陳姝娟，張若男，李 健

（1.哈爾濱商業(yè)大學食品工程學院，黑龍江哈爾濱150076；2.黑龍江省衛(wèi)生學校，黑龍江哈爾濱150036）

蕎麥茶是以蕎麥為原料，經(jīng)殺青、揉捻、干燥等工藝加工而成[1]。蕎麥茶中含有豐富的蛋白質、礦物質和黃酮等生物活性物質。黃酮具有抗氧化、改善血液循環(huán)、降低膽固醇、改善心腦血管疾病癥狀、殺菌消炎等功效[2～3]。因此，開展對黃酮類化合物的提取工藝的研究具有十分重要的現(xiàn)實意義。超聲提取技術主要是利用超聲波的空化作用加速有效成分的浸出提取，同時超聲波的次級效應也有利于提取。超聲波提取總黃酮具有省時、節(jié)能、提取率高等優(yōu)點。本文采用超聲波溶劑法提取總黃酮，以總黃酮含量為考察指標，確定了較優(yōu)的工藝條件。

1 材料和方法

1.1 材料和設備

蕎麥茶：企業(yè)提供；蘆丁標準品：購于合肥一力生物科技有限公司；無水乙醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁均為分析純試劑。

電子分析天平G238：上海醫(yī)用激光儀器廠；溫壓雙控微波萃取儀MDS-6型：新儀微波化學科技有限公司；旋轉蒸發(fā)器R-205型：上海申勝生物技術有限公司；循環(huán)水式真空泵SHZ-D（Ⅲ）型：鞏義市英峪于華儀器廠；紫外可見分光光度計722型：上海精密科學儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品的制備方法

將蕎麥茶粉碎后，準確稱取2.5000g蕎麥茶粉末于250mL碘量瓶中，加入適量濃度和體積的乙醇溶液，在一定的溫度、功率等條件下超聲提取一定時間，取出抽濾、干燥后得樣品。

1.2.2 總黃酮含量的計算方法

2 結果與討論

2.1 標準曲線

通過實驗結果繪制得到標準曲線（如圖1所示），得吸光度y與總黃酮濃度x（mg/mL）之間的回歸方程為：y=0.0124x－0.0034（r=0.9994）

圖1 蘆丁標準曲線圖Fig.1 Standard curve of rutin

圖2 溶劑濃度對提取效果的影響Fig.2 The effect of solvent concentration on extraction

2.2 單因素實驗

選擇溫度、溶劑濃度、固液比、萃取時間等因素考察對提取物總黃酮含量的影響，以確定相關因素及其范圍。

2.2.1 溶劑濃度的選擇

在一定的提取條件下，分別以45%～95%的乙醇濃度提取總黃酮并測定提取物中總黃酮的含量。圖2結果表明：在相同超聲提取條件下，65%～95%乙醇對總黃酮的提取效果較好，其他濃度的乙醇提取效果較差?？紤]節(jié)約成本，最優(yōu)乙醇濃度為65%。造成這種結果的原因可能是乙醇含水量較多時，提取出了較多的水溶性多糖、色素和果膠等雜質而影響總黃酮的萃取效率。

2.2.2 提取溫度的選擇

在一定的提取條件下，分別在55～75℃的溫度下提取總黃酮并測定提取物中總黃酮的含量。由圖3可知，隨著溫度的升高，總黃酮含量呈先上升再平緩下降的趨勢，這說明65℃是總黃酮提取的最佳溫度。溫度大于65℃時，隨溫度的升高，一些大分子物質溶出，造成提取液的顏色變深，一些活性成分被破壞，曲線呈平緩下降趨勢，即總黃酮含量降低。

圖3 提取溫度對提取效果的影響Fig.3 The effect of extraction temperature on extraction

圖4 提取時間對提取效果的影響Fig.4 The effect of extraction time on extraction

2.2.3 提取時間的選擇

在一定的提取條件下，分別以10～50min的提取時間提取總黃酮并測定提取物中總黃酮的含量。由圖4可知，在相同的超聲提取條件下，提取時間對提取率具有顯著的影響。在10min～30min范圍內(nèi)，隨著提取時間的增長，總黃酮濃度也越高，而30min之后，隨著時間的延長，總黃酮濃度有稍微下降的趨勢，這就揭示著30min時蕎麥茶中總黃酮的提取已經(jīng)基本達到了平衡，30min是最佳的超聲提取時間。

2.2.4 固液比的選擇

在一定的提取條件下，分別以1/14～1/22的固液比提取總黃酮并測定提取物中總黃酮的含量。從圖5可以看出，在相同超聲提取條件下，1∶18的固液比是總黃酮提取的一個最佳點，繼續(xù)增加固液比總黃酮含量已呈下降趨勢，而且增大固液比會增加提取成本，因此確定固液比為1∶18為最佳點。

圖5 固液比對萃取效果的影響Fig.5 The effect of solid-liquid ratio on extraction

2.2.4 超聲功率的選擇

在一定的提取條件下，分別以50P%～90P%的超聲功率提取總黃酮并測定提取物中總黃酮的含量。從圖6可以看出，在相同提取條件下，70P%的超聲功率是總黃酮提取的一個最佳點，繼續(xù)增加超聲功率總黃酮含量增加不顯著，而且增大超聲功率會增加提取成本，因此確定70P%的超聲功率為最佳點。

圖6 超聲功率對萃取效果的影響Fig.6 The effect of ultrasonic power on extraction

3 結論

（1）據(jù)實驗結果繪制標準曲線，得吸光度值y與總黃酮濃度x（mg/mL）之間的回歸方程為：y=0.0124x-0.0034（r=0.9994）。

（2）總黃酮超聲提取的最佳工藝條件為：乙醇濃度65%，提取溫度70℃，提取時間30min，料液比1：18,超聲功率70P%。

[1]林汝法.蕎麥的含量測定[J］.中國蕎麥，1994：26～29.

[2]陳復生，李紅良，趙琳.陳皮中抗氧化成分的提取工藝研究[J］.鄭州工程學院學報，2003，24（1）：24～26.

[3]胡鳳蓮，倪細爐，劉文哲,等.魚腥草中總黃酮和槲皮素含量的動態(tài)變化[J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36（10）：4128～4130.