雷光星 屈玲 薛志宏
當(dāng)血紅蛋白在消化道內(nèi)存留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí),會(huì)被胃腸道的酶和細(xì)菌所降解,或由于胃酸的作用使血紅蛋白(HB)的構(gòu)象及結(jié)構(gòu)在強(qiáng)酸作用下發(fā)生某些變化。使其失去免疫原性??赡艹霈F(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果減弱或假陰性結(jié)果。給本來(lái)非常特異的免疫法測(cè)定HB造成困難。而化學(xué)法測(cè)定大便潛血又會(huì)受到飲食、藥物以及檢測(cè)方法不特異諸多因素的影響。為此我們應(yīng)用化學(xué)法和免疫法聯(lián)合測(cè)定大便潛血。探討兩種大便潛血試驗(yàn)在臨床應(yīng)用中的差異從而選擇最適的測(cè)定方法為臨床提供科學(xué)依據(jù)。
1.1 試劑
1.11 免疫法試劑盒:由萬(wàn)華普曼生物工程有限公司提供,產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):YZB/國(guó)0685-2008。
1.12 化學(xué)法試劑盒:由(臺(tái)資)珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供,執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號(hào):YZB/粵0480-2005。
1.2 方法 由專人隨機(jī)采集本院當(dāng)天門(mén)診和住院患者糞便留于清潔、干燥、有蓋的塑料小容器中,馬上送到實(shí)驗(yàn)室。由指定專業(yè)人員嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作要求,應(yīng)用化學(xué)法和免疫法兩種方法同時(shí)做大便潛血試驗(yàn)。
在4 0 0例受檢者中,化學(xué)法和免疫法陽(yáng)性率分別為15.2%(62/400)和11.0%(44/400)。兩種方法全陰性為326例;兩種方法全陽(yáng)性為32例。化學(xué)法陽(yáng)性、免疫法陰性為30例;而免疫法陽(yáng)性、化學(xué)法陰性為12例。具體結(jié)果見(jiàn)表1和表2。
3.1 在臨床實(shí)驗(yàn)室中大便潛血試驗(yàn)多數(shù)應(yīng)用化學(xué)法和免疫法進(jìn)行測(cè)定。前者任何有類似氧化物酶活性的物質(zhì)都可影響此實(shí)驗(yàn),如動(dòng)物的血紅蛋白。另外維生素C、鐵劑、綠色蔬菜均會(huì)造成假陰性。而后者如果HB在消化道停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng),受細(xì)菌、酶分解以及胃液酸性物質(zhì)等因素的影響而發(fā)生變化,使其與包被抗體不能發(fā)生特異性結(jié)合而出現(xiàn)假陰性。在本試驗(yàn)中化學(xué)法陽(yáng)性率(15.5%)遠(yuǎn)大于免疫法(11.0%).差異非常顯著(P<0.05)也說(shuō)明了這一點(diǎn)。
表1 400例受檢者大便潛血試驗(yàn)兩種實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果。
表2 400例受檢者大便潛血試驗(yàn)應(yīng)用兩種實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)結(jié)果的分析
3.2 在表2中化學(xué)法陽(yáng)性免疫法陰性占30例,在這30例中有以下特點(diǎn)。⑴、多數(shù)病例出血部位在上消化道并部分大便呈棕褐色。有影響化學(xué)法假陽(yáng)性因素存在(如飲食、用藥等)。說(shuō)明上消化道出血時(shí)HB在消化道停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng),胃酸及其它因素造成HB的免疫原性(或HB分子構(gòu)象)發(fā)生變化。與標(biāo)記抗體不匹配無(wú)法進(jìn)行特異性結(jié)合而出現(xiàn)假陰性。由于有影響化學(xué)法假陽(yáng)性因素存在使得化學(xué)法測(cè)定大便潛血的假陽(yáng)性率升高是造成兩種實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)結(jié)果不一致的主要原因。
3.3 對(duì)部分呈棕褐色的大便有可能是HB含量過(guò)大出現(xiàn)的抗原抗體比例不合適所致的假陰性。對(duì)這部分大便我們用鹽水進(jìn)行稀釋以后再用免疫法進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果一部分可以出現(xiàn)陽(yáng)性,而一部分仍然是陰性。這說(shuō)明在免疫法檢測(cè)中假陰性的出現(xiàn)有兩種可能,一種是抗原抗體比例不合適;另一種是HB的免疫原性發(fā)生改變。
3.4 在本實(shí)驗(yàn)中(表2)有12例測(cè)定結(jié)果是化學(xué)法陰性免疫法陽(yáng)性。對(duì)這12例病人進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)多數(shù)病例的病種與消化道出血無(wú)關(guān)。只有兩例是痔瘡。我們?cè)谠儐?wèn)病史和了解病人病程變化情況以及用藥中發(fā)現(xiàn)。多數(shù)病例確實(shí)有消化道出血的可能,這與實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。同時(shí)也有影響化學(xué)法測(cè)定大便潛血假陰性因素存在。故我們認(rèn)為是化學(xué)法假陰性結(jié)果所致。
總之免疫法和化學(xué)法符合率存在一定的差異,兩者聯(lián)合運(yùn)用可以降低假陽(yáng)性及假陰性,以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。并對(duì)潛血的來(lái)源及量作出大概的推斷,為臨床提供更好的科學(xué)依據(jù)。