孫厚才，劉曉路，劉瑞華

（1.長江科學(xué)院水土保持研究所，武漢 430010；2.武漢科技學(xué)院，武漢 430073）

4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對環(huán)境生物安全性研究

孫厚才1，劉曉路1，劉瑞華2

（1.長江科學(xué)院水土保持研究所，武漢 430010；2.武漢科技學(xué)院，武漢 430073）

采用室內(nèi)試驗測試植物滅螺劑“螺威”對斑馬魚、日本鵪鶉和青蝦的毒性，評價其對環(huán)境的影響。試驗前按正式試驗條件先預(yù)試，求出植物滅螺劑“螺威”對斑馬魚、日本鵪鶉和青蝦的毒性影響范圍。正式試驗時在此范圍內(nèi)按一定的比例級差設(shè)置若干處理濃度，每個濃度設(shè)3個重復(fù)，并設(shè)一組空白對照。4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑使用濃度高于LC50值，對鳥類和蝦類為中毒，對鳥的實際危害影響不大，對魚類風(fēng)險較大。

植物滅螺劑＂螺威＂；釘螺；環(huán)境生物；死亡率

釘螺是日本血吸蟲唯一的中間宿主，消滅了釘螺，血吸蟲病的傳播也將阻斷，因此，消滅釘螺是干預(yù)以至消滅血吸蟲病的一項重要措施。目前主要的滅螺方法有生態(tài)滅螺、物理滅螺及藥物滅螺。藥物滅螺包括植物藥物滅螺和化學(xué)藥物滅螺。植物藥物滅螺系指對于某些含有滅螺有效成分的植物資源，利用一定的分離手段提取其根莖、葉、花、果和籽中的有效成分，用于殺滅釘螺，國內(nèi)報道有一定滅螺作用的植物滅螺藥約有50余種［1］。不管是哪一類滅螺藥物，在滅螺過程中都不可避免會對環(huán)境生物的安全性產(chǎn)生一定影響。國內(nèi)外學(xué)者在研究滅螺劑對環(huán)境生物的影響時，分別用白鰱、草魚、紅鯉、arassius spp和尖頭小條魚等進行過急性毒性試驗①［2，3］，在上世紀90年代初期進行了氯硝柳胺緩釋滅螺劑對魚類的安全性試驗研究，但關(guān)于植物滅螺劑對于環(huán)境生物的安全性研究尚未見報道。

植物滅螺劑“螺威”具有良好的殺滅血吸蟲唯一中間宿主釘螺的效果，能夠有效阻斷血吸蟲病的傳播，并且價格低廉，具有十分重要的推廣價值，因此，開展植物滅螺劑“螺威”對環(huán)境生物的影響性研究具有十分重要的意義。

1 試驗材料

1.1 供試農(nóng)藥

4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑，由湖北金海潮科技有限公司提供。

1.2 供試生物

1.2.1 試驗魚種

測試魚種為斑馬魚（Brachydanio rerio HB），平均體長（連尾）3.5 cm，平均體重約0.4 g，由南京夫子廟水族館提供。試驗前在室內(nèi)馴養(yǎng)7 d，馴養(yǎng)期間斑馬魚生長正常，無死亡，全部健康無病，大小一致。試驗前一天停止喂食，試驗中也不喂食。

1.2.2 試驗鳥種

試驗鳥種為日本鵪鶉（Coturnix coturnix japonica），由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)養(yǎng)雞場提供。選用30d齡、體重100 g左右，健康活潑的鵪鶉供試。試驗前在室內(nèi)試驗條件下預(yù)養(yǎng)7 d，預(yù)養(yǎng)期間鵪鶉全部生長正常，無病無死亡。

1.2.3 試驗蝦種

試驗蝦種為青蝦（Macrobrachium nipponensis de Haan），平均體重2.0 g。試驗前在室內(nèi)馴養(yǎng)2 d，馴養(yǎng)期間青蝦生長正常，無一死亡。試驗用蝦全部健康無病，大小一致。試驗前1d停止喂食，試驗中亦不喂食。

2 試驗方法

2.1 魚類試驗

試驗用水為經(jīng)存放并曝氣去氯處理24 h以上的自來水。試驗容器為25 L的玻璃缸。在每個試

①J.Hashiguchi.Japan Parasite，33（SPPI），1984：51.驗缸中配制10 L不同濃度的藥液，并投入斑馬魚10條。調(diào)節(jié)室溫使水保持在20℃左右。

先通過預(yù)試確定毒性影響范圍，正式試驗時，在此范圍內(nèi)按一定比例級差設(shè)置若干組不同濃度藥液，另設(shè)一組空白對照，每個處理設(shè)3個重復(fù)。試驗采用每隔24 h更換一次藥液的半靜態(tài)法。試驗中定時測定各缸中試液的溶解氧及pH值。試驗歷時96 h，連續(xù)觀察24，48，72，96 h斑馬魚的中毒癥狀和死亡數(shù)字，及時清除死魚。根據(jù)試驗結(jié)果得出4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對斑馬魚的半致死濃度LC50值。

2.2 鳥類試驗

試驗室溫度20～25℃，室內(nèi)通風(fēng)透光；飼料采用成鶉飼料，同時喂以清水；試驗鵪鶉每組10只（雌雄各半）；試驗前隔夜禁食，只供清水。試驗前按正式試驗條件先預(yù)試，求出農(nóng)藥對鵪鶉的毒性影響范圍，正式試驗時在此范圍內(nèi)按一定比例級差設(shè)置若干處理濃度，每個濃度設(shè)3個重復(fù)，并設(shè)一組空白對照。試驗采用一次性劑量直接注入的經(jīng)口染毒灌胃法。將農(nóng)藥按設(shè)計的劑量配成不同濃度，然后按每100 g體重鵪鶉灌藥0.5 mL進行染毒處理。處理后的鵪鶉按常規(guī)方法飼養(yǎng)，觀察記錄鵪鶉中毒癥狀和死亡情況，試驗歷時7 d。根據(jù)試驗結(jié)果得出4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對鵪鶉的半致死劑量LC50值。

2.3 蝦試驗

試驗用水為經(jīng)存放并曝氣去氯處理24 h以上的自來水，試驗容器為25 L的玻璃缸，在每個試驗缸中配制20 L不同濃度的藥液，并投入青蝦10只，調(diào)節(jié)室溫使水保持在20℃左右。

試驗前按正式試驗條件先預(yù)試，求出4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對青蝦全部致死的最低濃度和全部存活的最高濃度。正式試驗在此濃度范圍內(nèi)，按級差設(shè)置若干組不同濃度的藥液，另設(shè)一組空白對照，每個處理設(shè)3個重復(fù)。試驗采用每隔24 h更換一次藥液半靜態(tài)法，試驗中定時測定各缸中試液的溶解氧及pH值。試驗歷時96 h，連續(xù)觀察記錄24，48，72，96 h試驗生物中毒癥狀和死亡數(shù)字，及時清除死亡者。用概率統(tǒng)計法求出4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對青蝦的半致死濃度LC50值。

3 試驗結(jié)果與毒性評價

3.1 魚類試驗

試驗設(shè)置0.04，0.10，0.15，0.20，0.40 mg／L及空白對照6個藥液濃度組。試驗表明，斑馬魚接觸藥液后，低濃度組頻繁掉頭，快速游動，且口部急速張合，顯呼吸短促狀態(tài)；高濃度組蹭頭、甩尾、竄動翻滾，且色發(fā)白，腹腫脹，20～30 min后，側(cè)臥水底，抽動痙攣，迅速掙扎死亡。在試驗期內(nèi)各處理組斑馬魚的死亡率見表1。

由表1可以看出，96 h的LC50為0.15 mg／L，95%可信限為0.14～0.17 mg／L。根據(jù)農(nóng)藥對魚類毒性分級標準，96 h的LC50值大于10.0 mg／L的為低毒，1.0～10.0 mg／L為中毒，0.1～1.0 mg／L為高毒，小于0.1 mg／L為劇毒?？梢?，4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對魚類高毒。由于該藥直接用于水體或水邊灘涂及坡地，且使用濃度高于LC50值，因此對魚類風(fēng)險較大，應(yīng)密切注意魚類的影響。

3.2 鳥類試驗

試驗設(shè)置6，12，24，36，60 mg／kg體重及空白對照6個濃度組。試驗結(jié)果顯示，處理后低濃度組中毒癥狀不明顯；高濃度組甩頭，脖頸伸縮不定，喙張合不停，喉道抽噎出聲，而且尾前勾，翅下垂，羽毛蓬松凌亂，20 h后，少數(shù)死亡。試驗結(jié)果如表2所示。

表1 4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對斑馬魚毒性試驗成果表Table 1 Test results of 4%Lo-wei powder（TDS）p lantmolluscicide on zebra fishes’toxicity

表2 4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對鵪鶉急性毒性試驗成果表Table 2 Test results of 4%Lo-wei pow der（TDS）p lantm olluscicide on quails’acute toxicity

表3 4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對青蝦的毒性Table 3 Test results on 4%Lo-wei powder（TDS）plantmolluscicide on the toxicity of freshwater shrimps

由表2可以看出，7 d的LC50值大于60 mg／kg體重。根據(jù)農(nóng)藥對禽鳥的毒性等級劃分標準，LC50大于50 mg／kg體重的農(nóng)藥為低毒農(nóng)藥；50～500 mg／kg體重的農(nóng)藥為中毒農(nóng)藥；10～50 mg／kg體重的農(nóng)藥為高毒農(nóng)藥；小于10 mg／kg體重的農(nóng)藥為劇毒農(nóng)藥。在本試驗中60 mg／kg體重為最高配置濃度，在該濃度時鳥的死亡率僅為20%，可見4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對鳥類為中毒，由于該藥不是以顆粒劑形式使用，因此對鳥的實際危害影響不大。

3.3 青蝦試驗

試驗設(shè)置1，2，3，5，10 mg／L及空白對照6個藥液濃度組。試驗表明，青蝦接觸4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑試液后，低濃度組青蝦起初活動激劇，在試驗液中忽上忽下，泳足急速扇動，顯煩躁不安狀態(tài)，1～2 h后，大部分都能恢復(fù)到正常狀態(tài)。高濃度組青蝦頭上昂，尾前勾，胸腹部下凹，群聚一起，身體起伏顛動，8～10 h后大部分蹭尾竄動，側(cè)動舞足，掙扎死亡，試驗結(jié)果如表3所示。

由表3試驗藥液濃度和各組青蝦的死亡率，可計算得出4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對青蝦LC50（96 h）為6.28 mg／L，95%可信限為3.53～11.2 mg／L。根據(jù)農(nóng)藥對水生物毒性分級標準，96 h LC50值大于10.0 mg／L為低毒，1.0～10.0 mg／L為中毒，0.1～1.0 mg／L為高毒，小于0.1 mg／L為劇毒。由此可見，4%螺威粉劑（TDS）植物滅螺劑對蝦類中毒，浸殺法使用濃度為0.2 mg／L，小于該藥對蝦的LC50值，對蝦的實際風(fēng)險??；噴殺法、噴粉法實際使用濃度為100 mg／L，大于LC50值的10倍，因此使用時對蝦類風(fēng)險大，應(yīng)密切注意對蝦的影響。

4 討 論

（1）據(jù)文獻［3］報道，對大多數(shù)毒物來講，胚胎到仔魚或早期幼魚是最敏感的發(fā)育階段，由此而求得的安全濃度與部分或全生活周期所求得的安全濃度是一致的。本試驗用魚、鳥、蝦生殖腺均未發(fā)育或未完全發(fā)育，試驗材料滿足要求。

（2）根據(jù)“植物滅螺劑‘螺威’殺滅湖北釘螺藥效試驗研究”成果，4%螺威粉劑（TDS）室內(nèi)浸殺試驗對湖北釘螺第3d死亡率為100%；室內(nèi)噴灑試驗7.5，5.0，2.5 g／m33個試驗濃度中7.5 g／m3和5.0 g／m3濃度組均達到死亡率95%以上。按農(nóng)藥檢（生測）函［2005］77號《農(nóng)藥登記衛(wèi)生用滅螺劑藥效試驗方法和評價》（試行）中藥效評價指標進行評價，4%螺威粉劑（TDS）現(xiàn)場浸殺試驗，對湖北螺釘?shù)? d死亡率為100%，達到死亡率95%以上的合格指標；噴灑試驗對湖北螺釘15 d死亡率為90.03%，達到死亡率85%以上的合格指標。4%螺威粉劑（TDS）室內(nèi)浸殺、噴灑試驗和現(xiàn)場浸殺、噴灑試驗對湖北釘螺藥效均達到合格指標，具有現(xiàn)場推廣應(yīng)用價值。

（3）安全性試驗表明，4%螺威粉劑（TDS）對魚類為高毒，對鳥類的實際危害不大，浸殺對蝦類實際風(fēng)險小，噴殺對蝦類風(fēng)險大。

（4）使用4%螺威粉劑（TDS）殺滅釘螺時，應(yīng)根據(jù)殺螺區(qū)域魚、鳥、蝦實際分布情況采取相應(yīng)的殺滅方法，現(xiàn)場采用旱地噴殺法滅螺比較安全。

［1］ 李潔，錢萬紅，黃軼昕.植物滅螺藥物研究進展［J］.中國血吸蟲病防治雜志，2002，14（1）：67－69.（LI Jie，QUAN Wan-hong，HUANG Yi-qing.Progress of plant molluscicides［J］.Schistosomiasis Control in China，2002，14（1）：67－69.（in Chinese））

［2］ 熊維楷，蔡德全.氯硝柳胺緩釋滅螺劑對魚類的安全性試驗［J］.環(huán)境污染與防治，1992，14（3）：11－12.（XIONG Wei-kai，CAI De-quan.Niclosamide release molluscicide testing the safety of fish［J］.Environmental Pollution and Control，1992，14（3）：11－12.（in Chinese））

［3］ 周永新.環(huán)境污染與生態(tài)學(xué)文集［C］.南京：江蘇科技出版社，1986.（ZHOU Yong-xin.Collection of environmental pollution and ecological［C］.Nanjing：Jiangsu Science and Technology Press，1986.（in Chinese））

（編輯：趙衛(wèi)兵）

Research on Environmental Biosafety of“Lo-wei”Powder（TDS）Plant M olluscicide in 4 Percent

SUN Hou-cai1LIU Xiao-lu1，LIU Rui-hua2
（1.Yangtze River Scientific Research Institute，Wuhan 430010，China；2.Wuhan Institute of Technology，Wuhan 430073，China）

The purpose of the paper is to test the toxicity of the plantmolluscicide“Lo-wei”to zebra fishes，Japanese quails and freshwater shrimps in laboratory to evaluate its impacton the environment.According to the rightful test conditions，the toxicity range of themolluscicide on the zebra fish，Japanese quail and freshwater shrimp was previous tested.In the rightful test we set different molluscicide concentrations by a certain percentage in this range，with 3-time repeat tests for each concentration，and a set of contrast test.When“Lo-wei”powder（TDS）concentration in 4 percent is higher than the safe level of plantmolluscicide LC50value，itgenerates amoderate toxicity to birds and shrimps，little effect to birds actually and a greater risk to fishes.

plantmolluscicide“Lo-wei”（TDS）；oncomelania；environmental biology；mortality

R383

A

1001－5485（2010）11－0102－03

2010-09-10

科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項目（2009GB23320485）。

孫厚才（1964-），男，湖北廣水人，教授級高級工程師，主要從事土壤侵蝕與防災(zāi)減災(zāi)、環(huán)境與生態(tài)工程等方面的研究工作，（電話）027-82926643（電子信箱）sun＿hc＠126.com。