曹世勤, 駱惠生, 武翠平, 金社林*,王曉鳴, 朱振東, 尚勛武
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,蘭州 730070; 2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,蘭州 730070;3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所,北京 100089; 4.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院,雅安 625000)
由專性寄生菌小麥白粉菌[Blumeriagraminis(DC.)E.O.Speer]引起的小麥白粉病是危害甘肅省及我國(guó)小麥的主要病害之一[1]。近年來(lái),由于攜帶黑麥血緣1BL/1RS代換系抗病基因Pm8的品種占栽培小麥的絕大多數(shù),對(duì)Pm8有毒性的Avr8在白粉菌群體中逐漸占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位,致使生產(chǎn)上大面積推廣種植的含有繁6及其衍生系小麥品種及Pm8基因品種的抗病性“喪失”[2],導(dǎo)致小麥白粉病在甘肅省的發(fā)生呈逐年加重趨勢(shì),近年來(lái)年平均發(fā)病面積在26.7萬(wàn)hm2以上,災(zāi)變態(tài)勢(shì)嚴(yán)重。研究表明,種植抗病品種是防治該病最經(jīng)濟(jì)有效且有利于保護(hù)環(huán)境的措施。基于此,國(guó)內(nèi)外相關(guān)學(xué)者利用多種方法,開展了抗源篩選、品種抗性利用評(píng)價(jià)工作[3-6]。在品種抗性遺傳分析方面,國(guó)內(nèi)外學(xué)者利用經(jīng)典遺傳學(xué)方法,開展了諸多研究,明確了它們的抗病基因數(shù)量及遺傳方式[7-8],為品種的更好利用打下了良好的基礎(chǔ)。
隴鑒9343、隴鑒9811是甘肅省農(nóng)科院植保所小麥病害課題組分別利用常規(guī)雜交技術(shù)和外源DNA花粉管導(dǎo)入技術(shù),通過(guò)系統(tǒng)選育而獲得的冬小麥新品種,分別于2006年12月和2009年1月通過(guò)甘肅省品種審定委員會(huì)審定。為進(jìn)一步明確這兩個(gè)品種的抗白粉性特點(diǎn)及其遺傳結(jié)構(gòu),作者開展了品種苗期抗性遺傳分析研究,旨在為它們?cè)谏a(chǎn)和育種中的利用打下良好基礎(chǔ)。
1.1.1 供試品種
隴鑒9343、隴鑒9811和銘賢169均來(lái)自甘肅省農(nóng)科院植保所。供試材料對(duì)供試菌系的反應(yīng)見表1。
表1 供試品種苗期及成株期抗性表現(xiàn)
1.1.2 供試菌系
苗期鑒定菌系為E05和E09的新鮮單孢菌系,由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所檢疫基地購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所并繁殖保存。成株期鑒定為自然誘發(fā)的白粉菌混合菌。
2006年 5月中旬,分別以隴鑒 9343和隴鑒9811為母本,以銘賢169為父本進(jìn)行雜交,2006年秋將收獲的種子點(diǎn)播于甘肅省農(nóng)科院植保所甘谷試驗(yàn)站,2007年5月F1代植株自交,獲得F2代種子,在收獲的同時(shí),淘汰與兩親本田間表現(xiàn)嚴(yán)重不一致(抗病性、農(nóng)藝性狀)的 F1代假雜株。
2009年3月,在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所檢疫基地將供試組合及親本材料播于直徑為10cm塑料花盆中,每盆15粒,在小麥生長(zhǎng)的2葉1心期,采用掃抹法接種供試小種的單孢菌系。接種后的幼苗置于10℃以下的黑暗條件下保濕24~48h,之后在溫室平均溫度為12~18℃,光照10~12h/d,光照強(qiáng)度 5000~8000lx的條件下生長(zhǎng)10~15d后記載發(fā)病級(jí)別。苗期病情級(jí)別記載采用全國(guó)統(tǒng)一的 0、0;、1 、2、3、4 共 6 級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,其中0~2級(jí)為抗病(R),3~4級(jí)為感病(S)[9]。用實(shí)測(cè)值與期望值的比率χ2c進(jìn)行適合性檢驗(yàn)。
成株期病級(jí)鑒定在甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所甘谷試驗(yàn)站進(jìn)行,病級(jí)記載參照盛寶欽等方法進(jìn)行[10]。
由表2結(jié)果看出,苗期接種E05,在F2代植株中,抗病65株,感病217株,卡方測(cè)驗(yàn)符合理論比1∶3(χ2c=0.63<χ20.05,1=3.84),也符合理論比,表明隴鑒9343對(duì)E05的抗性由1對(duì)隱性基因控制。
表2 供試組合F2群體苗期抗性分離結(jié)果1)
苗期接種E09,F2代植株抗感分離比為65R∶154S,近似于理論比1∶3,卡方測(cè)驗(yàn)也符合該結(jié)果,表明隴鑒9343對(duì)E09的抗性由1對(duì)隱性基因控制。
苗期分別接種E05和E09,F2代植株抗感分離比分別為52R∶166S和87R∶314S,近似于理論比 1∶3,卡方測(cè)驗(yàn)也符合該結(jié)果,表明隴鑒9811對(duì)E05和E09的抗性均由1對(duì)隱性基因控制。
Loegering(1968)以基因?qū)驅(qū)W說(shuō)為原理,提出根據(jù)侵染型推導(dǎo)基因型的設(shè)想,Browder進(jìn)一步完善了基因推導(dǎo)法,建立了通用的基因推導(dǎo)原則,這一方法在以小麥條銹病為主的抗性研究中得到廣泛應(yīng)用[11]。作者通過(guò)對(duì)隴鑒 9343和隴鑒9811的苗期抗白粉性遺傳分析,初步明確了它們對(duì)白粉菌菌株E05和E09的抗性基因數(shù)量、顯隱性和遺傳方式,為更好地利用這兩個(gè)品種打下了良好的基礎(chǔ)。
成株期調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩品種在甘肅隴南田間雖表現(xiàn)感病,但旗葉嚴(yán)重度與高感品種京雙16相比相對(duì)較低,這兩個(gè)品種是否具有成株抗性特點(diǎn),尚需進(jìn)一步研究。
徐建龍等[12]認(rèn)為,通過(guò)病菌小種接種試驗(yàn)來(lái)推斷抗病品種的抗病基因來(lái)源,小種的選擇是關(guān)鍵。本試驗(yàn)選擇近年來(lái)中國(guó)和甘肅省出現(xiàn)頻率高、毒力強(qiáng)的E05、E09作為供試菌系,開展抗性評(píng)價(jià)及遺傳分析,對(duì)有效評(píng)價(jià)這兩個(gè)品種的抗病性具有現(xiàn)實(shí)意義。
研究發(fā)現(xiàn),F1、F3代材料的抗性鑒定可較好地驗(yàn)證、補(bǔ)充和完善依據(jù)F2代材料得出的結(jié)論準(zhǔn)確性,由于時(shí)間和其他因素的限制,尚未進(jìn)行該項(xiàng)試驗(yàn),在今后的工作中還需進(jìn)一步補(bǔ)充和完善。
[1]李迅,肖悅巖,劉萬(wàn)才,等.小麥白粉病地理空間分布特征[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2002,29(1):41-46.
[2]李繼平,金社林,曹世勤,等.小麥抗白粉病基因在甘肅省的有效性及評(píng)價(jià)[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2003,30(1):30-33.
[3]李隆業(yè),黃元江.小麥已知基因的效應(yīng)及評(píng)價(jià)[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),1990,23(3):20-26.
[4]曹世勤,郭建國(guó),駱惠生,等.甘肅小麥抗源材料的篩選及抗病基因庫(kù)的組建[J].植物保護(hù),2008,34(1):49-52.
[5]李強(qiáng),王保通,吳興元,等.陜西省小麥抗白粉病基因及新育成小麥品種(系)抗白粉病分析[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),2008,35(5):438-442.
[6]Bennet F G A.Resistance to powdery mildew in wheat:a review of its use in agriculture and breeding programmes[J].Plant Pathology,1984,33:279-300.
[7]馬雨磊,駱惠生,賈秋珍,等.“中梁22號(hào)”小麥抗條銹基因的遺傳分析[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,43(5):110-112.
[8]謝志軍,曹世勤,金社林,等.意大利抗病小麥品種Pascal抗條銹性的遺傳分析[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,41(2):39-41.
[9]盛寶欽.用反應(yīng)型記載小麥苗期白粉病[J].植物保護(hù),1988,14(1):49.
[10]盛寶欽,段霞瑜.用反應(yīng)型記載小麥成株白粉病“0~9級(jí)法”的改進(jìn)[J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué),1991(1):38-39.
[11]Wellings C R,McIntosh R A.Pucciniastrii formis f.sp.tritici in Australasia:pathogenic changes during the first 10 years[J].Plant Pathology,1990,39:316-325.
[12]劉瞳,張學(xué)博.水稻對(duì)稻瘟病抗性的遺傳研究—福建主要秈稻抗源的基因分析[J].植物病理學(xué)報(bào),1990,20(1):41-46.