王傳清, 王愛(ài)敏, 張 泓, 李萬(wàn)華, 孫自鏞, 簡(jiǎn) 翠, 徐英春, 孫宏莉, 俞云松,楊 青, 胡云建, 艾效曼, 倪語(yǔ)星, 孫景勇, 汪 復(fù), 胡付品, 朱德妹, 張朝霞,季 萍, 徐元宏0, 沈繼錄0, 卓 超, 蘇丹虹, 魏蓮花, 吳 玲, 單 斌, 杜 艷,黃文祥, 賈 蓓

2.上海交通大學(xué)附屬兒童醫(yī)院;

3.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院;

4.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬北京協(xié)和醫(yī)院;

5.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院;

6.衛(wèi)生部北京醫(yī)院;

7.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院;

8.復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院;

9.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;

10.安徽醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;

11.廣州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院;

12.甘肅省人民醫(yī)院;

13.昆明醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院;

14.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院。

對(duì)鏈球菌屬的耐藥性監(jiān)測(cè)是CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)項(xiàng)目中重要組成部分,繼對(duì)2007年鏈球菌屬耐藥性總結(jié)分析后,現(xiàn)對(duì)2009年鏈球菌屬分離株的耐藥性進(jìn)行總結(jié),借此了解鏈球菌屬耐藥性變遷。

材料與方法

一、材料

(一)細(xì)菌來(lái)源 2009年1月1日—2009年12月31日,全國(guó)14所醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室分離獲得鏈球菌屬細(xì)菌,共1 838株。剔除相同部位的重復(fù)菌株,按統(tǒng)一方案作藥敏試驗(yàn)。

(二)抗菌藥物紙片和E試驗(yàn)條 受試抗菌藥物紙片品種參見(jiàn)結(jié)果?？咕幬锛埰瑸槊绹?guó)BBL公司或英國(guó)OXOID公司商品。用于鑒定肺炎鏈球菌耐藥性的青霉素E試驗(yàn)條為法國(guó)生物梅里埃公司商品。

(三)培養(yǎng)基 藥敏試驗(yàn)用MH瓊脂培養(yǎng)基。肺炎鏈球菌及各組鏈球菌用 5%脫纖維羊血 MH瓊脂培養(yǎng)基。上述試劑均為英國(guó)OXOID公司的產(chǎn)品。

二、方法

(一)藥敏試驗(yàn) 采用CLSI 2009年版推薦的紙片擴(kuò)散法(K-B)及肺炎鏈球菌青霉素MIC判斷標(biāo)準(zhǔn)。藥敏試驗(yàn)質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌 ATCC 49619。

(二)β溶血鏈球菌血清分型 采用OXOID鏈球菌血清型診斷試劑盒對(duì)臨床分離的β溶血性鏈球菌進(jìn)行分型,操作按說(shuō)明書(shū)要求,每次實(shí)驗(yàn)設(shè)生理鹽水對(duì)照,以大腸埃希菌 ATCC 25922為陰性對(duì)照菌。

三、統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用WHONET 5.4軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。

結(jié) 果

一、鏈球菌屬菌株分布

1 838株鏈球菌屬中肺炎鏈球菌1 006株(占54.7%),其中兒童及青少年患者肺炎鏈球菌非腦膜炎分離株占78.7%(792株),成人患者肺炎鏈球菌非腦膜炎分離株占20.3%(204株),非腦膜炎肺炎鏈球菌主要來(lái)源于呼吸道、血液、傷口及膿液等臨床標(biāo)本,見(jiàn)表 1。肺炎鏈球菌腦膜炎分離株 10株(1.0%),來(lái)源于1～10歲兒童腦脊液標(biāo)本。

β溶血性鏈球菌占37.0%(681),標(biāo)本來(lái)源為呼吸道、尿道、傷口及膿液、生殖道及血液等部位,見(jiàn)表1。其中A群占38.9%(265/681),B群占38.8%(264/681),C群占10.0%(68/681),G群占4.8%(33/681),F群占2.3%(16/681),未分群占5.1%(35/681),不同群β溶血性鏈球菌標(biāo)本來(lái)源見(jiàn)表2。

α溶血性鏈球菌群占8.2%(151株),標(biāo)本來(lái)源有血液、腦脊液及胸水等無(wú)菌部位,見(jiàn)表1,其中的草綠色鏈球菌分離株均來(lái)源于患者的無(wú)菌部位標(biāo)本。

表1 鏈球菌屬在不同標(biāo)本中分布[%(n)]Table 1.The source of Streptococcus isolates[%(n)]

表2 β溶血性鏈球菌分布[%(n)]Table 2.The source of β-hemolytic Streptococcus isolates[%(n)]

二、肺炎鏈球菌的耐藥性

996株肺炎鏈球菌分離自非腦脊液標(biāo)本,其中有青霉素確認(rèn)資料的869株。按CLSI 2008年標(biāo)準(zhǔn),PSSP、PISP和 PRSP分別占 73.6%、15.0%和11.4%,其中兒童及青少年患者(≤17歲)710株,分離株中 3種細(xì)菌比率分別為 68.9%、17.4%和13.7%,159株成人患者分離株中3種細(xì)菌分別為95.0%、3.8%和1.3%,腦脊液來(lái)源肺炎鏈球菌共10株,除 1株為PSSP 外,其余9株為 PRSP,并均為兒童分離株。

肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星和磺胺甲口惡唑-甲氧芐啶的耐藥率分別為93.4%、92.0%、1.0%、0.6%和58.0%,對(duì)萬(wàn)古霉素及利奈唑胺均敏感。不同年齡組非腦膜炎來(lái)源肺炎鏈球菌分離株對(duì)抗菌藥物的耐藥性結(jié)果見(jiàn)表3。

三、β溶血性鏈球菌、α溶血性鏈球菌群的耐藥性

β溶血性鏈球菌對(duì)青霉素、紅霉素、克林霉素、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢丙烯和左氧氟沙星的耐藥率分別為 2.0%、68.8%、58.4%、0.7%、5.4%、0.7%和11.4%,對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、美羅培南、莫西沙星均敏感。不同分群的β溶血性鏈球菌及α溶血性鏈球菌群的耐藥率見(jiàn)表4。

表3 兒童、青少年及成人肺炎鏈球菌非腦膜炎分離株對(duì)各種抗菌藥物的敏感率和耐藥率(%)Table 3.Results of susceptibility testing for the S.pneumoniae strains isolated from adults and children(%)

表4 各組鏈球菌對(duì)各種抗菌藥物的敏感率和耐藥率(%)Table 4.Results of susceptibility testing for Streptococcus spp to antimicrobial agents(%)

討 論

監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,2009年鏈球菌屬分離株數(shù)量與2007年接近,但不同鏈球菌屬的構(gòu)成發(fā)生較大變化,肺炎鏈球菌的比率增加了16.3%,表現(xiàn)為呼吸道肺炎鏈球菌分離株增加。β溶血鏈球菌的比率減少了8.9%,其中A群β溶血鏈球菌減少了226株,B群β溶血鏈球菌增加了77株,主要為尿液來(lái)源的分離株增加。G群β溶血鏈球菌減少了20株,C群增加了46株、F群數(shù)量無(wú)明顯變化。a溶血的鏈球菌群菌株數(shù)減少172株[1],上述細(xì)菌數(shù)量的變化與監(jiān)測(cè)點(diǎn)增加可能有關(guān),同時(shí)也反映了致病菌的流行特點(diǎn)。

按照CLSI 2008年有關(guān)肺炎鏈球菌非腦膜炎分離株青霉素耐藥的判斷標(biāo)準(zhǔn),靜脈用青霉素的治療劑量為120萬(wàn)u/d時(shí),青霉素敏感的判斷標(biāo)準(zhǔn)為≤2 mg/L,耐藥的判斷標(biāo)準(zhǔn)為 ≥8 mg/L,青霉素MIC值介于2～8 mg/L為中介敏感,因此2008年以后該菌對(duì)青霉素的耐藥率將低于之前的監(jiān)測(cè)資料。為便于比較,我們將2007年非腦膜炎標(biāo)本分離到的肺炎鏈球菌按CLSI 2009年判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),發(fā)現(xiàn)本次總體肺炎鏈球菌非腦膜炎分離株中 PISP和PRSP比率分別增加了8.6%及6.0%,PSSP比率下降了14.6%。α溶血鏈球菌群對(duì)青霉素的耐藥率增加了7.3%[1]。提示我國(guó)肺炎鏈球菌、α溶血鏈球菌群對(duì)青霉素的耐藥性有所增加并高于國(guó)外同期監(jiān)測(cè)資料[2-6]。β溶血性鏈球菌對(duì)青霉素仍保持低耐藥水平。

我國(guó)臨床分離的鏈球菌屬對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素及克林霉素已處于很高的耐藥水平[2-3,6-8]。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,兒童及青少年患者PNSP對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥性接近或超過(guò)95%,其中PSSP株對(duì)上述2種抗菌藥物的耐藥率分別比2007年增加了13.4%和9.5%。成人患者PNSP對(duì)紅霉素完全耐藥,對(duì)克林霉素耐藥率亦在90%以上。成人PSSP株對(duì)紅霉素、克林霉素的耐藥率比2007年降低了6.4%和1.3%。α溶血性鏈球菌群對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥性比2008年分別增加了8.9%和6.3%[8]。

與2008年監(jiān)測(cè)資料比較,不同群的β溶血性鏈球菌對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥性變化差異較大,其中A群、C群、G群β溶血性鏈球菌對(duì)紅霉素的耐藥性均出現(xiàn)降低,降幅分別為 6.3%、8.1%和7.5%,其中A群對(duì)紅霉素的耐藥性連續(xù)2年出現(xiàn)降低[1,8]。2種抗菌藥物的耐藥性繼2008年出現(xiàn)降低后,再次出現(xiàn)降低現(xiàn)象,降幅分別為 6.3%和4.6%[1,8]。B群和F群對(duì)紅霉素的耐藥率增加了2.2%和4.2%[8]。對(duì)克林霉素的耐藥性除C群外,其他分群β溶血性鏈球菌均出現(xiàn)不同程度的降低[8]。持續(xù)關(guān)注鏈球菌對(duì)紅霉素及克林霉素耐藥性變化將有助于了解細(xì)菌耐藥控制效果。

鏈球菌屬細(xì)菌對(duì)頭孢菌素類、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、美羅培南高度敏感,對(duì)左氧氟沙星監(jiān)測(cè)結(jié)果提示,約30%B群β溶血性鏈球菌已產(chǎn)生耐藥,其他鏈球菌屬仍對(duì)其高度敏感。

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