黃宗文, 駱 劍, 林 彬, 郭仁湘, 楊 薇, 陳國(guó)華

(海南大學(xué) 海洋學(xué)院 熱帶生物資源教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 海南 ?？?570228)

鞍帶石斑魚(yú)工廠化育苗研究

黃宗文, 駱 劍, 林 彬, 郭仁湘, 楊 薇, 陳國(guó)華

(海南大學(xué) 海洋學(xué)院 熱帶生物資源教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 海南 ?？?570228)

作者設(shè)計(jì)了一種新的鞍帶石斑魚(yú)(Epinephelus lanceolatus)工廠化人工育苗方法。測(cè)定了鞍帶石斑魚(yú)人工育苗過(guò)程中水環(huán)境因子和育苗水體浮游生物的種類、數(shù)量變化。育苗期間水溫28.0～30.7; ℃鹽度為27.0～32.0; pH值為7.39～7.90; 溶氧量6 mg/L以上; 中午池面平均光照3315.9 lx; 記錄了1 d的光照、水溫、溶解氧和pH的變化; 育苗池前18 d只加水不換水, 氨氮不斷上升, 最低值0.24 mg/L, 最高值 2.53 mg/L, 育苗后期采取換水措施, 氨氮迅速下降; 育苗期間, 水體除正常投喂的輪蟲(chóng)(Brachionus plicatilis)和橈足類外, 池中出現(xiàn)浮游植物 12種、浮游動(dòng)物 5種, 浮游植物平均生物量6.92×106個(gè)/L, 原生動(dòng)物平均生物量0.74×106個(gè)/L。經(jīng)過(guò)34 d的培養(yǎng), 得到平均全長(zhǎng)2.45 cm魚(yú)種, 單位水體育苗密度300尾/m3, 育苗成活率為2.73%。結(jié)果表明, 用有效微生物群(effective microorganisms,簡(jiǎn)稱EM) +高級(jí)蝦片調(diào)節(jié)水質(zhì)的模式, 可以保持育苗水質(zhì)穩(wěn)定, 成功培育出鞍帶石斑魚(yú)幼魚(yú)。

鞍帶石斑魚(yú)(Epinephelus lanceolatus); 人工育苗; 水環(huán)境因子

鞍帶石斑魚(yú)(Epinephelus lanceolatus)俗稱龍膽石斑魚(yú), 隸屬鱸形目(Perciformes)、科(Serranidae)、石斑魚(yú)屬( Epinephalus), 為暖水性、中下層珊瑚礁魚(yú)類, 分布于印度洋非洲東岸至太平洋中部密克羅尼西亞, 南至澳大利亞, 中國(guó)產(chǎn)于南海諸島和海南島等海域, 但數(shù)量稀少。鞍帶石斑魚(yú)是石斑魚(yú)類中體型最大的種類[1], 具有生長(zhǎng)速度快, 抗病性強(qiáng), 肉質(zhì)鮮美等諸多優(yōu)點(diǎn), 且肌肉氨基酸組成與人體氨基酸組成較為接近, 營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高, 成為養(yǎng)殖前景極大的石斑魚(yú)種類, 深受消費(fèi)者[2]和養(yǎng)殖業(yè)者的喜愛(ài), 由于人工繁殖技術(shù)尚不成熟, 苗種不足限制了鞍帶石斑魚(yú)養(yǎng)殖的發(fā)展。

石斑魚(yú)魚(yú)苗培育被認(rèn)為是海水魚(yú)類育苗中難度較大的一種[2], 而鞍帶石斑魚(yú)又有親魚(yú)獲取較難、產(chǎn)卵期短等問(wèn)題, 使人工繁殖更加困難。目前, 學(xué)者們[2～7]對(duì)于石斑魚(yú)育苗存在的問(wèn)題達(dá)成了幾點(diǎn)共識(shí)： 首先,育苗水環(huán)境因子的變化是育苗成功與否的重要因素之一[3,4]; 第二, 由內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)為外源性營(yíng)養(yǎng)的仔魚(yú)開(kāi)口期餌料不適宜[3], 長(zhǎng)棘期和收棘期的營(yíng)養(yǎng)缺乏, 均可導(dǎo)致高的死亡率; 此外, 由于魚(yú)苗密度較高產(chǎn)生的局部缺氧和稚、幼魚(yú)期的互相殘殺也是育苗成活率低的重要原因。目前, 鞍帶石斑魚(yú)育苗多采用池塘生態(tài)育苗方式[6,8,9], 鞍帶石斑魚(yú)在海南的主要產(chǎn)卵期是 4～6月和 9～10月, 前一個(gè)產(chǎn)卵期內(nèi), 海南的池塘育苗中水溫經(jīng)常達(dá)到 32℃以上, 而這個(gè)水溫條件在鞍帶石斑魚(yú)的育苗早期仔魚(yú)很難渡過(guò); 后一個(gè)產(chǎn)卵期是海南的臺(tái)風(fēng)季節(jié), 臺(tái)風(fēng)的影響經(jīng)常導(dǎo)致池塘育苗失敗?？梢?jiàn), 鞍帶石斑魚(yú)的池塘育苗受天氣制約, 工廠化育苗可以在一定程度上克服受天氣制約的問(wèn)題。鞍帶石斑魚(yú)的工廠化育苗相關(guān)報(bào)道較少[2,5],作者曾采用單細(xì)胞藻類凈化水質(zhì)的方法[3]進(jìn)行鞍帶石斑魚(yú)的育苗, 但效果不穩(wěn)定。為了改進(jìn)鞍帶石斑魚(yú)的工廠化育苗方法, 本實(shí)驗(yàn)是通過(guò)向育苗池中定時(shí)定量加入 EM 菌和高級(jí)蝦片, 在育苗水體中構(gòu)建一條碎屑食物鏈, 保持育苗水體水質(zhì)穩(wěn)定, 完成育苗過(guò)程, 現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 育苗設(shè)施與材料

育苗實(shí)驗(yàn)在萬(wàn)寧業(yè)興水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司石斑魚(yú)育苗基地(海南省萬(wàn)寧市和樂(lè)鎮(zhèn)港北港)進(jìn)行。

水源： 海邊砂濾井過(guò)濾海水。

育苗池條件： 室內(nèi)水泥池, 方形, 規(guī)格為5 m×5 m×1 m; 設(shè)有上溢下排的排水口和池底排污口; 全池設(shè)25只氣石充氣; 育苗車間的房頂部分采用透光材料, 設(shè)有遮光網(wǎng), 可調(diào)節(jié)室內(nèi)光照強(qiáng)度, 控制11： 00～15： 00 育苗池水面光照強(qiáng)度 3 000～5 000 lx。

EM菌： 市售東方菌王10 L, 清水20 L, 紅砂糖2 kg, 在50 L聚乙烯桶中混勻, 密封備用。

蝦片： 市售金蝦牌高級(jí)蝦片。

生物餌料： 用池塘培育的輪蟲(chóng)、橈足類。

鞍帶石斑魚(yú)受精卵0.2 kg。

1.2 育苗方法與水質(zhì)管理

1.2.1 育苗前的準(zhǔn)備與投放仔魚(yú)

培水： 育苗池在使用前用漂白粉消毒, 沖洗至無(wú)余氯。加入海水至80 cm深。育苗池進(jìn)水當(dāng)天開(kāi)始, 每天8： 00、15： 00分2次向池中潑灑準(zhǔn)備好的EM菌和蝦片。

投放仔魚(yú)： 培水至第4天, 購(gòu)鞍帶石斑魚(yú)受精卵0.2 kg, 孵化出仔魚(yú)后小心投放到育苗池; 仔魚(yú)下池3 h后, 抽樣測(cè)定密度為1.1萬(wàn)尾/m3。

1.2.2 餌料投喂和水質(zhì)管理

1.2.2.1 餌料投喂

仔魚(yú)孵出第2天, 向育苗池中接種輪蟲(chóng), 保持育苗水體輪蟲(chóng)密度 15～20個(gè)/mL。第 14天開(kāi)始, 繼續(xù)投喂輪蟲(chóng)外, 投喂少量經(jīng)80目篩絹過(guò)濾的橈足類幼體。第 20天, 以投喂橈足類為主, 保持育苗水體橈足類密度為5～10個(gè)/mL。

1.2.2.2 水質(zhì)管理

仔魚(yú)下池后： 第一周, 不換水; 第二周, 每天向池中加水1～2 cm; 第三周每天換水3～8 cm; 第四周以后, 根據(jù)育苗水質(zhì)狀況, 每天換水20～30 cm。

1.2.3 育苗水體理化條件和浮游生物的測(cè)定

1.2.3.1 水溫、pH、鹽度、溶氧、光照強(qiáng)度

每天8： 00、15： 00兩次測(cè)定。水溫、溶氧測(cè)定使用美國(guó)HACH HQ30D flexi METER, 鹽度測(cè)定使用手持式折光鹽度計(jì); pH測(cè)定用DELTA 320臺(tái)式pH計(jì), 光照強(qiáng)度測(cè)定用DT-1301 LIGHT METER測(cè)定水面照度。

1.2.3.2 氨氮測(cè)定

HACH DREL 2800便攜式完全水質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)室的方法。

1.2.3.3 浮游生物密度測(cè)定

育苗期間, 每隔3 d取樣測(cè)定1次輪蟲(chóng)、橈足類以外的浮游生物密度。

1.2.3.4 浮游植物和浮游動(dòng)物(原生動(dòng)物)的定性測(cè)定

取水樣300 mL, 用150目篩絹過(guò)濾去輪蟲(chóng)、橈足類等小型浮游生物, 用魯哥氏液固定(終濃度為1%), 顯微鏡下觀察、鑒定種類。

1.2.3.5 浮游生物的定量測(cè)定

取水樣300 mL, 用150目篩絹過(guò)濾去輪蟲(chóng)、橈足類等小型浮游生物, 用魯哥氏液固定(終濃度為1%), 水樣靜置 24 h, 用虹吸法吸去上清部分, 定容到30 mL。取0.08 mL濃縮水樣到計(jì)數(shù)板, 顯微鏡下分別計(jì)數(shù)浮游植物和浮游動(dòng)物(原生動(dòng)物), 每個(gè)水樣觀察計(jì)數(shù)2個(gè)計(jì)數(shù)板。每個(gè)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)50個(gè)視野,記錄每個(gè)視野浮游生物個(gè)數(shù), 再計(jì)算單位原水樣中浮游生物的數(shù)量。

1.2.4 魚(yú)苗生長(zhǎng)的觀察和密度測(cè)定

每日兩次觀察記錄魚(yú)苗的活動(dòng)狀況; 每 3天取樣 1次, 每次10～20尾, 經(jīng)終濃度 4%甲醛固定后測(cè)量全長(zhǎng)并描述主要形態(tài)特征。

石斑魚(yú)的密度測(cè)定, 在夜間無(wú)光條件下, 待魚(yú)苗在池中分散均勻, 用500 mL燒杯隨機(jī)取樣3～5次,取平均值估算魚(yú)苗密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 育苗期間理化因子和浮游生物的變化

2.1.1 育苗水體理化因子的變化及對(duì)育苗的影響

2.1.1.1 水溫和鹽度

育苗期間, 水體溫度范圍在 28.0～30.7℃、鹽度27.0～32.0, 魚(yú)苗生長(zhǎng)發(fā)育正常。在育苗過(guò)程中, 遇一次臺(tái)風(fēng), 室外溫度驟降, 因育苗車間的保溫作用, 室內(nèi)育苗水溫變化較小, 沒(méi)有對(duì)育苗造成大的影響。育苗早期不換水, 因蒸發(fā)鹽度有小幅上升趨勢(shì), 至育苗的第三周, 因降水影響, 海邊砂濾井的海水鹽度有所下降, 此時(shí)對(duì)育苗池少量換水, 鹽度有小幅下降, 對(duì)魚(yú)苗生長(zhǎng)沒(méi)有明顯影響(圖1)。

2.1.1.2 溶氧

育苗水體采取不間斷充氣, 水體溶氧在 6 mg/L以上, 溶氧條件良好(圖2)。

2.1.1.3 光照

育苗車間的光照變化很大, 主要受天氣變化的影響, 車間設(shè)置的日光燈, 對(duì)實(shí)際光照影響不大, 圖3可以看出, 育苗期間出現(xiàn)過(guò)3次低光照情況。

第一次在育苗的第四、五天, 持續(xù)時(shí)間1 d, 正值仔魚(yú)從內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)向外源營(yíng)養(yǎng)的過(guò)度期, 從育苗的實(shí)際效果看, 對(duì)魚(yú)苗生長(zhǎng)沒(méi)有產(chǎn)生大的影響; 第二次遇到光照情況是在第15～17天(臺(tái)風(fēng)影響), 持續(xù)時(shí)間2 d多, 從池中的魚(yú)苗密度變化看, 育苗受到一定的影響; 第三次是在育苗的第21～23天, 池中出現(xiàn)一些死苗現(xiàn)象。

圖1 育苗水體中溫度和鹽度的變化Fig. 1 Variations of temperature and salinity in breeding water

圖2 育苗水體中溶解氧的變化Fig. 2 Variation of DO in breeding water

圖3 育苗光照強(qiáng)度的變化Fig. 3 Variation of illumination in whole period

2.1.1.4 酸堿度

從圖 4可以看出, 育苗水體酸堿度在 pH7.39～7.90的范圍變化, 隨著育苗進(jìn)程, pH值有逐漸降低的趨勢(shì)。

2.1.1.5 環(huán)境因子的周日變化與魚(yú)苗活動(dòng)規(guī)律

選定一個(gè)晴天, 即在育苗的第 13天, 每隔 2 h測(cè)定一次水溫、溶氧、光照、pH, 以了解其變化規(guī)律(表1)。從總體看, 僅光照取自然光, 變化明顯, 水溫、溶氧、pH都相對(duì)穩(wěn)定。此時(shí)鞍帶石斑魚(yú)苗背鰭和腹鰭都已經(jīng)長(zhǎng)出長(zhǎng)棘, 測(cè)量理化因子的同時(shí), 觀察了魚(yú)苗的活動(dòng)情況。6：00, 車間內(nèi)光照為 109.0lx,魚(yú)苗胃內(nèi)食物極少或者沒(méi)有, 開(kāi)始從晚上的隨水漂浮轉(zhuǎn)為主動(dòng)游泳, 之后, 出現(xiàn)身體向前竄動(dòng)的攝食動(dòng)作; 8： 00, 攝食動(dòng)作明顯加強(qiáng), 魚(yú)苗腹部飽滿, 以后整個(gè)白天, 都有攝食動(dòng)作, 且腹部飽滿; 至20： 00,車間內(nèi)光照強(qiáng)度為0, 用燈光照射育苗池發(fā)現(xiàn)魚(yú)苗隨充氣造成的水流翻滾, 無(wú)攝食動(dòng)作, 偶爾因燈光刺激而活動(dòng)。

圖4 育苗水體的pH值變化Fig. 4 Variation of pH in breeding water

2.1.2 水體氨氮含量變化及對(duì)魚(yú)苗生長(zhǎng)的影響

育苗期間, 4次測(cè)定了水體的氨氮含量, 育苗第1天(水源)、第7天、第18天、第29天的氨氮含量,分別為0.24, 0.47, 2.53, 0.97 mg/L。從結(jié)果看, 本方法進(jìn)行育苗, 水體氨氮含量不斷增高, 在第 18天達(dá)到最高(因?yàn)榇饲安粨Q水), 以后隨著換水量增大, 氨氮含量下降。第18天的氨氮含量達(dá)2.53 mg/L, 魚(yú)苗活動(dòng)并無(wú)明顯異常。

2.1.3 育苗水體浮游生物的測(cè)定

2.1.3.1 育苗水體浮游生物的種類組成

育苗第7天開(kāi)始, 每隔3 d采樣1次, 測(cè)定育苗池中輪蟲(chóng)、橈足類以外的浮游生物種類, 見(jiàn)表2。

表1 24 h育苗水體環(huán)境因子的變化Tab. 1 Daily variations of environment factors

2.1.3.2 育苗水體中微型浮游生物量的變化

育苗池?fù)Q水之前, 分 4次取樣測(cè)定了浮游植物和浮游動(dòng)物(原生動(dòng)物)的生物量。浮游植物生物量： 第 7天5.77×106個(gè)/L, 第11天4.36×106個(gè)/L, 第15天7.71×106個(gè)/L, 第19天9.85×106個(gè)/L; 浮游原生動(dòng)物的生物量： 第 7天 1.78×106個(gè)/L, 第 11天 0.74×106個(gè)/L,第15天0.30×106個(gè)/L, 第19天0.15×106個(gè)/L。這些浮游生物(浮游植物和浮游原生動(dòng)物)是育苗過(guò)程中自然出現(xiàn)在育苗池中, 在育苗池中生長(zhǎng), 構(gòu)成了育苗池中生物的組成部分, 在育苗池中發(fā)揮作用。

表2 育苗水體中出現(xiàn)的浮游生物種類Tab. 2 Planktons in breeding pools

2.2 魚(yú)苗密度變化和育苗效果

育苗期間, 4次測(cè)定了池中的魚(yú)苗密度。第1天(仔魚(yú)下池)密度為 11×103尾/m3, 第 7 天為 10×103尾/m3, 第 19天為 2×103尾/m3, 第 30天為 0.3×103尾/m3。隨著育苗時(shí)間的推移, 魚(yú)苗密度逐漸下降,符合石斑魚(yú)育苗的一般規(guī)律。育苗到第30天, 育苗成活率為2.73%。

2.3 魚(yú)苗生長(zhǎng)情況

2.3.1 初孵仔魚(yú)

剛孵化出膜的仔魚(yú), 身體前端有一個(gè)橢圓形半透明的卵黃囊, 卵黃囊后部有一小油球, 初孵仔魚(yú)由于油球的作用傾斜浮在水面上, 偶爾垂直向上游動(dòng)。

2.3.2 開(kāi)口仔魚(yú)

放苗的第 3天, 觀察到卵黃囊明顯變小且接近消失, 此時(shí)期仔魚(yú)由開(kāi)始由內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)型向外源性營(yíng)養(yǎng)型轉(zhuǎn)變, 口部開(kāi)始形成, 出現(xiàn)胸鰭原基, 在水中觀察可明顯看到仔魚(yú)頭部有兩個(gè)黑點(diǎn), 腹部、尾部各一個(gè)黑點(diǎn), 頭朝下浮于水中, 已可在水中平游。用燒杯觀察時(shí), 可見(jiàn)仔魚(yú)用吻部用力的啄燒杯底部, 有明顯的攝食行為, 此時(shí)應(yīng)保證水體中有足夠的適合仔魚(yú)攝食的餌料。

2.3.3 背棘和腹棘根芽出現(xiàn)

放苗的第7天, 此時(shí)仔魚(yú)全長(zhǎng)為0.250 cm±0.02 cm, 背棘和腹棘根芽出現(xiàn), 頭部增高, 消化管上部黑色素增大, 在池中有聚群行為, 喜歡在池角和邊緣活動(dòng), 有趨光行為。用燒杯打起觀察, 可明顯看到仔魚(yú)身體兩側(cè)長(zhǎng)出一對(duì)翅狀鰭條, 振動(dòng)較快, 黑色素加深, 仔魚(yú)攝食能力增強(qiáng), 活力較好。

2.3.4 背鰭長(zhǎng)棘和腹鰭長(zhǎng)棘出現(xiàn)

放苗的第 10天, 此時(shí)全長(zhǎng) 0.350 cm±0.01 cm,背鰭位置上出現(xiàn)一枚長(zhǎng)棘, 棘上有黑色素分布, 棘緣呈鋸齒狀, 在身體兩側(cè)的腹鰭位置上也長(zhǎng)出兩枚長(zhǎng)棘, 與背棘相似, 魚(yú)體全身布滿黏液。用燒杯觀察,呈“小三叉”狀。魚(yú)苗在池中分布面積稍微擴(kuò)大, 但四角的分布密度仍然比較高, 四壁稍低。主要在水中中上層活動(dòng)。

2.3.5 背鰭、臀鰭鰭條出現(xiàn)

放苗的第17天, 此時(shí)全長(zhǎng)0.8 cm±0.1 cm, 背鰭長(zhǎng)棘和腹鰭長(zhǎng)棘繼續(xù)加長(zhǎng), 呈“大三叉”狀。長(zhǎng)棘長(zhǎng)及尾部, 骨骼和肌肉系統(tǒng)迅速發(fā)育, 身體中軸銀色脊索明顯可見(jiàn), 背鰭、臀鰭、尾鰭鰭條均可觀察到。消化道進(jìn)一步分化。

2.3.6 背鰭、臀鰭、尾鰭鰭條形成

放苗第23天, 全長(zhǎng)1.45 cm, 第二背鰭棘和腹鰭棘絕對(duì)長(zhǎng)度達(dá)到仔稚魚(yú)階段的最大值。魚(yú)體頭部眼眶斜后上方色斑增多并有向胸鰭附近擴(kuò)大之勢(shì)。第一背鰭和第二背鰭已連在一起, 臀鰭第一鰭條變粗形成鰭棘, 各鰭已基本形成。

放苗第34天, 平均全長(zhǎng)2.45 cm, 部分生長(zhǎng)快的個(gè)體開(kāi)始長(zhǎng)出鱗片。此時(shí), 魚(yú)苗可以進(jìn)入下一階段的標(biāo)粗培育, 實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

3 討論

3.1 水環(huán)境因子對(duì)育苗的影響

育苗水體溫度是育苗成功與否的關(guān)鍵水質(zhì)指標(biāo)。很多學(xué)者皆對(duì)育苗過(guò)程中水體適宜溫度進(jìn)行論述與報(bào)道。周仁杰[10]在斜帶石斑魚(yú)(Epinephelus coioides)育苗試驗(yàn)的結(jié)果顯示, 水溫范圍在 27.3～30.5℃, 魚(yú)苗生長(zhǎng)發(fā)育正常; 王云新[11]認(rèn)為斜帶石斑魚(yú)最佳培養(yǎng)水溫在 25～27℃; 陳國(guó)華[3]報(bào)道點(diǎn)帶石斑魚(yú)(Epinephelus malabaricus)仔魚(yú)期適宜水溫為 24～29℃, 低于或高于這個(gè)范圍則會(huì)影響仔魚(yú)的正?；顒?dòng), 而稚魚(yú)期適溫略寬。本實(shí)驗(yàn)中鞍帶石斑魚(yú)育苗期間測(cè)得水溫范圍在 28～30.8℃,魚(yú)苗的發(fā)育正常, 與黃進(jìn)光[5]報(bào)道的鞍帶石斑魚(yú)育苗水體溫度為 27～29.5℃接近。龔孟忠[2]在水溫 23.30～27.0℃的條件下也取得了鞍帶石斑魚(yú)育苗的成功。

育苗水體鹽度、溶氧量、pH值的變化范圍與斜帶石斑魚(yú)[10,11]、點(diǎn)帶石斑魚(yú)[3,4]等基本一致。

3.1.1 光照對(duì)育苗的影響

本次育苗遇到 3次低光照情況, 持續(xù)時(shí)間都不長(zhǎng), 從育苗效果看, 沒(méi)有造成大的影響。正常情況下,鞍帶石斑魚(yú)的育苗車間取自然光, 育苗池水面光照4 000～5 000 lx是適宜的。

3.1.2 氨氮對(duì)育苗的影響

非離子氨對(duì)水生物有較強(qiáng)的毒性, 中國(guó)漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定非離子氨≤0.20 mg/L。周永欣等[12]研究未離解氨對(duì)草魚(yú)種的毒性, 未離解氨對(duì)26、47、125日齡草魚(yú)的96 h LC50分別是0.570、1.609和1.683 mg/L, 對(duì) 47、60、125日齡的 48 h LC50則分別為1.727、2.050和2.141 mg/L。在亞急性毒性試驗(yàn)中, 根據(jù)氨對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)和鰓組織的影響, 認(rèn)為未離解氨的最大允許毒物質(zhì)量濃度為0.054～0.099 mg/L。曲克明等[13]研究氨氮對(duì)大菱鲆(Scophthatmus maximus)的急性毒性效應(yīng), 過(guò)飽和溶氧條件下, 非離子氨對(duì)大菱鲆的 48 h LC50值和 96 LC50值分別為 2.4 mg/L 和1.73 mg/L; 正常溶氧條件下, 非離子氨對(duì)大菱鲆的48 h LC50值和96 LC50值分別為1.82 mg/L和1.14 mg/L。采用本實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行鞍帶石斑魚(yú)的育苗,在育苗第18天, 氨氮含量達(dá)到2.53 mg/L, 經(jīng)用“海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB 3097-1997)附錄B”的非離子氨換算方法, 得非離子氨為0.051 mg/L, 并且在育苗過(guò)程中立即采取了換水措施, 未見(jiàn)魚(yú)苗出現(xiàn)急性中毒現(xiàn)象,但是否存在組織損傷等影響, 值得進(jìn)一步研究。

3.2 EM菌+高級(jí)蝦片的生態(tài)育苗模式

用本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行鞍帶石斑魚(yú)人工育苗, 實(shí)際上在水體中建立了一條碎屑食物鏈： 定時(shí)定量加入蝦片和微生物制劑, 利用微生物分解蝦片、各類生物的排泄廢物和殘?bào)w; 這樣的育苗方法, 育苗池中還會(huì)自然出現(xiàn)一些微型浮游生物(如原生動(dòng)物); 作為餌料投入的輪蟲(chóng)可攝食微型浮游生物、單細(xì)胞藻類等; 育苗后期作為餌料投入的橈足類, 攝食微型浮游生物、輪蟲(chóng)和藻類等; 作為培育對(duì)象的石斑魚(yú)苗則攝食輪蟲(chóng)、橈足類。這種EM菌+高級(jí)蝦片的育苗方法解決了石斑魚(yú)育苗中幾個(gè)不易解決的問(wèn)題： (1) 提供了石斑魚(yú)的開(kāi)口餌料。石斑魚(yú)育苗的難點(diǎn)之一在于如何解決幼苗開(kāi)口期的營(yíng)養(yǎng)需求[14]。龔孟忠[2]用雙殼類的受精卵、擔(dān)輪幼蟲(chóng)和面盤幼蟲(chóng)作為鞍帶石斑魚(yú)的開(kāi)口餌料能夠順利渡過(guò)此時(shí)期, 但投喂受精卵對(duì)水質(zhì)影響較大, 不宜多過(guò)投喂。本實(shí)驗(yàn)利用水體中出現(xiàn)的微型浮游生物作為仔魚(yú)的開(kāi)口餌料, 開(kāi)口效果良好; (2) 石斑魚(yú)育苗前二周, 因仔魚(yú)太小, 對(duì)育苗池?fù)Q水相當(dāng)困難。目前, 常用的石斑魚(yú)人工育苗的方法, 均以接種單胞藻類來(lái)改善水質(zhì), 如利用小球藻(Chlorella)、金藻等[3～5]配成“綠水”培育仔魚(yú), 使水體中維持一種生態(tài)平衡。本實(shí)驗(yàn)的育苗方法, 實(shí)際上是在育苗水體構(gòu)建了一條碎屑食物鏈, 物質(zhì)和能量沿著食物鏈傳遞, 微生物和藻類利用水體中溶解的無(wú)機(jī)鹽, 避免無(wú)機(jī)鹽在水體中快速積累, 從而保持水質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定, 達(dá)到育苗前二周不換水的目的。但需要說(shuō)明的是, 這樣建立的育苗系統(tǒng)并不是一個(gè)能夠自我維持的體系, 只是在一定程度上保持相對(duì)穩(wěn)定, 一些指標(biāo)還是在不斷上升的, 如 NH3－N, NO2－N, COD等指標(biāo)實(shí)際上也是在不斷上升的, 只是上升的速度有所控制, 并且能夠在 2周左右的時(shí)間內(nèi)滿足石斑魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育的需要, 正好解決石斑魚(yú)育苗早期(前2周)難于換水的問(wèn)題。之后, 隨著魚(yú)苗的生長(zhǎng),活動(dòng)能力增強(qiáng), 可以通過(guò)對(duì)育苗池?fù)Q水, 解決育苗池水中無(wú)機(jī)鹽不斷上升的問(wèn)題, 使石斑魚(yú)育苗過(guò)程得以完成; (3) 輪蟲(chóng)、橈足類作為石斑魚(yú)的餌料投入到育苗水體, 當(dāng)天不可能全部被魚(yú)苗攝食, 總會(huì)存留一部分, 本實(shí)驗(yàn)的育苗方法中, 育苗池中存在豐富的微生物、微型浮游生物, 成為了輪蟲(chóng)、橈足類的餌料, 保證后者不會(huì)因饑餓降低其作為石斑魚(yú)餌料的價(jià)值, 有利于提高育苗成活率。

3.3 微型浮游生物進(jìn)入育苗池的可能途徑和意義

石斑魚(yú)工廠化育苗中, 育苗池會(huì)自然出現(xiàn)一些微型浮游生物。分析傳入途徑可能有二： (1) 石斑魚(yú)育苗場(chǎng)都建造在海邊, 附近常有大量的養(yǎng)魚(yú)、養(yǎng)蝦池分布, 魚(yú)蝦養(yǎng)殖池的微型浮游生物可能通過(guò)空氣傳播, 養(yǎng)殖池大量使用增氧機(jī), 更增大了微型浮游生物通過(guò)空氣傳播的可能性; (2) 育苗過(guò)程中必須向育苗池中投入輪蟲(chóng)、橈足類, 在這些生物餌料中混雜有部分微型浮游生物。盡管這些微型浮游生物不是人為加入, 但按目前的工廠化育苗條件, 育苗池中出現(xiàn)一些微型浮游生物也是不可避免的。這些微型浮游生物在育苗池中生長(zhǎng), 成為育苗水體生物群落的組成部分, 起到保持水質(zhì)穩(wěn)定的作用。微型浮游動(dòng)物在育苗池中的另一個(gè)重要作用是作為鞍帶石斑魚(yú)仔魚(yú)的開(kāi)口餌料, 尤穎哲[15]曾投喂培育的原生動(dòng)物作為鞍帶石斑魚(yú)仔魚(yú)的開(kāi)口餌料, 取得了比投喂牡蠣受精卵或者S型輪蟲(chóng)更好的培育效果。本實(shí)驗(yàn)中, 育苗池中保持有較高的原生動(dòng)物密度, 利用這類生物作為鞍石斑魚(yú)仔魚(yú)的開(kāi)口餌料, 取得了較好效果。

[1] 張海發(fā), 王云新, 劉付永忠, 等．鞍帶石斑魚(yú)人工繁育及胚胎發(fā)育研究[J]．廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2008,28(4)： 36-40．

[2] 龔孟忠, 陳慧, 范希軍．龍膽石斑魚(yú)引種及人工育苗技術(shù)的初步研究[J]．福建水產(chǎn), 2004, 1： 47-50．

[3] 陳國(guó)華, 張本．點(diǎn)帶石斑魚(yú)人工育苗技術(shù)[J]．海洋科學(xué), 2001, 25(1)： 1-3．

[4] 全漢鋒, 劉振勇, 范希軍．點(diǎn)帶石斑魚(yú)人工育苗技術(shù)的初步研究[J]．福建水產(chǎn), 2004, 3(1)： 31-34．

[5] 黃進(jìn)光．龍膽石斑魚(yú)人工育苗技術(shù)初探[J]．科學(xué)養(yǎng)魚(yú),2006, 12： 34-36．

[6] 黎祖福, 陳省平, 莊余謀, 等．鞍帶石斑魚(yú)人工繁殖與魚(yú)苗培育技術(shù)研究[J]．海洋水產(chǎn)研究, 2006, 27(3)：78-85．

[7] 楊洪志, 梁榮峰．鞍帶石斑魚(yú) Epinephelus lanceolatus(Bloch)繁殖生物學(xué)的初步研究[J]．現(xiàn)代漁業(yè)信息,2002, 17(7)： 20-21．

[8] 關(guān)則智．鞍帶石斑魚(yú)高位池育苗技術(shù)探討[J]．中國(guó)水產(chǎn), 2009, 2： 44-45．

[9] 蒲利云, 馮永勤, 董楊, 等．室外高位池鞍帶石斑魚(yú)人工育苗的初步試驗(yàn)[J]．科學(xué)養(yǎng)魚(yú), 2009, 6： 26-27．[10] 周仁杰, 林濤．斜帶石斑魚(yú)人工育苗技術(shù)試驗(yàn)[J]．臺(tái)灣海峽, 2002, 21(1)： 57-62．

[11] 王云新, 黃國(guó)光, 劉付永忠等．斜帶石斑魚(yú)人工育苗試驗(yàn)[J]．漁業(yè)現(xiàn)代化, 2003, 6： 14-15．

[12] 周永欣, 張甫英, 周仁珍．氨對(duì)草魚(yú)的急性和亞急性毒性[J]．水生生物學(xué)報(bào), 1986, 10(1)： 32-38．

[13] 曲克明, 徐勇, 馬紹賽, 等．不同溶解氧條件下亞硝酸鹽和非離子氨對(duì)大菱鲆的急性毒性效應(yīng)[J]．海洋水產(chǎn)研究, 2007, 28(4)： 83-88．

[14] 何永亮, 區(qū)又君, 李加兒, 等．石斑魚(yú)人工繁育技術(shù)研究進(jìn)展[J]．南方水產(chǎn), 2008, 4(3)： 75-79．

[15] 尤穎哲．龍膽石斑鱸人工育苗仔魚(yú)開(kāi)口及前期餌料轉(zhuǎn)換技術(shù)研究[J]．中國(guó)水產(chǎn), 2007, 6： 54-55．

Industrial seed culture of Epinephelus lanceolatus

HUANG Zong-wen, LUO Jian, LIN Bin, GUO Ren-xiang, YANG Wei, CHEN Guo-hua
(College of Ocean, Hainan University, Key Laboratory of Tropic Biological Resources of Ministry of Education,Hainan University, Haikou 570228, China)

Mar., 31, 2010

Epinephelus lanceolatus; artificial breeding; water environment factors

We reported a modified industrial breeding method of Epinephelus lanceolatus. The variations of water environment factors, as well as the type and quantities of micro-planktons were recorded during the whole artificial breeding process. The fertilized eggs of E. lanceolatus could hatch completely and develop into normal larval fishes under the following conditions： 28～30.7℃, 27～32 salinity, pH 7.39～7.90, ＞6 mg/L DO, and 3315.9 lx average noon illumination intensity. Variations of these environmental factors during the time span of a day were also recorded every two hours. The concentration of Ammonia nitrogen went from 0.24 mg/L up to 2.53 mg/L 18 days after the addition of water, and it then dropped dramatically after water renewing at the later stage. During the whole culture process, 12 types of phytoplanktons and 5 types of zooplanktons were detected in the breeding pool. The average concentrations of plankton and protozoa were 6.92×106/L and 0.74×106/L, respectively. At the end of our 34-day industrial culture experiment, the average length of grouper larvae reached 2.45cm, and the density was 300/m3.The survival rate of grouper larvae was 2.73%. The result of this study indicated that using effective-microorganism(EM) mix shrimp-cracker method, the water quality could remain suitable for E. lanceolatus larvae growth.

S962

A

1000-3096(2010)09-0023-07

2010-03-31;

2010-06-18

國(guó)家科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(2007BAD29B01,2007BAD29B02); 海南大學(xué)重點(diǎn)科研資助項(xiàng)目(hd09xm11)

黃宗文(1984-), 男, 廣西北海人, 碩士生, 研究方向?yàn)闊釒a(chǎn)養(yǎng)殖生物生殖調(diào)控與繁育, E-mail： wening201@163.com; 陳國(guó)華,通信作者, 教授, E-mail： chguh@hainu.edu.cn

(本文編輯： 譚雪靜)