齊艷萍，李和平

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，大慶 163319；2.東北林業(yè)大學(xué)野生動物資源學(xué)院）

鹿茸是我國傳統(tǒng)名貴藥材，中西醫(yī)皆認(rèn)為鹿茸具有振奮神經(jīng)、增強(qiáng)內(nèi)臟器官機(jī)能之功效[1]。隨著對鹿茸研究的深入，近年來發(fā)現(xiàn)，鹿茸具有調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、促進(jìn)各種生理機(jī)能活動的作用。它能促進(jìn)蛋白質(zhì)、核酸的合成，加速未成年小鼠的生長發(fā)育，對老年小鼠的效果更為顯著。鹿茸對蛋白質(zhì)代謝和能量代謝的改善作用是其強(qiáng)筋健骨功效的重要藥理基礎(chǔ)[2]。本文以鹿茸粉為研究材料，研究在不同類型肝損傷條件下，通過測量血清中總蛋白（TP）和白蛋白（ALB）的含量來評價(jià)鹿茸粉對小鼠肝臟在蛋白質(zhì)的合成貯備功能方面的作用，為充分開發(fā)鹿茸新的藥用價(jià)值提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1 材料方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

昆明種小鼠，20～25 g，于普通動物飼養(yǎng)室飼養(yǎng)，自由飲用自來水，定時(shí)通風(fēng)換氣。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 CCl4肝損傷模型的建立

將CCl4溶于油中混勻，制成0.1%（V/V）CCl4油溶液，腹腔注射的劑量為10mL·kg-1，制成CCl4急性肝損傷模型。

1.2.2 APAP肝損傷模型的建立

將APAP溶于無菌生理鹽水中，腹腔注射的劑量為150 mg·kg-1，制成急性APAP肝損傷模型。

1.2.3 動物分組及給藥

小鼠隨機(jī)分組，每組10只。CCl4和APAP兩類肝損傷試驗(yàn)分別分為空白組、模型組、陽性對照組、鹿茸粉組。給藥時(shí)，空白組和模型組小鼠每天ig（灌胃給藥）生理鹽水1次，陽性對照組ig150 mg·kg-1聯(lián)苯雙酯1次，鹿茸粉組以10mL·kg-1劑量ig15%鹿茸粉溶液1次，連續(xù)7 d。在第7天給藥后，空白組ip（腹腔注射）生理鹽水，其余CCl4各實(shí)驗(yàn)組均ip10mL·kg-10.1%CCl4油溶液，APAP各實(shí)驗(yàn)組均以125 mg·kg-1劑量ipAPAP。禁食，不禁水。16 h后，取血，制備血清，用試劑盒測定血清中TP、ALB的濃度[3]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 CCl4肝損傷的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表1可知CCl4導(dǎo)致小鼠肝損傷后，模型組TP和ALB含量與空白組相比明顯降低，兩者比較差異極顯著（P＜0.01）。給予鹿茸粉后，TP含量雖有所升高，但差異不顯著；而ALB含量升高幅度較大，差異極顯著（P＜0.01），其作用效果明顯優(yōu)于保肝藥物對照組。

表1 鹿茸粉對CCl4急性肝損傷小鼠TP、ALB的影響Table 1 The level of TP、ALB in blood serum on mice of liver injury by CCL4

2.2 APAP肝損傷的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，APAP導(dǎo)致小鼠發(fā)生急性肝損傷后，模型組TP和ALB含量與空白組相比明顯降低，兩者比較差異極顯著（P＜0.01）。鹿茸粉組對TP和ALB的升高幅度均比較大，與模型組間差異顯著（P＜0.05），其作用效果明顯優(yōu)于保肝藥物組。

表2 鹿茸對APAP急性肝損傷小鼠TP、ALB含量的影響Table 2 The level of TP、ALB in blood serum on mice of liver injury by APAP

3 結(jié)論與討論

通過上述實(shí)驗(yàn)表明，在肝臟受到損傷情況下，鹿茸粉能顯著降低小鼠血清中TP和ALB的含量，調(diào)節(jié)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝，改善肝臟的合成貯備功能。

在動物機(jī)體內(nèi)，蛋白質(zhì)負(fù)責(zé)維持血液滲透壓及pH值、運(yùn)輸、營養(yǎng)、凝血和抗凝血以及免疫作用等生理功能。而肝臟在蛋白質(zhì)代謝過程中起重要作用，機(jī)體合成的白蛋白、酶蛋白以及血漿蛋白質(zhì)的生成、維持及調(diào)節(jié)都需要肝臟參與。其合成的蛋白可分為白蛋白和球蛋白兩部分，其中白蛋白在肝細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成后，通過高爾基體運(yùn)輸出細(xì)胞膜，不在肝細(xì)胞內(nèi)停留，肝損傷嚴(yán)重時(shí)，白蛋白的合成、細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)和釋放發(fā)生障礙，引起血清白蛋白減少，因此血清ALB含量可以反映肝細(xì)胞的合成貯備功能[4-5]。肝損害時(shí)，肝臟蛋白質(zhì)代謝功能發(fā)生障礙，肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的功能降低，血清白蛋白含量顯著下降，從而導(dǎo)致總蛋白含量也大幅度下降[5]。如果血清中蛋白質(zhì)含量降低就表示肝臟合成功能受損害，因此在臨床上，TP、ALB常用來作為肝臟疾病的診斷、治療及預(yù)后觀察的指標(biāo)，其降低程度與肝損傷的嚴(yán)重程度成正比。

3.1 鹿茸粉對CCl4肝損傷小鼠肝臟合成貯備功能的影響

在研究中，CCl4模型組血清TP和ALB分別降低至 36.88±1.96 g·L-1和 23.91±1.94 g·L-1，含量明顯降低（P＜0.01），結(jié)果說明肝細(xì)胞發(fā)生病變，其合成蛋白質(zhì)的功能減退，因此血清中蛋白質(zhì)發(fā)生了質(zhì)和量的變化，從而提示肝組織發(fā)生了急性損傷?？偟鞍自诟螌?shí)質(zhì)輕度損害時(shí)無明顯變化，肝細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p害時(shí)下降，該實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒MTP含量明顯下降，說明肝臟受損較為嚴(yán)重。給予鹿茸粉后，將TP和ALB分別升高至 40.76±8.46 g·L-1和 29.80±1.43 g·L-1，此結(jié)果與雙環(huán)醇[6]的作用結(jié)果一致，說明鹿茸粉能提高肝細(xì)胞內(nèi)糖原、蛋白質(zhì)合成功能。鹿茸粉對ALB合成功能的提高效果較好，對于合成TP功能的恢復(fù)作用不大，提示鹿茸粉能在一定程度上緩解白蛋白的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和釋放的障礙，抑制白蛋白含量減少。

3.2 鹿茸粉對APAP肝損傷小鼠肝臟合成貯備功能的影響

在研究中，APAP模型組TP由57.06±2.17降至32.74±1.05 g·L-1，ALB 由 32.02±0.96 降至 22.79±2.18 g·L-1，含量極顯著降低（P＜0.01），這一結(jié)果與肝臟功能和蛋白含量關(guān)系的研究結(jié)果一致[7]，提示肝臟受到損傷后，蛋白質(zhì)合成、代謝功能發(fā)生障礙。給予鹿茸粉后，其TP和ALB的值分別升高至39.03±1.48 g·L-1和 27.17±2.31，作用效果差異顯著（P＜0.05），說明在肝臟合成貯備功能嚴(yán)重受損的情況下，鹿茸粉中的活性成分對其有一定程度的改善，這與許多肝臟保護(hù)藥物的作用一致，如黃芪總黃酮等[8]。

［1］韓盛蘭.鹿養(yǎng)殖與產(chǎn)品加工［M］.北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2004.

［2］高學(xué)敏.中藥學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000.

［3］宋正己，楊晉輝.實(shí)驗(yàn)性肝損傷模型的建立和研究發(fā)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2004，10（5）：278-280.

［4］羅文，杜芳騰，劉晶美.實(shí)驗(yàn)性大鼠肝損傷肝組織銅鋅變化研究［J］.江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，38（2）：21-23.

［5］吳麗，魏偉.肝纖維化的動物模型及治療藥物研究［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2004，20（5）：481-485.

［6］李燁.雙環(huán)醇對實(shí)驗(yàn)性肝損傷、肝纖維化的保護(hù)作用和保護(hù)機(jī)制的研究［D］.北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院，2001.

［7］Potter W.Z.，Davis D.C.，Mitchell J.R.，et al.Acetaminophen-induced hepatic necrosis.III.Cytochrome P450-mediated covalent binding in vitro［J］.J Pharmacol Exp Ther，1973，187：203.

［8］Critchley Julian，汪德清，丁保國，等.黃芪總黃酮對撲熱息痛所致肝損傷的防護(hù)機(jī)理探討［J］.中國中藥雜志，2001，26（9）：617-620.