張瓊英

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，重慶 400010）

健兒樂顆粒是由山楂、白芍、竹葉卷心等制成的中藥制劑，具有清熱平肝、清心除煩、健脾消食的功效，用于治療兒童煩躁不安、夜驚夜啼、夜眠不寧、消化不良。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜法測(cè)定健兒樂顆粒中芍藥苷的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695/2996型高效液相色譜儀（Waters公司）。芍藥苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為110736-200527）；健兒樂顆粒（市售品，批號(hào)分別為 090801，090802，090803，090804，090901）；水為純化水，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：DiamonsilTMC18柱（250 mm × 4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈 -0.1%磷酸溶液（14 ∶86）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm。理論板數(shù)以芍藥苷計(jì)算不低于3000。

2.2 溶液制備

精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.0884 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取本品10 g，研細(xì)，精密稱取4.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率240 W，頻率 45 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按健兒樂顆粒制備工藝，制備缺白芍的陰性樣品，照供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性考察：取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。可見供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上有一相同色譜峰，陰性對(duì)照品溶液在此保留時(shí)間內(nèi)無吸收峰，表明陰性對(duì)照品對(duì)測(cè)定無干擾，專屬性較好（圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液 2，4，8，16，20μL，注入液相色譜儀。以芍藥苷進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 Y=504756.12 X-13501.42，r=0.9999（n=5）。結(jié)果表明，芍藥苷進(jìn)樣量在 0.1768 ～1.7680μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定芍藥苷峰面積。結(jié)果的RSD為0.6%（n=5）。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于 0，2，4，10，16 h 時(shí)進(jìn)樣。結(jié)果芍藥苷峰面積的RSD為0.7%（n=5），表明供試品溶液穩(wěn)定性良好。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：按擬訂的含量測(cè)定方法，取同一批樣品6份，依法測(cè)定。結(jié)果芍藥苷平均含量為5.86 mg/袋，RSD為0.90%（n=6）。

加樣回收試驗(yàn)：取已知含量的樣品6份，分別加入芍藥苷對(duì)照品，按供試品溶液制備方法制備溶液，測(cè)定其芍藥苷含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 芍藥苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.4 樣品含量測(cè)定

按2.2項(xiàng)下制備方法制備供試品溶液，并按2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。結(jié)果批號(hào)為 090801，090802，090803，090804，090901 的 5 批樣品中，芍藥苷含量分別為 5.86，5.48，6.02，6.10，5.94 mg/袋。

3 討論

采用本含量測(cè)定方法時(shí)，參考文獻(xiàn)[1]選用乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相，經(jīng)多次試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)14∶86的乙腈-0.1%磷酸溶液能使芍藥苷峰與相鄰色譜峰分離良好，且峰形對(duì)稱，陰性對(duì)照亦無干擾，故本法可用于健兒樂顆粒的質(zhì)量控制。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：68.