王茹華，張啟發(fā)，馬光恕，廉華

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)農(nóng)學(xué)院，大慶 163319）

采用抗病的野生茄與栽培茄進(jìn)行嫁接防治土傳病害，可大大減少農(nóng)藥的使用量，消除環(huán)境污染，顯著提高蔬菜產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。發(fā)展至今，嫁接技術(shù)已成為保護(hù)地蔬菜高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、克服連作障礙、防止土傳病害和實現(xiàn)無公害良性生產(chǎn)的最為理想和有效的措施[1]。

有研究表明，植物對土傳病害的抗性與根際微生物（尤其是真菌）有密切關(guān)系[2]。然而，關(guān)于嫁接茄子根際真菌的種群類型等方面的研究還鮮見報導(dǎo)，因此，在前人工作基礎(chǔ)上，進(jìn)一步揭示嫁接茄子根際真菌的區(qū)系組成，將有助于人類對野生抗病資源及生防菌的利用與開發(fā)。

1 材料與方法

試驗于黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)實驗基地進(jìn)行。以刺茄、赤茄、剛果茄三個野生茄品種為砧木，坤豐茄王為接穗進(jìn)行嫁接，以坤豐茄王自根苗為對照（CK），當(dāng)砧木苗長至4～5片真葉時采用劈接法嫁接。

花期采集茄子根際土壤并分離得到根際真菌，采用洗滌法取樣，方法如下：

先將2 cm表土輕輕除去，再挖出全部根系，輕輕抖落根系上的多余土壤、剪下根系，每個處理取3株根，放入裝有定量無菌水的三角瓶中，在振蕩器上振蕩30min，取出根并用定量無菌水沖洗3次，瀝凈水分，將三角瓶內(nèi)水溶液搖勻后即成根際土壤懸浮液。每次各處理分離4皿（4次重復(fù)），求平均值。稀釋分離后放入25℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)，每天注意觀察菌落生長情況，及時計數(shù)。根際土壤質(zhì)量采用烘干法測定：取50mL混勻的土壤懸浮液，放入蒸發(fā)皿內(nèi)烘干，計算出每ml土壤懸浮液中根際土壤重量。最后計算出每g干土中根際真菌的數(shù)量。采用孟加拉紅－鏈霉素培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，采用PDA培養(yǎng)基進(jìn)行純培養(yǎng)。

根據(jù)真菌的培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征對其進(jìn)行種類鑒定，并根據(jù)各種根際真菌出現(xiàn)的頻率進(jìn)行區(qū)系分析，參照文獻(xiàn)3的方法（有改動），將出現(xiàn)頻率在5%以下的種類定為稀少；5%～10%之間的種類定為常見真菌；10%以上的種類則定為優(yōu)勢真菌[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同砧木嫁接茄子根際真菌的數(shù)量變化

嫁接換根改變了茄子根系分泌物的數(shù)量和組成，進(jìn)而影響了茄子根際微生物的區(qū)系組成。比較各處理茄子根際真菌的數(shù)量（圖1），可見，赤茄和刺茄兩個嫁接處理根際真菌數(shù)量略有增加，增幅分別為1.89%和4.88%，但差異未達(dá)到顯著水平；剛果茄嫁接處理根際真菌數(shù)量顯著低于對照（CK），降幅達(dá)43.09%。

圖1 不同砧木對嫁接茄子根際真菌數(shù)量的影響Fig.1 Effect of different rootstocks on rhizosphere fungi of grafted eggplants

2.2 嫁接茄子根際真菌的區(qū)系組成

綜合表1和表2的結(jié)果可以看出，在茄子根際中以曲霉屬（Aspergillus）、青霉屬（Penicillium）、鐮孢屬（Fusarium）、粘帚霉屬（Gliocladium）和漆斑菌屬（Myrothecium）等種數(shù)較多。不同處理都有自己獨特的根際真菌區(qū)系，其根際真菌的種類和種數(shù)各不相同，并且，各嫁接處理的根際根菌種數(shù)都少于CK，表現(xiàn)為CK根際真菌共10屬14種，而各嫁接處理根際真菌則為5～6屬10～12種。從根際真菌優(yōu)勢種來看，嫁接處理主要是煙曲霉原變種（A.fumigatus var.fumigatus）、赭曲霉（A.ochraceus）、腐皮鐮孢（F.solani）和土曲霉（A.terreus）；CK則主要是土曲霉（A.terreus）、露濕漆斑菌（M.roridum）和腐皮鐮孢（F.solani）。

表1 嫁接對茄子根際真菌種類及種數(shù)（個）的影響Table 1 Effect of grafting on genus and species of eggplant’s rhizosphere fungi

表2 嫁接茄子根際真菌區(qū)系分析Table 2 Mycobiota in rhizosphere of grafted eggplant

3 結(jié)論與討論

本研究明確了嫁接換根能在很大程度上改變茄子根際真菌的區(qū)系組成。除剛果茄根際真菌數(shù)量顯著低于對照外，其余兩個嫁接處理與對照差異均未達(dá)到顯著水平。發(fā)現(xiàn)了在茄子根際中以曲霉屬、青霉屬、鐮孢屬、粘帚霉屬和漆斑菌屬等種數(shù)較多。并且，各嫁接處理的根際真菌種數(shù)都少于CK，從根際真菌優(yōu)勢種來看，嫁接處理主要是煙曲霉原變種、赭曲霉、腐皮鐮孢和土曲霉；CK則主要是土曲霉、露濕漆斑菌和腐皮鐮孢。

茄子黃萎病是由大麗輪枝菌（Verticillium dahliae Kelb.）引起的一種世界性的土傳病害[4]。進(jìn)一步比較嫁接茄與CK自根茄的根際真菌優(yōu)勢種后發(fā)現(xiàn)，與CK不同的是，在所有嫁接處理的根際真菌優(yōu)勢種中，都含有對黃萎菌有高拮抗作用的煙曲霉原變種，這也是嫁接茄較自根茄抗病的原因之一。

［1］王茹華.嫁接茄子根系分泌物生化特性及對黃萎菌的抗性研究［D］.沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

［2］王茹華，張啟發(fā)，周寶利，等.淺析植物根分泌物與根際微生物的相互作用關(guān)系［J］.土壤通報，2007，38（1）：167-172.

［3］李洪連，袁紅霞，王燁，等.根際微生物多樣性與棉花品種對黃萎病抗性的關(guān)系研究II.不同抗性品種根際真菌區(qū)系分析及其對棉花黃萎病菌的抑制作用［J］.植物病理學(xué)報，1999，29（3）：242-246.

［4］李云鵬，周寶利，李之璞，等.嫁接茄的黃萎病抗性與根際土壤生物學(xué)活性的關(guān)系［J］.生態(tài)學(xué)雜志，2007，26（6）：831-834.