王廣軍 張宇沁 王瑞紅 田宇瑛 黃 濤 張維波 中國中醫(yī)科學院針灸研究所(北京 100700)

對稱和左右交互支配是最常見的生命現(xiàn)象,而且對稱的觀念始終貫穿于針灸核心理論及臨床治療過程。《內經》中的巨刺和繆刺理論,即左病取右、右病取左的針刺方法就是這種觀念的體現(xiàn)[1]。張維波采用聚類分析發(fā)現(xiàn)左右同名穴二氧化碳的釋放量相關性最大,說明穴位處二氧化碳的釋放也服從這種規(guī)律[2]。我們以往的研究表明,當右側下肢[3]接受溫熱刺激引起血流增高后,左側肢體相同部位的血流也增高,說明體表相同部位的血流分布也符合這種規(guī)律。但是當我們擬深入探討機理,采用麻醉狀態(tài)的大鼠為研究對象時,卻發(fā)現(xiàn)在麻醉狀態(tài)下,右側溫熱刺激引起的血流增高并不引起左側相同部位的血流增高,我們初步考慮可能是兩方面原因:一是與機體的狀態(tài)有關;二是與刺激的性質有關。因此我們改變了刺激條件,以肥大細胞脫顆粒劑 C48/80復合物為工具藥,探討一側血流變化對對側血流的影響。

1 材料與方法 1.1 實驗儀器參照張棟[4]的方法,使用PeriScan PIMⅡ型激光多普勒血流灌注成像儀(瑞典PERIM ED公司生產),激光波長 670nm。本研究采用 NR掃描模式,步長 3mm,掃描面積 Width50× Height50,掃描精度為High。應用聯(lián)機自帶 LDPI2.5圖像分析系統(tǒng)進行血流圖的分析。

1.2 實驗對象及分組實驗動物選用雄性 Wistar大鼠 20只,體重 220g～250g,由中國中醫(yī)科學院實驗動物中心提供。隨即分為靜息組 10只和足底注射組 10只,實驗中靜息組共有 6只完成完整血流記錄,注射組共 8只完成完整血流記錄。

1.3 干預方法及血流記錄實驗室保持暗光狀態(tài),室溫控制在 26℃± 2℃,大鼠用 1%戊巴比妥鈉腹腔注射 (4mL/kg)麻醉,俯臥位固定,充分暴露雙下肢足底 ,記錄初始狀態(tài)下雙下肢足底血流圖,記錄為 Pre。靜息組休息 5min后 ,開始記錄不同時間段血流值。注射組右下肢足底注射 0.1%的 C48/80復合物 5μl(Sigma,57K4011),5min后開始記錄不同時間段血流值。各時間段血流記錄為 (Post)1min、4min、7min、10min、 20min、 30min、40min、50min、60min、70min、80min、 90min。 實驗過程見下示意圖。

實驗流程示意圖

1.4 數據分析及統(tǒng)計 采用 LDPI 2.5圖像分析軟件,大鼠雙下肢足底血流均用 PU表示,不同時間點左右側血流比較采用配對 t檢驗。統(tǒng)計采用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件包。

2 實驗結果 2.1 靜息狀態(tài)大鼠足底血流變化在靜息狀態(tài)下,大鼠雙下肢足底血流較高,表現(xiàn)在血流圖上為雙后肢彌漫性的深紅色區(qū)域(圖 1),而且在 90min內 ,雙側足底血流無明顯波動(見圖 3),左右側足底血流經配對 t檢驗無統(tǒng)計學差異 (P＞0.05,見表 1)。說明在靜息狀態(tài)下,大鼠雙下肢足底血流維持在一定的水平,90min內無明顯波動。

2.2 右側足底注射 C48/80復合物后大鼠雙下肢足底血流變化 在右側注射肥大細胞脫顆粒劑 C48/80復合物之前,大鼠雙下肢足底血流比較對稱,見圖 2-B,血流圖表現(xiàn)為雙側對稱性橘黃色區(qū)域分布。在大鼠右下肢足底注射 C48/80復合物后,注射側足底血流顯著上升 ,在 1min～10min內 (見圖 2-C～F,表 2),與對側比 P ＜ 0.05。 在 20min～30min內 (見圖 2-G～F,表 2),血流下降至正常水平 ,與對側比 P＞0.05。在 40min～90min內(見圖 2-I～O,表 2),注射側血流顯著低于對側血流 (P＜0.05)。結果表明大鼠右下肢足底注射 C48/80復合物后,局部血流先升高,后降低,而對側血流無明顯變化 ,見圖 4。

表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

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續(xù)表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

續(xù)表1 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化比較(,PU)

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表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側皮膚血流變化比較(,PU)

表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側皮膚血流變化比較(,PU)

組別 n 注射前注射后1min 4 min 7 min 10 min 20 min左側 8 1.93± 0.622.00± 0.68 1.95± 0.67 1.95± 0.67 1.92± 0.68 1.88± 0.59右側 8 1.89± 0.612.60± 0.76 2.41± 0.61 2.31± 0.58 2.21± 0.62 1.86± 0.53 t 1.282 -5.701 -6.269 -3.800 -2.791 0.271 P 0.241 0.001 0.000 0.007 0.027 0.794

續(xù)表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側皮膚血流變化比較(,PU)

續(xù)表2 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側皮膚血流變化比較(,PU)

組 別注射后30 min 40 min 50 min 60 min 70 min 80 min 90 min左側 1.82± 0.55 1.77± 0.48 1.74± 0.42 1.73± 0.45 1.74± 0.47 1.79± 0.52 1.78± 0.52右側 1.72± 0.52 1.64± 0.45 1.59± 0.41 1.57± 0.39 1.56± 0.41 1.57± 0.41 1.52± 0.40 t 1.760 3.243 3.169 3.245 3.645 3.732 4.027 P 0.122 0.014 0.016 0.0140 0.008 0.007 0.005

圖2 大鼠右足底溫熱刺激對血流灌注的影響

3 討 論 巨刺,即“左病取右,右病取左”之意,是機體一側有病而在對側選取經穴治療的方法。巨刺始見于《內經》,如《靈樞? 官針》記載:“巨刺者,左取右,右取左”?？梢姀膫鹘y(tǒng)針灸理論來看,巨刺和繆刺是治療疾病時的選穴原則,是病理情況下左右對稱的體現(xiàn)。從一側痛覺過敏從經皮神經電刺激的實驗結果來看,一側經皮神經電刺激可對對側不同性質的疼痛進行調制,說明在神經系統(tǒng)的參與下,左右存在這種交互作用,而且這種交互作用是一種腦反射結果[5]。

對稱和左右交互支配是最常見的生命現(xiàn)象,既然在病理情況下,可出現(xiàn)這種交互作用,那么 ,在生理情況下機體的左右交互作用,就值得深入研究。因此我們以健康受試者為研究對象,以局部皮膚血流為指標,探討了生理狀態(tài)下的作用交互支配問題。從我們的結果來看,當一種適宜的溫熱刺激作用于人體后,不同于傷害性刺激引起的血流降低[6],往往是在不影響全身血流的基礎上,局部皮膚血流灌注量增高并維持在一定的水平[7]。而且右側肢體的血流升高往往伴隨著左側相同部位的血流增高[3]。我們推測對側血流的增高一方面是神經活動的結果,另外體液因素很可能參與其中,部分支持了體液因素參與一側炎性痛敏致對側痛閾變化的結論[8]。

但是這種基于溫熱刺激的交互作用并不能重現(xiàn)于麻醉狀態(tài)下的大鼠,對此我們有兩種理解,一是這種基于溫熱刺激的交互作用本身是腦反射的結果,或者即使有體液因素的參與,也是繼發(fā)于腦反射的結果,大鼠的麻醉狀態(tài)阻止了基于腦反射的這種交互作用;二是可能與刺激的模式有關,因此我們采用另方面刺激模式,進一步探討這種交互作用。

圖3 靜息狀態(tài)大鼠足底皮膚血流變化的比較

圖4 大鼠右下肢足底注射 C48/80后雙側皮膚血流的變化

我們知道,機體對外界的反應,是由外周感受器所介導的,而針灸的命名也是針對不同性質的感受器而言,針刺過程主要由機械感受器介導,而灸法主要由溫度感受器所介導,無論是機械感受器興奮,還是溫度感受器興奮,往往導致或者伴有化學感受器的興奮,近來的研究表明,無論是針刺,還是灸療,在效應始動機制中肥大細胞發(fā)揮著關鍵作用,因此在我們的研究中采用肥大細胞脫顆粒劑 C48/80復合物作為工具藥[9]。從實驗結果來看,C48/80注射后,局部皮膚血流先升高,后降低 ,而對側血流無明顯波動,這樣的結果部分支持交互作用的基礎可能是腦反射,但也不排除有其他因素參與其中,詳細機制有待進一步研究。

[1]王 玲.繆刺、巨刺理論探討與臨床運用[J].針灸臨床雜志,2008,24(8):42-43.

[2]張維波.人體十二經原穴皮膚二氧化碳呼出量相關性的聚類分析[J].生物數學學報,1997,12(03):259-264.

[3]張宇沁,丁玉龍,田宇瑛,等.電熱砭石干預對對側小腿局部皮膚血流影響的實驗研究[J].江蘇中醫(yī)藥,2010,42(4):48-49.

[4]張 棟,李順月,王淑友,等.運用激光多普勒血流成像儀探討針灸作用原理的初步研究[J].中國針灸,2004,24(7):499-502.

[5]宋麗萍,Andrew C.N.Chen.經皮神經電刺激對實驗性冷痛和熱痛的對側調制[J].山西醫(yī)科大學學報,2009,40(4):295-298.

[6]Litscher G,Wang L,Huber E,et al.Changed skin blood perfusion in the fingertip following acupuncture needle introduction as evaluated by laser Doppler perfusion imaging[J].Lasers Med Sci,2002,17(1):19-25.

[7]王廣軍,張宇沁,王瑞紅,等.電熱砭石對手背局部皮膚血流影響的實驗研究[J].天津中醫(yī)藥,2009,26(5):382-384.

[8]呂國蔚.脊髓感覺機制 [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:156.

[9]周 丹,潘 萍,郭 義,等.針刺引起的炎性反應是針效產生始動環(huán)節(jié)之一[J].中國針灸,2009,29(1):32-34.