祝 青

(附屬菏澤市立醫(yī)院普外科,山東 菏澤 274031)

胃癌早期檢出率較低,病情進(jìn)展快,是一種嚴(yán)重威脅人類身體健康的惡性腫瘤。因此,尋找能夠用于胃癌早期篩查和判斷臨床預(yù)后的分子指標(biāo)具有重要的意義。研究發(fā)現(xiàn),Brm屬于SWI/SNF基因家族的核心成員之一,Brm蛋白表達(dá)降低或者基因突變與多種組織類型惡性腫瘤發(fā)生密切[1]。因此,Brm基因被認(rèn)為是一種重要的抑癌基因。本研究采用免疫組化方法檢測(cè)胃癌以及正常胃黏膜組織中Brm蛋白表達(dá)情況,旨在探討B(tài)rm蛋白表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展以及淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系,為胃癌臨床診斷和預(yù)后判斷提供參考指標(biāo)。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集我院手術(shù)切除的原發(fā)性胃癌組織69例,其中男性 41例,女性 28例,年齡37～63歲,平均45歲。同期隨機(jī)選取因良性病變(胃上皮內(nèi)瘤變、十二指腸球部潰瘍等)行胃次全切除術(shù)后的正常胃組織標(biāo)本71例作為對(duì)照組,其中男性39例,女性32例,年齡35～60歲,平均 42歲 。所有胃癌的病理診斷均按照WHO分類中的TNM分期;所有組織按照常規(guī)程序固定、石蠟包埋和制作病理切片,病理診斷均經(jīng)兩位以上病理醫(yī)師會(huì)診確定,同時(shí)記錄患者的病史和臨床資料。

1.2 免疫組織化學(xué)染色 免疫組化采用S-P法,Brm抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司,免疫組化試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)公司。所有標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定,石蠟包埋,4 μ m連續(xù)切片。實(shí)驗(yàn)用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。免疫組化染色步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,DAB顯色、蘇木精復(fù)染、二甲苯透明、封片。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 細(xì)胞核呈棕黃色至深褐色者為染色陽(yáng)性細(xì)胞,同時(shí)伴有部分胞質(zhì)呈淡黃色,僅有胞質(zhì)著色而細(xì)胞核沒(méi)有著色者則視為陰性。每例切片選5個(gè) 高倍視野,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的比計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分率,以此表示細(xì)胞Brm陽(yáng)性表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 Brm蛋白在胃癌組織表達(dá) Brm蛋白表達(dá)主要定位在細(xì)胞核,在胃腫瘤組織細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)率為65.3%,而正常胃黏膜組織細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性率為89.7%,兩組相比具有顯著性差異(P＜0.05)。

2.2 Brm蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系Brm蛋白表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞的分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期有關(guān)(P＜0.05)。分化程度：高分化者57例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率40.2%;中/低分化者12例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率25.1%。浸潤(rùn)深度：未浸及漿膜層者27例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率41.6%;浸及漿膜層者42例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率23.7%。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率45.0%;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者46例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率20.3%。TNM分期：Ⅰ+Ⅱ者 24例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率39.5%;Ⅲ+Ⅳ者45例,Brm表達(dá)陽(yáng)性率25.8% 。

3 討論

SWI/SNF復(fù)合體通過(guò)改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)來(lái)調(diào)控基因表達(dá),參與腫瘤發(fā)生、細(xì)胞分化和組織胚胎發(fā)育過(guò)程的調(diào)節(jié)[1]。Brm蛋白屬于SWI/SNF復(fù)合體的亞單位之一,具有ATP酶催化活性。利用細(xì)胞系以及基因敲除小鼠等方法的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),Brm蛋白具有抑制腫瘤發(fā)生的作用,因而B(niǎo)rm基因通常被稱為腫瘤抑制基因[2,3]。此外,來(lái)自臨床腫瘤組織的研究表明,Brm蛋白往往在肺癌、前列腺癌和皮膚癌等多種組織類型的原發(fā)腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)異常,而且Brm蛋白異常表達(dá)與腫瘤細(xì)胞分化程度、腫瘤浸潤(rùn)和淋巴轉(zhuǎn)移有一定的關(guān)系[1,4]。我們研究發(fā)現(xiàn),原發(fā)胃癌組織細(xì)胞內(nèi)Brm蛋白表達(dá)陽(yáng)性率較正常胃黏膜細(xì)胞明顯降低,結(jié)合Brm蛋白在生理?xiàng)l件下具有抑制腫瘤發(fā)生的生物學(xué)作用,由此說(shuō)明Brm蛋白表達(dá)異常降低可能在胃癌的發(fā)生過(guò)程中起重要的促進(jìn)作用。上述結(jié)果與Yamamichi等[5]研究結(jié)果基本一致,他們同樣發(fā)現(xiàn)胃癌組織細(xì)胞內(nèi)Brm蛋白表達(dá)水平異常降低,而且Brm蛋白表達(dá)水平與胃癌組織類型、分化程度也密切相關(guān),Brm蛋白表達(dá)在惡性程度較高、分化差的組織類型較惡性程度較低、分化好的明顯降低。此外,我們進(jìn)一步分析還發(fā)現(xiàn),Brm蛋白表達(dá)水平與胃癌細(xì)胞的分化程度、浸潤(rùn)深度、臨床分期以及是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移同樣有關(guān),Brm蛋白表達(dá)水平在細(xì)胞分化好、浸潤(rùn)程度低、臨床分期較早以及沒(méi)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織細(xì)胞內(nèi)相對(duì)較高。由此說(shuō)明Brm表達(dá)水平與胃癌的臨床病理指標(biāo)有很好的相關(guān)性,因而可以作為判斷胃癌惡性程度以及臨床預(yù)后的分子指標(biāo)。

總之,Brm蛋白在調(diào)控胃癌細(xì)胞分化、浸潤(rùn)以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著非常重要的作用,Brm蛋白表達(dá)異常與胃癌的發(fā)生發(fā)展以及惡性程度密切相關(guān),檢測(cè)Brm蛋白表達(dá)可能有助于胃癌診斷以及臨床預(yù)后的評(píng)估。

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