄糖利用等功能受抑制，抑制抗氧化酶系作用，從而進(jìn)一步加重血糖的升高。

本文通過(guò)測(cè)定肝組織的SOD酶活、GSH-Px酶活及MDA含量發(fā)現(xiàn)，小鼠抗氧化酶系值的升高與血糖值的降低呈一定規(guī)律性，其作用機(jī)理可能是雞油菌多糖減弱了四氧嘧啶對(duì)胰島B細(xì)胞的損害或改善受損細(xì)胞的功能，通過(guò)清除自由基，或者是通過(guò)提高機(jī)體抗氧化酶體系而發(fā)揮降糖作用，從而增加胰島素的分泌而使血糖降低。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)灌胃3種雞油菌多糖低、中、高劑量組（100、200、400mg/kg·d）的血糖值均顯著性降低（P＜0.01），降糖率分別達(dá)到15.9%、23.9%和29.2%，說(shuō)明雞油菌多糖具有一定的降血糖功效。檢測(cè)小鼠肝臟SOD活性、MDA含量及GSH-Px活性的結(jié)果顯示，灌胃雞油菌多糖4周后，藥物對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)低、中、高劑量組的小鼠肝臟SOD活性和GSH-Px活性明顯高于糖尿病對(duì)照組的值（P＜0.05），肝臟MDA含量明顯低于糖尿病對(duì)照組（P＜0.01），說(shuō)明雞油菌多糖可以提高小鼠機(jī)體SOD的活性，清除自由基，并抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用。

自由基引起的脂質(zhì)過(guò)氧化不僅導(dǎo)致血糖升高，而且可使很多重要器官遭到傷害，這可能是產(chǎn)生糖尿病并發(fā)癥的重要原因。雞油菌多糖可明顯提高機(jī)體活性，清除自由基，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用，這與筆者此前做過(guò)的體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明雞油菌多糖具有很好的抗氧化性效果。雞油菌多糖可減輕自由基及代謝產(chǎn)物對(duì)組織的傷害作用，提示雞油菌對(duì)防治糖尿病并發(fā)癥方面也可以起到重要作用。

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Study on hypoglycemic function of cantharellus polysaccharide

LUO Cheng，LU Xiao-xiang*，ZHOU Da
（Biotechnology and Food Science College，Tianjin University of Commerce，Tianjin Key Laboratory Food of Biotechnology，Tianjin 300134，China）

Through animal experiments，hypoglycemic function of cantharellus polysaccharide was investigated.The serum glucose was determined，the hypoglycemic effect was studied，and the SOD，GSH-Px activity and MDA concentration in liver of diabetic mice was determined.The effects of CCPS on antioxidant enzyme system of mice in vivo were studied.The results showed that three kinds lavaging dosage of CCPS could all drop the bloodglucose in diabetic mice significantly.Hypoglycemic rates were 15.9%，23.9%，29.2%.CCPS had some functions of lowering blood glucose values.CCPS can increase the Alloxan-induced diabetic mice body′s SOD activity and GSH-Px activity，inhibit diabetic mice lipid peroxidation significantly.

Cantharellus cibarius；polysaccharide；hypoglycemic；mechanism

TS201.1

A

1002-0306（2010）12-0333-03

2009-10-30 *通訊聯(lián)系人

羅成（1984-），男，碩士研究生，研究方向：食品功能成分研究與開(kāi)發(fā)。