范玉峰 胡守蓮

1 河南省信陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院（464000）

2 河南省信陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所（464000）

米諾地爾搽劑是信陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院的自制制劑，臨床外用治療斑禿[1]、雄激素性脫發(fā)[2]等常見病癥。通過對(duì)現(xiàn)有文獻(xiàn)[3-5]的調(diào)研發(fā)現(xiàn)，米諾地爾的含量測(cè)定方法多為紫外分光光度（UV）法。為了更有效、快速、準(zhǔn)確的控制產(chǎn)品質(zhì)量，本試驗(yàn)應(yīng)用準(zhǔn)確度較高的高效液相色譜法檢測(cè)米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量，結(jié)果顯示此方法快速、操作簡(jiǎn)便、分離效果好，具有廣泛的推廣價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10A可進(jìn)紫外檢測(cè)器，C-R6A色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)。

甲醇為一級(jí)色譜純，水為純化水，其他化學(xué)試劑均為分析純。米諾地爾對(duì)照品（中國(guó)生物藥品檢定所，批號(hào)080429618），米諾地爾（江蘇金壇市天華化工新技術(shù)研究所，批號(hào) 080621，藥用規(guī)格），米諾地爾搽劑 （河南省信陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑室，20080421、20080511、20080624）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（Nova-PaKC18色譜柱 150mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（70∶30）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：285nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣體積：10μL。在此色譜條件下，測(cè)得米諾地爾對(duì)照品，米諾地爾搽劑樣品色譜圖，見圖1。在圖1中，米諾地爾保留時(shí)間約9.5min，理論板數(shù)7500，與其相鄰峰的分離度＞1.5。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液：精密稱取105℃干燥至恒重的米諾地爾對(duì)照品10mg，用甲醇定容至10mL容量瓶中，搖勻，精密量取稀釋液1mL，置100mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得米諾地爾對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取樣品5mL，置100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，精密量取稀釋液1mL，置100mL容量瓶中，用甲醇定容置刻度，搖勻，即得供試品溶液。

圖1 色譜圖

表 1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 線性關(guān)系考察

精密量取該對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，用甲醇稀釋成2.5、5、7.5、12.5、17.5、20mg/L系列濃度樣品，分別取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以峰面積均值X（n=3）對(duì)進(jìn)樣濃度Y（mg/L）線性回歸，得方程：Y=18.838X-0.296，r=0.9999。實(shí)驗(yàn)證明，米諾地爾在2.5～20mg/L范圍內(nèi)濃度與峰面積比呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。以最低濃度峰與基線噪音峰比值為1∶3倍計(jì)算，測(cè)得最低檢出濃度為0.5mg/L。

2.5 精密度試驗(yàn)

分別取線性試驗(yàn)項(xiàng)下的供試品儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相甲醇配成濃度分別為5、15、20mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，在1d內(nèi)分別重復(fù)進(jìn)樣5次，分別于1d內(nèi)測(cè)定，計(jì)算得日內(nèi)RSD（n=3）分別為1.67%、1.73%、1.51%。連續(xù)5d測(cè)定，計(jì)算得日間RSD（n=3）分別為2.01%、1.66%、1.70%。重現(xiàn)性良好，結(jié)果見表1。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取濃度為125μg/mL的對(duì)照品溶液和128μg/mL的供試品溶液，密封室溫放置4、8、12、24h后進(jìn)樣測(cè)定，米諾地爾含量RSD分別為1.77%和1.90%，表明溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)樣品，精密稱取5份，按上述方法制備供試品溶液，依上述色譜條件測(cè)定米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量，結(jié)果米諾地爾平均含量為98.2%，其RSD=1.83%（n=5）。

2.8 回收率試驗(yàn)

精密稱取米諾地爾對(duì)照品按米諾地爾搽劑處方制備5份回收樣品。按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定含量，求得平均回收率為99.5%，RSD為1.85%。

2.9 樣品測(cè)定

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄米諾地爾色譜峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。樣品含量應(yīng)為標(biāo)示量的90%～110%。結(jié)果5批樣品中米諾地爾含量分別是95.4%、96.3%、100.8%、102.3%、100.3%。

3 討 論

米諾地爾具有擴(kuò)血管、增加局部血供作用，能刺激毛囊上皮細(xì)胞的增殖與分化，能通過拮抗細(xì)胞內(nèi)鈣離子通道，抑制表皮成長(zhǎng)因子生成；最終促使毛發(fā)生長(zhǎng)[6]。因此，米諾地爾仍是目前治療各種原因引起脫發(fā)的主要手段。因此，嚴(yán)密監(jiān)測(cè)米諾地爾產(chǎn)品的含量對(duì)于患者用藥安全具有重要意義，而隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，米諾地爾的定量方法也可由原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的分光光度法提高為高效液相色譜法。此方法能夠更加嚴(yán)格控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證藥品的安全性、有效性。隨著高效液相色譜儀的普及，此方法亦可作為藥品生產(chǎn)的常規(guī)檢驗(yàn)方法[7]。本次試驗(yàn)結(jié)果證明，檢驗(yàn)用溶劑和輔料成分對(duì)米諾地爾的測(cè)量沒有干擾，表明本法專屬性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可滿足米諾地爾搽劑中米諾地爾的含量測(cè)定的要求。故本法可作為米諾地爾搽劑質(zhì)量控制的有效測(cè)定方法。

[1]許嵐,楊新建.2%米諾地爾搽劑治療斑禿臨床觀察[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志,2009,8(2):104.

[2]陳聲利,孫建方.米諾地爾治療脫發(fā)的藥理與臨床研究[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè),2004,30(5):276-278.

[3]郭燕萍,陳珍鳳,鄭基蒙.復(fù)方米諾地爾溶液中米諾地爾的含量測(cè)定[J].中國(guó)臨床藥學(xué)雜志,2005,14(3):52-53.

[4]莫玉芳,葉延武.紫外分光光度法測(cè)定米諾地爾洗劑中米諾地爾的含量[J].廣東藥學(xué),2004,14(5):18-20.

[5]周敏,顧宜,張三奇,等.氮酮對(duì)人參皂苷Rg1和米諾地爾透皮吸收的影響[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,25(10):958-960.

[6]Han JH,Kwon OS,Chung JH,et al.Effect of minoxidil on proliferation and apoptos is in dermal papilla cells of human hair follicle[J].J Dermatol Sci,2004,34(2):91-98.

[7]康自華,陽(yáng)小成,陳婷.高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用[J].廣東微量元素科學(xué),2006,13(8):18-22.