張貴杰,李寧，熊元君，波拉提·馬卡比力，王金輝*，李銑，賈曉光

(1.沈陽藥科大學(xué)中藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2.新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所，新疆 烏魯木齊 830002)

化學(xué)成分

新疆維吾爾自治區(qū)科技廳國際合作項(xiàng)目——駱駝刺(含駱駝刺糖)化學(xué)成分及藥理活性基礎(chǔ)研究(200741120)；新疆維吾爾自治區(qū)科研院所改革與發(fā)展專項(xiàng)資助項(xiàng)目(200808)

*王金輝，E-mail：wangjh1972@vip.sina.com

駱駝刺地上部分化學(xué)成分的分離與鑒定△

張貴杰1,李寧1，熊元君2，波拉提·馬卡比力2，王金輝1*，李銑1，賈曉光2

(1.沈陽藥科大學(xué)中藥學(xué)院，遼寧 沈陽110016；2.新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所，新疆 烏魯木齊830002)

目的研究駱駝刺的化學(xué)成分，為進(jìn)一步闡明其活性成分和開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。方法采用反復(fù)硅膠、Sephadex LH-20、ODS等柱色譜法進(jìn)行分離純化，并通過理化常數(shù)測定和波譜數(shù)據(jù)分析鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果從駱駝刺中分離鑒定了12個(gè)化合物，即異鼠李素(isorhamnetin,1)，異鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside,2)，異鼠李素3-O-β-D-蕓香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside,3)，山柰酚(kaempferol,4)，槲皮素(quercetin,5)，蘆丁(rutin,6)，芒柄花苷(ononin,7)，二十六烷醇(1-hexacosanol,8)，二十七烷醇(1-heptacosanol,9)，二十八烷醇 (octacosanol,10)，三十烷醇(1-triacontanol,11)，三十烷酸甲酯(triacontanoic acid, methyl ester,12)。結(jié)論化合物4、7～12為首次從該屬植物中分離得到，化合物2、5、6為首次從該植物中分離得到。

駱駝刺；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

駱駝刺Alhagipseudalhagi(M.B.) Desv.為豆科駱駝刺屬植物，主產(chǎn)于新疆，民間用于治療風(fēng)濕和癌癥[1]。駱駝刺全草治療感冒發(fā)燒，胃腹?jié)駸幔c炎；葉用于治療關(guān)節(jié)腫痛；花用于清熱解毒；種子用于止熱痢和牙痛[2]。該植物枝葉能分泌糖類物質(zhì)而凝結(jié)其上，干燥后經(jīng)敲打而脫落，收集即所謂“刺糖”為維吾爾族民族藥，治療神經(jīng)頭痛[3]。為了進(jìn)一步闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，我們對駱駝刺的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。從其70%乙醇提取物中分離得到了12個(gè)化合物，根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)并參考文獻(xiàn)，鑒定其分別為：異鼠李素(isorhamnetin,1)，異鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside,2)，異鼠李素3-O-β-D-蕓香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside,3)，山柰酚(kaempferol,4)，槲皮素(quercetin,5)，蘆丁(rutin,6)，芒柄花苷(ononin,7)，二十六烷醇(1-hexacosanol,8)，二十七烷醇(1-heptacosanol,9)，二十八烷醇(octacosanol,10)，三十烷醇(1-triacontanol,11)，三十烷酸甲酯(triacontanoic acid methyl ester,12)?；衔?、7～12為首次從該屬植物中分離得到，化合物2、5、6為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1儀器

核磁共振波譜用BrukerARX-300，BrukerAV-600型核磁共振儀測定(TMS內(nèi)標(biāo)，瑞士Bruker公司)，GC-MS為Agilent6890N/5973氣質(zhì)聯(lián)用儀(美國Agilent科技)，熔點(diǎn)用YanacoMP-S3顯微熔點(diǎn)測定儀(未校正,日本Yanaco公司)測定。

1.2材料

薄層色譜及制備薄層色譜用硅膠GF254(40～10μm)、柱色譜用硅膠(71～51μm)(青島海洋化工廠)，葡聚糖凝膠SephadexLH-20(瑞典Pharmacia)；ODS填料(天津市化學(xué)試劑工廠色譜技術(shù)開發(fā)公司)；所用試劑均為分析純。駱駝刺采自新疆維吾爾自治區(qū)(2007年9月)，由新疆民族藥物研究所賈曉光教授鑒定為Alhagipseudalhagi(M.B.)。

2 提取與分離

干燥駱駝刺地上部分10kg，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液加熱回流提取2次，合并提取液，回收溶劑至5000mL，取其中4500mL依次以石油醚(60～90℃)、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，得三氯甲烷萃取物(35.0g)，醋酸乙酯萃取物(20.0g)和正丁醇萃取物(170.0g)，以石油醚-丙酮，三氯甲烷-甲醇等溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫。將所得流分進(jìn)行反復(fù)硅膠、ODS柱色譜，結(jié)合SephadexLH-20柱色譜法以及重結(jié)晶等手段得到了化合物1(100mg)、2(8.4mg)、3(10.0mg)、4(13.5mg)、5(22.5mg)、6(14.1mg)、7(16.1mg)、8～12(30.5mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

3.1化合物1

黃色粉末(三氯甲烷)，mp.305～307℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。1H-NMR中給出5個(gè)芳香質(zhì)子信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.19(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.47(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一組ABX系統(tǒng)[δ7.74(1H，d，J=2.1Hz，H-2′)，7.69(1H，dd，J=8.4，1.5Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR中還給出了5-OH的特征信號δ12.46(1H，s)。13C-NMR 中給出了16個(gè)碳信號，分別為δ147.3(C-2)，135.8(C-3)，175.9(C-4)，160.7(C-5)，98.2(C-6)，164.1(C-7)，93.6(C-8)，156.2(C-9)，102.0(C-10)，122.0(C-1′)，115.5(C-2′)，148.8(C-3′)，146.6(C-4′)，111.7(C-5′)，121.7(C-6′)和55.7(C-3′-OCH3)。其NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[1]對照，鑒定該化合物為異鼠李素(isorhamnetin)。

3.2化合物2

黃色粉末(甲醇)，mp.167～170℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。Molish反應(yīng)陽性，示為黃酮苷。2%硫酸水解檢出葡萄糖。1H-NMR中給出5個(gè)芳香質(zhì)子信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.21(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.46(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一組ABX系統(tǒng)[δ7.94(1H，d，J=1.8Hz，H-2′)，7.50(1H，dd，J=8.4，1.8Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR 中還給出了5-OH的特征信號δ12.60(1H，s)；另外還給出了糖的端基質(zhì)子信號δ5.57(1H，d，J=8.8Hz，H-1″)，根據(jù)偶合常數(shù)確定存在一β型的苷鍵；同時(shí)給出了一甲氧基質(zhì)子的信號δ3.85(1H，s，3′-OCH3)。13C-NMR中給出了黃酮母核的15個(gè)碳信號，分別為δ156.3(C-2)，133.5(C-3)，177.5(C-4)，161.3(C-5)，98.8(C-6)，164.3(C-7)，93.8(C-8)，156.4(C-9)，104.1(C-10)，121.2(C-1′)，115.3(C-2′)，149.5(C-3′)，146.9(C-4′)，114.6(C-5′)和122.1(C-6′)；糖區(qū)給出了糖的端基碳信號δ100.9(C-1″)；另外高場區(qū)給出了一甲氧基的碳信號δ55.8(3′-OCH3)。碳譜與化合物1相比，C-2向低場位移了9.0個(gè)化學(xué)位移單位，而C-3向高場移動(dòng)了2.3個(gè)化學(xué)位移單位。其NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]比較，鑒定該化合物為異鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside)，見表1?；衔?為首次從該植物中分離得到。

3.3化合物3

黃色粉末(甲醇)，mp.178～180℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。Molish反應(yīng)陽性，示為黃酮苷。2%硫酸水解檢出葡萄糖和鼠李糖。1H-NMR中給出5個(gè)芳香質(zhì)子信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.20(1H，d，J=2.0Hz，H-6)和6.46(1H，d，J=2.0Hz，H-8)]和一組ABX系統(tǒng)[δ7.85(1H，d，J=2.0Hz，H-2′)，7.50(1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.0Hz，H-5′)]；1H-NMR中還給出了5-OH的特征信號δ12.58(1H，s)；另外還給出了兩個(gè)糖的端基質(zhì)子信號δ5.54(1H，d，J=8.8Hz，H-1″)和4.42(1H，d，J=2.0Hz，H-1″′)以及鼠李糖特征甲基質(zhì)子信號δ0.96(3H，d，J=6.5Hz)；同時(shí)給出了一甲氧基質(zhì)子的信號δ3.85(1H，s，3′-OCH3)。13C-NMR中給出了黃酮母核的15個(gè)碳信號分別為δ156.4(C-2)，133.0(C-3)，177.3(C-4)，161.2(C-5)，98.8(C-6)，164.2(C-7)，93.8(C-8)，156.5(C-9)，104.0(C-10)，121.2(C-1′)，115.3(C-2′)，149.4(C-3′)，146.9(C-4′)，113.3(C-5′)和122.3(C-6′)；糖區(qū)給出了兩個(gè)糖的端基碳信號δ101.2(C-1″)和100.9(C-1″′)；另外在高場區(qū)給出了一甲氧基的碳信號δ55.7(3′-OCH3)，且給出了鼠李糖甲基碳信號δ17.7。與化合物2相比，C-6″向低場位移了6.0個(gè)化學(xué)位移單位，提示C-6″位連接鼠李糖。其NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[1]對照，鑒定該化合物為異鼠李素3-O-β-D-蕓香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside)，見表1。

3.4化合物4

黃色粉末(甲醇)，mp.276～278℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。1H-NMR中給出6個(gè)芳香質(zhì)子信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.14(1H，br.s，H-6)和6.39(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)]和一組AA′BB′系統(tǒng)[δ8.03(2H，d，J=8.1Hz，H-2′，6′)，6.92(2H，d，J=8.1Hz，H-3′，5′)]。13C-NMR 中給出了黃酮母核的15個(gè)碳信號分別為δ146.4(C-2)，135.9(C-3)，175.8(C-4)，160.6(C-5)，98.7(C-6)，165.6(C-7)，93.7(C-8)，156.3(C-9)，102.4(C-10)，121.2(C-1′)，129.3(C-2′，6′)，115.5(C-3′，5′)，159.3(C-4′)。其NMR數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)與文獻(xiàn)[5]對照，鑒定該化合物為山柰酚(kaempferol)。化合物4為首次從該屬植物中分離得到。

表1 化合物1～3的1H-NMR和13C-NMR的波譜數(shù)據(jù)(in DMSO-d6)

3.5化合物5

黃色粉末(甲醇)，mp.>300℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。1H-NMR中給出5個(gè)芳香質(zhì)子信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.19(1H，d，J=1.9Hz，H-6)和6.41(1H，d，J=1.9Hz，H-8)]和一組ABX系統(tǒng)[δ7.68(1H，d，J=2.1Hz，H-2′)，7.55(1H，dd，J=8.4，2.1Hz，H-6′)，6.88(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR 中還給出了活潑氫的質(zhì)子信號δ12.50(1H，s，5-OH)，10.75(1H，s，7-OH)，9.34(2H，s，3，3′-OH)，9.70(1H，s，4′-OH)。其NMR數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)與文獻(xiàn)[6]比較一致，鑒定該化合物為槲皮素(quercetin)?；衔?為首次從該植物中分離得到。

3.6化合物6

黃色粉末(甲醇)，mp.178～181℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性，顯示為一黃酮類化合物。Molish反應(yīng)陽性，示為黃酮苷。1H-NMR中給出5個(gè)烯氫信號組成一組AX系統(tǒng)[δ6.20(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.39(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一組ABX系統(tǒng)[δ7.59(1H，d，J=1.8Hz，H-2′)，7.50(1H，m，H-6′)，6.85(1H，d，J=7.8Hz，H-5′)]；1H-NMR 中還給出了活潑氫的質(zhì)子信號δ12.60(1H，s，5-OH)，10.83(1H，s，7-OH)，9.19(1H，s，3′-OH)，9.66(1H，s，4′-OH)；另外還給出了兩個(gè)糖的端基質(zhì)子信號δ5.35(1H，d，J=7.2Hz，H-1″)和4.42(1H，s，H-1′′′)以及鼠李糖特征甲基質(zhì)子信號δ1.00(3H，d，J=6.5Hz)；13C-NMR 中給出了黃酮母核的15個(gè)碳信號，分別為δ156.6(C-2)，133.4(C-3)，177.5(C-4)，161.3(C-5)，98.8(C-6)，164.2(C-7)，93.7(C-8)，156.7(C-9)，104.1(C-10)，121.3(C-1′)，115.3(C-2′)，144.8(C-3′)，148.5(C-4′)，116.4(C-5′)和121.7(C-6′)；糖區(qū)給出了兩個(gè)糖的端基碳信號δ101.3(C-1″)和100.8(C-1′′′)，且在高場區(qū)給出了鼠李糖甲基碳信號δ17.8。其NMR數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)與文獻(xiàn)[5]比較，鑒定該化合物為蘆丁(rutin)?；衔?為首次從該植物中分離得到。

3.7化合物7

白色粉末(甲醇)，mp.213～216℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，示有酚羥基存在。1H-NMR中給出異黃酮的特征信號δ8.44(1H，s，H-2)；還給出了7個(gè)烯氫質(zhì)子信號：質(zhì)子δ7.54(2H，d，J=8.7Hz，H-2′，6′)和6.99(2H，d，J=8.7Hz，H-3′，5′)組成了AA′BB′偶合系統(tǒng)；δ8.06(1H，d，J=9.0Hz，H-5)，7.15(1H，dd，J=9.0，2.4Hz，H-6)和7.24(1H，d，J=2.4Hz，H-8)組成了ABX偶合系統(tǒng)；氫譜高場區(qū)給出了一個(gè)甲氧基的質(zhì)子信號δ3.77(3H，s，4′-OCH3)。另外還給出了一個(gè)糖的端基質(zhì)子信號δ5.10(1H，d，J=7.2Hz)。13C-NMR給出了黃酮母核的15個(gè)碳信號δ153.7(C-2)，123.4(C-3)，174.7(C-4)，127.0(C-5)，115.7(C-6)，161.5(C-7)，103.5(C-8)，157.1(C-9)，118.5(C-10)，124.0(C-1′)，130.1(C-2′,6′)，113.7(C-3′,5′)，159.4(C-4′)；糖區(qū)給出了糖的端基碳信號δ100.1(C-1″)，另外給出了一甲氧基的碳信號δ55.2(4′-OCH3)。與化合物10相比，C-7向高場位移了1.7個(gè)化學(xué)位移單位。其NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]比較，鑒定該化合物為芒柄花苷(ononin)?；衔?為首次從該屬植物中分離得到。

3.8化合物8～12

[1] 楊秀偉，蔣玉梅，李君山，等.駱駝刺中一個(gè)新的黃酮醇葡萄糖苷類化合物[J].中草藥，1996，27(12)：707-711.

[2] 李君山，劉勇民，蔡少青.維吾爾醫(yī)用駱駝刺類藥材的資源、商品流通及民間應(yīng)用研究[J].中國民族醫(yī)藥雜志，1996，2(2)：39-40.

[3] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會(huì).中國植物志(第四十二卷第二分冊)[M].北京：科學(xué)出版社，2004：163-164.

[4] 謝韜，劉凈，梁敬鈺,等. 濱蒿炔類和黃酮類成分研究Ⅱ[J].中國天然藥物，2005，3(2)：86-89.

[5] 梁僑麗，丁林生. 枳椇葉化學(xué)成分研究(Ⅰ)[J].中草藥，1996，27(10)：581-583.

[6] 左文健.杜香的化學(xué)成分研究[D].沈陽：沈陽藥科大學(xué)碩士論文，2006.

[7] 馬強(qiáng)，雷海民，周玉新,等.紅車軸草化學(xué)成分的研究[J].中國藥學(xué)雜志，2005，40(14)：1057-1059.

IsolationandIdentificationofChemicalConstituentsofAerialPartsofAlhagipseudalhagi(M.B.)

Zhang Guijie1, Li Ning1, Xiong Yuanjun2, Bolat Makhabel2, Wang Jinhui1, Li Xian1, Jia Xiaoguang2

(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,ShenyangLiaoning110016,China;2.XinjiangInstituteofChineseMateriaMedicaandEthnodrug,UrumqiXinjiang830002,China)

Objective: To study the chemical constituents of aerial parts ofAlhagipseudalhagi(M.B.) Desv..MethodsThe compounds were isolated by chromatography on silica gel, Sephadex LH-20columns, ODS columns and the recrystallization methods. Chemical properties and NMR data were employed for the structural identification.ResultsTwelve compounds were isolated, their structures were identified as isorhamnetin (1)， isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside (2)，isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside (3)，kaempferol (4)，quercetin (5)， rutin (6)， ononin (7)，1-hexacosanol (8)，1-heptacosanol (9)， octacosanol (10)，1-triacontanol (11)，and triacontanoic acid methyl ester (12).ConclusionCompounds4,7～12were obtained from theAlhagigenus for the first time and2,5,6were isolated fromA.pseudalhagi(M.B.) for the first time.

Alhagipseudalhagi(M.B.) Desv.； Chemical constituents； Isolation and identification

2010-03-08)