河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院藥劑科

胡玉錄 劉 劍 郭 進(jìn) 劉靈改 戎成才 (石家莊 050000)

防芷鼻咽顆粒中揮發(fā)油的提取與包合

河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院藥劑科

胡玉錄 劉 劍 郭 進(jìn) 劉靈改 戎成才 (石家莊 050000)

目的:優(yōu)選防芷鼻咽顆粒中揮發(fā)油的最佳提取方法及其β-環(huán)糊精 (β-CD)包合工藝。方法:以混合揮發(fā)油的提取時(shí)間、提取量為指標(biāo)確定提取方法;比較兩種包合方法,并采用正交試驗(yàn)的方法優(yōu)化工藝條件。結(jié)果:以微波法為最佳提取方法;以膠體磨法為制備混合揮發(fā)油 -β-環(huán)糊精包合方法;其最佳工藝條件:1mL混合揮發(fā)油加β-環(huán)糊精 8 g和 80mL水,用膠體磨于 50℃包合 30 min。結(jié)論:本試驗(yàn)方法的提取率較高,可得到穩(wěn)定的包合物。

防芷鼻咽顆粒;混合揮發(fā)油;微波提取;膠體磨包合;正交試驗(yàn);β-環(huán)糊精

防芷鼻咽顆粒是根據(jù)我院楊恩英教授祖?zhèn)髅胤窖兄频闹委熯^(guò)敏性鼻咽炎的新制劑。[1]該制劑療效顯著、療程短。其中的重要成分辛夷和荊芥中含有大量的揮發(fā)油,揮發(fā)油是主要有效成分之一。揮發(fā)油的處理與加工對(duì)其療效影響很大。本文就該制劑中揮發(fā)油的加工做一研究、以便找到一種省時(shí)、可行的生產(chǎn)工藝。

1 材料與儀器

1.1 材料 辛夷和荊芥藥材均由安國(guó)市藥材公司提供,均符合 2005年版《中國(guó)藥典》的相關(guān)規(guī)定。批號(hào):091012;β-環(huán)糊精 (β-CD),廣東郁南縣味精廠出品,純度 98%.;所用試劑均為分析純。

1.2 儀器 WD700型LG微波爐,樂(lè)金電子 (天津)電器有限公司;P M-780型膠體磨,浙江省歐海紅星機(jī)械廠;TH-400B數(shù)控超生波清洗器,濟(jì)寧天華超生電子儀器有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取方法比較

2.1.1 微波法:將按處方比例稱取的辛夷和荊芥共 100 g粉碎成中粉 (65目),加水 1 000mL浸泡 12 h后置連續(xù)微波反應(yīng)器 (微波爐改造)中,加數(shù)粒玻璃珠,連接揮發(fā)油測(cè)定器及回流冷凝管,調(diào)整功率為 650 W,進(jìn)行微波輻射。反應(yīng)過(guò)于劇烈時(shí),調(diào)整功率分別為 630 W、560 W、500 W。觀察到揮發(fā)油測(cè)定器中油量不再增加時(shí),收集揮發(fā)油,無(wú)水 Na2SO4干燥,稱重備用。

2.1.2 水蒸氣蒸餾法:[2]將按處方比例稱取的辛夷和荊芥共 100 g粉碎成中粉 (65目),加水 1 000mL浸泡 12 h后置蒸餾瓶中,加數(shù)粒玻璃珠,連接揮發(fā)油測(cè)定器及回流冷凝管,觀察到揮發(fā)油測(cè)定器中油量不再增加時(shí),收集揮發(fā)油,無(wú)水 Na2SO4干燥,稱重備用。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 揮發(fā)油提取試驗(yàn)結(jié)果 (n=3)

由表1所見(jiàn),微波法 30～40 min時(shí)揮發(fā)油收得量與水蒸氣蒸餾法 5～6 h收得量相當(dāng),提取效率明顯提高。最后提取總量前者也比后者要高。所以我們選用用微波法。

2.2 包合

2.2.1 包合方法

膠體磨法:取 80份蒸餾水置膠體磨中,加 8份β-環(huán)糊精研磨 5 min,緩慢加入含有1份揮發(fā)油和 2份乙醇的溶液,再研磨 30 min,冷藏 24 h,抽濾后的沉淀于 40℃干燥即得。

超聲法:稱取 8份β-環(huán)糊精,加入 80份蒸餾水搖勻,水浴加熱溶解,放冷,加入含有1份揮發(fā)油和 2份乙醇的溶液混合,充分振搖,超聲處理 30 min,冷藏 24 h,抽濾后的沉淀于 40℃干燥即得。

2.2.2 包合物的質(zhì)量評(píng)價(jià):包合物中揮發(fā)油的含量測(cè)定:將制得的包合物用 50mL石油醚 (30～60℃)洗滌 2次,濾過(guò),揮去石油醚,置 500mL圓底燒瓶中,加蒸餾水200mL,按 2005年版《中國(guó)藥典》一部附錄揮發(fā)油測(cè)定法項(xiàng)下甲法測(cè)定包合物中揮發(fā)油的含量。

揮發(fā)油回收率測(cè)定:精密量取揮發(fā)油 1mL,置 500mL圓底燒瓶中,加蒸餾水 200mL,余同 2005年版《中國(guó)藥典》一部附錄揮發(fā)油測(cè)定法項(xiàng)下甲法操作,計(jì)算回收率為91%。揮發(fā)油回收率 (%)=收集揮發(fā)油的量 /加入揮發(fā)油的量 ×100%。

收得率、包合率和包合物中含油率的計(jì)算,公式如下:收得率 (%)=包合物重量 /(β-環(huán)糊精加入量 +揮發(fā)油加入量) ×100%;包合率 (%)=包合物中揮發(fā)油回收量 /(揮發(fā)油加入量 ×回收率) ×100%;包合物中含油率(%)=包合物含油量 /包合物重量 ×100%。

兩種包合方法進(jìn)行平行試驗(yàn)見(jiàn)表2。

表2 兩種制備工藝結(jié)果比較 (n=3,%)

2.2.3 包合使方法的確定及最佳包合工藝的選擇 :由表2所見(jiàn),超聲波法和膠體磨法的收得率和包合率都較高,而膠體磨法更適于大生產(chǎn),因此我們選用膠體磨法包合揮發(fā)油。

2.3 膠體磨最佳包合工藝的選擇

2.3.1 因素水平及篩選指標(biāo):采用正交試驗(yàn)的方法,選擇油∶β-環(huán)糊精量 (A)、加水量 (B)、研磨溫度 (C)、研磨時(shí)間 (D)4項(xiàng)為考察因素,各取 3個(gè)水平 (見(jiàn)表3),按 L9(34)正交表試驗(yàn),以包合率,收得率作為考察指標(biāo),篩選最佳工藝。包合率為衡量包合效果的重要指標(biāo),包合率越高,包合效果越好,因而作為包合工藝篩選的主要指標(biāo),權(quán)重系數(shù)定為 0.8,收得率在生產(chǎn)中也有意義,在投入量一定的情況下,收得率越高,包合率越高,故將收得率作為次要指標(biāo),權(quán)重系數(shù)定為 0.2。[3]

表3 因素水平表

2.3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果:試驗(yàn)數(shù)據(jù)及極差、方差分析結(jié)果見(jiàn)表4、表5。

表4 正交試驗(yàn)及結(jié)果

表5 方差分析表

由直觀分析和方差分析結(jié)果表明:影響辛夷和荊芥揮發(fā)油包合率和收得率的主次因素為 A>D>C>B,以A3B3C2D3為最優(yōu),其中油︰β-環(huán)糊精的比例對(duì)其有顯著影響。結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況,減少揮發(fā)油損失,適當(dāng)降低研磨時(shí)間和溫度以 A3B1C1D2條件為最優(yōu),即是 1mL辛夷和荊芥揮發(fā)油加β-環(huán)糊精 8 g和 80mL水,用膠體磨于 50℃包合 30 min,研磨液冷藏 24 h,抽濾后的濾渣于 40℃干燥,粉碎即得。

2.4 辛夷和荊芥揮發(fā)油 -β-環(huán)糊精包合物的物相鑒別

β-環(huán)糊精包合物物相鑒別的方法很多,有顯微鏡成像法、差示熱分析法、氣相色譜內(nèi)標(biāo)法、薄層色譜法等,其中以成像法和薄層色譜法使用較為普遍,[4]因此我們采用簡(jiǎn)便有效的成像進(jìn)行鑒別。

顯微成像法:取含揮發(fā)油的包合物與按制備方法制備的不加任何藥物的空白包合物各少許,用水裝片置光學(xué)顯微鏡下觀察 (10×10倍),結(jié)果:空白包合物為規(guī)則的半透明板狀結(jié)晶,含油的包合物為不規(guī)則的粉末狀或內(nèi)含黑色物質(zhì)的不透明的塊狀物。證明揮發(fā)油與β-環(huán)糊精確已形成包合物。

2.5 加速試驗(yàn) 分別將揮發(fā)油包合后噴霧制粒的顆粒(定量加入含 2mL油的包合物)和將揮發(fā)油直接噴灑制備的顆粒 (定量加入 2mL油)各 20 g放置于蒸發(fā)皿中,于60℃恒溫箱烘 48 h,取出,作為加速試驗(yàn)樣品,測(cè)定揮發(fā)油保留率。揮發(fā)油經(jīng)包合保留了 84%,RSD=3.5% (n=3);不經(jīng)包合的保留了 13.5%,RSD=3.7% (n=3)。

3 小結(jié)

3.1 本實(shí)驗(yàn)通過(guò) 2種提取方法的比較,微波法提取效率明顯高于水蒸氣蒸餾法,故選微波法提取。

3.2 本實(shí)驗(yàn)通過(guò) 2種包合方法的比較,膠體磨法的揮發(fā)油利用率也較高,并且從生產(chǎn)操作來(lái)說(shuō)此法最為實(shí)用,較超聲法快速、簡(jiǎn)便,尤其適合工業(yè)化生產(chǎn)。

3.3 揮發(fā)油經(jīng)β-環(huán)糊精包合后能增加揮發(fā)油的溶解性,降低其揮發(fā)性,并且通過(guò)加速實(shí)驗(yàn)表明,包合后能大大提高制劑的穩(wěn)定性和揮發(fā)油的利用率。

3.4 揮發(fā)油包合物的物相鑒別,顯微鏡成像為不規(guī)則的粉末狀或內(nèi)含黑色物質(zhì)的不透明的塊狀物,此外通過(guò)加速實(shí)驗(yàn)后,包合后揮發(fā)油的保留率為 84%,未經(jīng)包合的揮發(fā)油的保留率為 13.5%,以上說(shuō)明確已形成包合物而非混合物。

[1] 郭進(jìn),郭安然,蘇桔之,等.防芷鼻咽顆粒治療急慢性鼻炎咽炎的實(shí)驗(yàn)研究 [J].河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)學(xué)報(bào),2009,24(4):30-31

[2] 丁麗鳳,吳敏 .辛夷揮發(fā)油的提取工藝研究 [J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2007,21(2):64

[3] 張典瑞,張兆旺,孫秀梅 .四神茶揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的實(shí)驗(yàn)研究 [J].中成藥,1998,20(11):3

[4] 白云娥,漆小梅 .β-環(huán)糊精在中藥方面的應(yīng)用 [J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2000,20(4):237

(2010-09-22 收稿)

R284.2

A

1007-5615(2010)04-0032-02

＊ 河北省中醫(yī)藥管理局資助項(xiàng)目:No 2009129

劉劍,碩士研究生,0311-66002360(辦)。