亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        香丹滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

        2010-09-27 08:57:24李敏雷慶忠李桂生李延團(tuán)
        中國(guó)現(xiàn)代中藥 2010年6期

        李敏,雷慶忠,李桂生,李延團(tuán)

        (1.中國(guó)海洋大學(xué),山東 青島 266003; 2.山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心,山東 煙臺(tái) 264003)

        香丹滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

        李敏1*,雷慶忠2,李桂生2,李延團(tuán)1

        (1.中國(guó)海洋大學(xué),山東 青島 266003; 2.山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心,山東 煙臺(tái) 264003)

        目的:建立香丹滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:采用TLC鑒別制劑中的降香和丹參;采用HPLC測(cè)定制劑中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量,色譜條件分別為Discovery C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相為乙腈-甲醇-水-磷酸(15∶65∶20∶0.3)和乙腈-水-甲酸(22∶78∶1.5),檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm和286nm。結(jié)果:在TLC色譜圖中均能檢測(cè)出降香和丹參。丹參酮ⅡA線性范圍2.6~81.6μg·mL-1,回收率為99.19%,RSD=1.34%;丹酚酸B線性范圍50~800μg·mL-1,回收率為98.84%,RSD=1.74%。結(jié)論:所建立鑒別方法專屬性強(qiáng),定量方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,可用于香丹滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制。

        香丹滴丸;HPLC;TLC;丹參酮ⅡA;丹酚酸B

        香丹滴丸是由香丹注射液(部頒標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-3289-98)改變提取工藝和劑型而來(lái),具有擴(kuò)張血管,增進(jìn)冠狀動(dòng)脈血流量等功效,為了適應(yīng)注射劑制備工藝要求,原制備工藝中主要提取降香和丹參兩味藥材的水溶性部分,棄去具有藥理活性的脂溶性部分。大量文獻(xiàn)和臨床報(bào)道降香揮發(fā)油是降香藥材的主要活性成分,具有行氣止痛,活血止血作用,臨床上主要用于冠心病的治療[1,2];丹參中脂溶性成分丹參酮和水溶性成分丹參酚酸類對(duì)心臟和血管性疾病都有很好的防治作用[3-5]。故我們?cè)谠瓌┬偷幕A(chǔ)上根據(jù)新劑型的特點(diǎn)及藥效學(xué)研究結(jié)果,對(duì)原劑型中的降香和丹參提取工藝進(jìn)行了重大改進(jìn),采用水蒸氣蒸餾法提取降香中的揮發(fā)油,采用酸水滲漉法和乙醇滲漉法分別提取丹參中的酚酸類成分和菲醌類成分,制成滴丸劑。香丹滴丸原料是由丹參水提取物、醇提取物及降香揮發(fā)油組成,按照中醫(yī)藥理論,丹參善入心及心包經(jīng)祛瘀止痛,活血通脈;降香能行氣活血,止痛止血。丹參與降香等量相伍為用,氣血并治,是一祛瘀行氣止痛的佳方。為了有效地控制該制劑質(zhì)量,保證其臨床療效,本實(shí)驗(yàn)采用TLC對(duì)制劑中的丹酚酸B、丹參酮ⅡA和降香揮發(fā)油進(jìn)行了定性研究,同時(shí)采用HPLC對(duì)制劑中丹參的主要活性成分丹酚酸B和丹參酮ⅡA進(jìn)行了含量測(cè)定,建立了可靠、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)的質(zhì)量控制方法。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器

        TSP SpectraSYSTEM P1000型高效液相泵系統(tǒng);TSP Spectra100紫外檢測(cè)器;CHROMTEK色譜工作站;Discovery C18(250mm×4.6mm,5μm)色譜柱;CBL Model 100型柱溫箱。

        1.2 試藥

        丹酚酸B對(duì)照品(批號(hào)111562-200302)、丹參酮ⅡA對(duì)照品(批號(hào)110766-200416)、降香對(duì)照藥材(批號(hào)120952-200506)均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;乙腈、甲醇為色譜純,水為去離子水,其他試劑為化學(xué)純;硅膠G薄層板(山東煙臺(tái)化學(xué)工業(yè)研究所);香丹滴丸(山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心自制,批號(hào)091006,091008,091010)。

        2 薄層色譜鑒別

        2.1 丹參酮ⅡA的TLC鑒別

        取本品60丸,研碎,加75%甲醇10mL,超聲處理10min,作為供試品溶液。另取丹參酮ⅡA對(duì)照品適量,精密稱定,加75%甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。再按處方配比,去除丹參,按供試品溶液的制備方法制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)[6],吸取上述3種溶液各5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以苯-醋酸乙酯(19∶1)為展開劑,展開,取出,晾干。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的暗紅色斑點(diǎn),陰性對(duì)照溶液無(wú)此斑點(diǎn),見圖1。

        2.2 丹酚酸B的TLC鑒別

        取本品60丸,研碎,加75%甲醇10mL,超聲處理10min,精密吸取1mL,置10mL容量瓶中,加75%甲醇至刻度,搖勻,作為供試品溶液。另取丹參酚酸B對(duì)照品適量,精密稱定,加75%甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液;再按處方配比,去除丹參,按供試品溶液的制備方法制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)[6],吸取上述3種溶液各5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,以甲苯-三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(254nm)下檢視。結(jié)果在供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn),陰性對(duì)照溶液無(wú)此斑點(diǎn),見圖2。

        2.3 降香揮發(fā)油的TLC鑒別

        取本品30丸,研碎,置具塞錐形瓶中,加乙醚10mL,振搖2min,濾過(guò),濾液揮干,殘?jiān)?mL乙醇溶解,作為供試品溶液。另取降香對(duì)照藥材粉末約2g,加乙醚20mL,加熱回流30min,濾過(guò),濾液揮干,殘?jiān)右掖?mL使溶解,作為對(duì)照品溶液。再按處方配比,去除降香,按供試品溶液的制備方法制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)[6],吸取上述3種溶液各2μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙醚-三氯甲烷(7∶2∶11)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以1%香草醛硫酸與無(wú)水乙醇(1∶9)的混合溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果在供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),陰性對(duì)照溶液無(wú)此斑點(diǎn),見圖3。

        1.丹參酮ⅡA對(duì)照品;2~4.香丹滴丸;5.缺丹參的陰性樣品圖1 香丹滴丸中丹參酮ⅡA的TLC色譜圖1.丹參酚酸B對(duì)照品;2~4.香丹滴丸;5.缺丹參的陰性樣品圖2 香丹滴丸中丹參酚酸B的TLC色譜圖1.降香對(duì)照藥材;2~4.香丹滴丸;5.缺降香的陰性樣品圖3 香丹滴丸中降香揮發(fā)油的TLC色譜圖

        3 丹參酮ⅡA的含量測(cè)定

        3.1 色譜條件

        色譜柱為Discovery C18;流動(dòng)相為乙腈-甲醇-水-磷酸(15∶65∶20∶0.3);檢測(cè)波為270nm;流速為1.0mL· min-1;柱溫為35℃,HPLC圖見圖4。理論塔板數(shù)按丹參酮ⅡA計(jì)算,應(yīng)不低于2 000。

        3.2 對(duì)照品溶液的制備

        精密稱取丹參酮ⅡA對(duì)照品適量,加甲醇制成每1mL含丹參酮ⅡA0.018mg的溶液。

        3.3 供試品溶液的制備

        取本品10丸,研細(xì),取約0.25g,精密稱定,置25mL量瓶中,加甲醇溶液,超聲處理10min,放冷至室溫,加甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。

        A.陰性對(duì)照品 B.丹參酮ⅡA對(duì)照品 C.香丹滴丸圖4 陰性對(duì)照、丹參酮ⅡA對(duì)照品、香丹滴丸的HPLC圖

        3.4 陰性對(duì)照液的制備

        陰性對(duì)照液的制備:丹參先以10倍量的0.01mol·L-1鹽酸溶液滲漉,收集滲漉液,減壓濃縮至相對(duì)密度為1.15(60℃),加乙醇使含醇量達(dá)75%,靜置24h,取上清液,備用;藥渣繼續(xù)用10倍量的95%乙醇滲漉,滲漉液濾過(guò),濾液與上述上清液合并,減壓濃縮并干燥,粉碎,即得丹參提取物。

        取丹參提取物0.15g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加0.01mol·L-1鹽酸溶液10mL,超聲處理20min,濾過(guò),濾器與殘?jiān)?.01mol·L-1鹽酸溶液10mL洗滌,濾液與洗液合并,置50mL量瓶中,加入處方量的聚乙二醇4000、聚乙二醇6000及降香揮發(fā)油,加甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。

        3.5 線性關(guān)系考察

        精密吸取102μg·mL-1丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0mL置10mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,分別精密吸取20μL溶液,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得回歸方程為Y=104 009X+85 646,r=0.999 9。結(jié)果表明,丹參酮ⅡA濃度在2.6~81.6μg·mL-1具有良好的線性關(guān)系。

        3.6 精密度試驗(yàn)

        精密吸取上述供試品溶液20μL,依上述色譜條件,重復(fù)進(jìn)樣6次,測(cè)定峰面積,結(jié)果RSD=0.28%。

        3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

        取同一供試品溶液,分別于0,2,4,8,16,24h進(jìn)樣,記錄峰面積,結(jié)果丹參酮ⅡA峰面積的RSD=1.06%,表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

        3.8 重現(xiàn)性試驗(yàn)

        取同批供試品,按上述測(cè)定方法重復(fù)檢測(cè)6次,測(cè)得本品丹參酮ⅡA平均含量為2.21mg·g-1,即0.12mg/丸,RSD=1.43%,表明本法的重現(xiàn)性良好。

        3.9 回收率試驗(yàn)

        采用加樣回收法,取同一批已知丹參酮ⅡA適量的香丹滴丸細(xì)粉,精密稱取6份,分別準(zhǔn)確加入同量的對(duì)照品,各份均按上述色譜條件測(cè)定,結(jié)果見表1。

        表1 丹參酮ⅡA加樣回收率試驗(yàn)

        注:丹參酮ⅡA照品加入量均為0.225mg

        4 丹酚酸B的含量測(cè)定

        4.1 色譜條件

        色譜柱為Discovery C18;流動(dòng)相為乙腈-水-甲酸(22∶78∶1.5);檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm;流速為0.7mL·min-1;柱溫為35℃。HPLC圖見圖5。理論塔板數(shù)按丹參酚酸B計(jì)算,應(yīng)不低于2 000。

        A. 陰性對(duì)照品 B. 丹酚酸B對(duì)照品 C.香丹滴丸圖5 陰性對(duì)照品、丹酚酸B對(duì)照品、香丹滴丸的HPLC圖

        4.2 對(duì)照品溶液的制備

        精密稱取丹酚酸B對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1mL含丹參酚酸B0.20mg的溶液。

        4.3 供試品溶液的制備

        取本品10丸,研細(xì),取約0.5g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加0.01mol·L-1鹽酸溶液25mL,超聲處理20min,濾過(guò),濾液置50mL量瓶中,濾器與殘?jiān)眠m量0.01mol·L-1鹽酸溶液分次洗滌,洗液與濾液合并,加0.01mol·L-1鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。

        4.4 陰性對(duì)照品溶液的制備

        取丹參提取物0.15g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加0.01mol·L-1鹽酸溶液25mL,超聲處理20min,濾過(guò),濾器與殘?jiān)?.01mol·L-1鹽酸溶液25mL分次洗滌,棄去濾液,濾渣加20mL甲醇溶解,加入處方量的聚乙二醇4000、聚乙二醇6000及降香揮發(fā)油,置50mL量瓶中,加0.01mol·L-1鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。

        4.5 線性關(guān)系考察

        精密吸取2.004mg·mL-1丹酚酸B對(duì)照品溶液0.25,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0mL分別置10mL量瓶中,加0.01mol·L-1鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,精密吸取20μL,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得回歸方程為Y=33 169X+2×106,r=0.999 6。結(jié)果表明,丹酚酸B濃度在50~800μg·mL-1具有良好的線性關(guān)系。

        4.6 精密度試驗(yàn)

        精密吸取上述供試品溶液20μL,依上述色譜條件,重復(fù)進(jìn)樣6次,測(cè)定峰面積,結(jié)果其RSD=0.72%。

        4.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

        取同一供試品溶液,分別于0,2,4,8,16,24h進(jìn)樣,記錄峰面積,結(jié)果丹酚酸B峰面積的RSD=0.38%,表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

        4.8 重現(xiàn)性試驗(yàn)

        取同批供試品,按上述測(cè)定方法重復(fù)檢測(cè)6次,測(cè)得本品丹酚酸B平均含量為23.5mg·g-1,即1.29mg/丸,RSD=1.34%,表明本法的重現(xiàn)性良好。

        4.9 回收率試驗(yàn)

        采用加樣回收法,取同一批已知丹酚酸B含量的香丹滴丸細(xì)粉,精密稱取6份,分別準(zhǔn)確加入同量的對(duì)照品,各份均按上述色譜條件測(cè)定,結(jié)果見表2。

        表2 丹酚酸B加樣回收率試驗(yàn)

        注:丹酚酸B對(duì)照品加入量均為4.47mg

        5 樣品含量測(cè)定

        按供試品制備及含量測(cè)定方法測(cè)定了091006,091008,091010 3批香丹滴丸樣品,丹參酮ⅡA的含量分別為1.27,1.17,1.21mg/丸,丹酚酸B的含量分別為0.12,0.09,0.11mg/丸。

        6 討論

        采用HPLC分別對(duì)丹參酮ⅡA和丹酚酸B進(jìn)行含量測(cè)定,在方法學(xué)研究中,為了避免丹參酮ⅡA和丹酚酸B對(duì)彼此色譜條件的影響,故在陰性對(duì)照液的制備中選用丹參提取物而不選用去除丹參的空白滴丸。由兩陰性對(duì)照液HPLC圖可以看出,丹參酮ⅡA陰性對(duì)照液色譜圖中只有一雜質(zhì)峰(2.9min),在對(duì)照品相應(yīng)位置(13.0min)上沒有吸收峰,丹酚酸B陰性對(duì)照液色譜圖中沒有吸收峰,且在兩供試品溶液HPLC圖中主峰與雜質(zhì)峰均能達(dá)到完全分離,即兩色譜條件用于有效成分的含量測(cè)定具有良好的可行性。

        [1] 李燕梅.冠心丹參滴丸臨床應(yīng)用體會(huì)[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志,2002,9(5):269.

        [2] 韓靜,唐星,巴德純.降香揮發(fā)油的理化性質(zhì)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2004,22(7):1292-1294.

        [3] 李琳,孫莉莎,徐江平.丹參酚酸B對(duì)犬心肌梗死的治療作用[J].中藥學(xué),2004,26(3):215-218.

        [4] 趙桂峰,張紅霞.丹參酚酸B對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,6(1):55-56.

        [5] 張潔,曾曉榮,揚(yáng)艷,等.丹參酮Ⅱ-A磺酸鈉對(duì)原代培養(yǎng)豬冠脈平滑肌鈣激活鉀通道的影響[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2000,23(5):380-383.

        [6] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄37.

        QualityStandardforXiangdanDroppingPills

        Li Min1, Lei Qingzhong2, Li Guisheng, Li Yantuan1

        (1.OceanUniversityofChina,QingdaoShandong266003,China; 2.ShandongEngineeringResearchCenterforNaturalDrugs,YantaiShandong264003,China)

        Objective: To establish the quality standard for Xiangdan Dropping Pills.Methods:Dalbergiaodorifera,Salviamiltiorrhizaof Xiangdan Dropping Pills were identified by TLC. The contents of

        tanshinoneⅡAand salvia acid B were determined by HPLC. Methyl-methanol-water-phosphoric-acid (15∶65∶20∶0.3) and methyl-water-methanoic-acid(22∶78∶1.5) were used as mobile phase respectively.Results:Dalbergiaodorifera,Salviamiltiorrhizacan be identified by TLC.The calibration curves of tanshinoneⅡAwas linear within 2.6~81.6μg·mL-1.The average recovery was 99.19%,RSD was 1.34%.The calibration curves of salvia acid B was linear within 50~800μg·mL-1.The average recovery was 98.84%, RSD was 1.74%.Conclusion: The method is simple, accurate and reliable. It can be used for quality control of Xiangdan Dropping Pills.

        Xiangdan Dropping Pills; HPLC; TLC; TanshinoneⅡA; Salvia acid B

        *李敏,E-mail:limin@luye-pharm.com

        2010-03-29)

        2021年性爱喷水视频| 小蜜被两老头吸奶头在线观看| 四川丰满少妇被弄到高潮| 国产99页| 蜜桃av一区二区三区久久| 国产av激情舒服刺激| 欧美黑人性暴力猛交喷水黑人巨大 | 亚洲综合日韩中文字幕| 国产麻豆极品高清另类| 中国杭州少妇xxxx做受| 在线亚洲欧美日韩精品专区| 久久久久久中文字幕有精品| 国产亚洲精品一区二区在线播放 | 国产98在线 | 免费| 亚洲一区二区成人在线视频| 一区二区三区在线视频观看| 亚洲精品久久| 国产午夜在线观看视频播放| 中文乱码人妻系列一区二区| 欧美亚洲国产丝袜在线| 偷拍韩国美女洗澡一区二区三区| 亚洲av无码专区在线观看下载 | 日韩精品欧美激情亚洲综合| 成年男女免费视频网站点播| 玩弄少妇人妻中文字幕| 熟女无套内射线观56| 日韩二三区| 亚洲精品综合一区二区| 免费人成小说在线观看网站 | 国产亚洲aⅴ在线电影| 国产在线视频一区二区三区| 2020久久精品亚洲热综合一本| av中文字幕在线直播| 久久精品国产亚洲av影院| 国产成人午夜福利在线观看者| 性视频毛茸茸女性一区二区| 视频女同久久久一区二区| 狠狠噜狠狠狠狠丁香五月| 男人无码视频在线观看| 蜜臀av国内精品久久久人妻| 手机在线亚洲精品网站|