魯 娜 鄭宗林 王乙力

上個世紀(jì)以來，國內(nèi)對中草藥的應(yīng)用方面進(jìn)行了廣泛研究和深入探討，經(jīng)過廣大科技人員的不懈努力，中草藥產(chǎn)品的研究開發(fā)已取得了一定的進(jìn)展，并在一定范圍內(nèi)對畜禽疾病的控制取得了較好的效果，但還存在許多亟待解決的問題。中草藥藥效慢，有的效果不太理想，劑量往往偏大，一般都在1%～2%，這既與中草藥本身的特性有關(guān)，也與中草藥有效成分含量不高，植物細(xì)胞壁阻礙有效成分的滲出、吸收有很大的關(guān)系。

對中草藥的應(yīng)用不足解決措施有：使用地道藥材，各種草藥合理配伍等措施。關(guān)于這些前人已有不少研究。而利用微生物轉(zhuǎn)化中藥來提高藥效，也是一種很好的思路。中藥發(fā)酵的目的一方面增強中藥的療效、改變藥物原有性能、擴大用藥品種，另一方面還可以充分利用微生物所產(chǎn)生的酶、酸、多糖等保健成分幫助藥物、食物消化吸收，進(jìn)一步促進(jìn)動物恢復(fù)健康，提高生產(chǎn)力。

羊紅膻為傘形科植物缺刻葉茴芹（Pimpinella thellungiana Wolff.）的根或帶根全草，其根中主要含有揮發(fā)油，全草中含有黃酮苷等生物活性物質(zhì)。天青地白是薔薇種植物，根含鞣質(zhì)及黃酮類等生物活性物質(zhì)。選用羊紅膻、天青地白等植物為發(fā)酵基質(zhì)，以雙歧桿菌、乳桿菌等多種菌種聯(lián)合進(jìn)行生物工程發(fā)酵，提取其生物活性成分科學(xué)配伍而成，按不同比例加入生長豬飼料中，以期判斷對生長豬生長性能、養(yǎng)分利用率的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及試驗設(shè)計（見表1）

試驗分為4個處理，每個處理平均的生長豬6頭，設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)2頭，共24頭豬進(jìn)行消化試驗。組1為對照組，組2、3、4為試驗組，分別添加200、400和800 mg/kg的羊紅膻、天青地白等中草藥的發(fā)酵物（見表1）。各處理組的營養(yǎng)水平符合中國2004年版豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。試驗用飼料添加劑羊紅膻、天青地白等中草藥的發(fā)酵產(chǎn)品由四川天添生物科技應(yīng)用有限公司提供，商品名為“天添”。試驗于2009年9月在重慶市養(yǎng)豬科學(xué)研究院實驗場進(jìn)行。

表1 試驗設(shè)計

1.2 試驗日糧

試驗日糧采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧。試驗日糧及營養(yǎng)水平見表2。試驗各處理組營養(yǎng)水平均為等能量、等蛋白。

表2 生長豬飼料配方及營養(yǎng)成分

1.3 消化試驗

試驗豬只置于代謝籠中飼養(yǎng)，預(yù)試期6 d，正式試驗期4 d。先分別飼喂4種日糧，記錄每頭豬每天的自由采食量，然后以自由采食量的80%確定預(yù)試期和正試期的日投料量，每天定時(8:30和17:30)定量給料。在此之前，一次將每頭豬試驗全期所需日糧迅速在同一溫度下，按頓等量分裝于保鮮袋中，并同步測定其干物質(zhì)含量。

1.3.1 糞樣收集與處理

試驗采用全收糞法。正式試驗第1 d早飼后1 h開始收集糞樣，將每頭豬每天的糞樣混合均勻，取1/3加入適量0.01%硫酸固氮，置于65℃的烘箱中烘干，將已烘干的糞樣裝入保鮮袋中，編號放入冰箱。待整個正試期結(jié)束后，將保鮮袋中的干糞分別倒入帶有編號的瓷盤中再烘24 h，然后置室溫回潮24 h，稱重、記錄、粉碎，取樣裝瓶供測定指標(biāo)用。

1.3.2 飼料及糞樣成分分析

正式試驗期結(jié)束后，在實驗室分析飼料樣與糞樣中水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分和總能的含量。

水分：按國標(biāo)GB/6435—86方法測定。

粗蛋白：凱氏定氮法測定；粗脂肪：乙醚萃取法測定；粗纖維：用Ankom 220型纖維分析儀(濾袋法)測定；粗灰分：按國標(biāo) GB/6438—92方法測定；總能：熱量計(氧彈法)測定。

1.3.3 養(yǎng)分表觀消化率計算方法

飼料中攝入養(yǎng)分量和糞中排出養(yǎng)分量的差值與飼料中攝入養(yǎng)分量的比值。

1.4 消化酶活性測定

消化試驗結(jié)束后，從每個組每個重復(fù)中各選試驗豬1頭，共12頭。禁食24 h，自由飲水，稱重后屠宰。剖開腹腔，迅速結(jié)扎各段消化道，然后收集十二指腸內(nèi)容物，以測定各種消化酶的活性。剪取整個胰臟，稱重后取樣，以測定各種消化酶活性。

胰蛋白酶和胰糜蛋白酶活性的測定均參照Erlanger(1961)[1]的方法進(jìn)行。胰淀粉酶活性采用上海滬尚生物科技有限公司的ELISA檢測試劑盒進(jìn)行測定。

十二指腸內(nèi)容物的處理參照Krogdahl(1989)[2]的方法進(jìn)行，酶活測定方法同胰臟中消化酶活性的測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用SPSS10.0軟件中One-way ANOVA程序處理，用Duncan's法比較。

2 試驗結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)分利用率結(jié)果

各組試驗豬的養(yǎng)分消化率見表3。

由表3可知，飼料中補充200～800 mg/kg的中草藥發(fā)酵物（組 2、3、4）之后，飼料中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分的表觀消化利用率均顯著高于對照組（組 1）（P＜0.05），但各中草藥發(fā)酵物添加組之間無顯著差異（P＞0.05）。

組2和組3的飼料干物質(zhì)表觀消化率與組1無顯著差異（P＞0.05），組 2、3、4之間也無顯著差異（P＞0.05），但組 4 顯著高于組 1（P＜0.05）；組 2 的能量表觀消化率與組 1 無顯著差異（P＞0.05），組 2、3、4 之間也無顯著差異（P＞0.05），但組3、4顯著高于組1（P＜0.05）。

2.2 消化酶活性的影響（見表4）

表3 中草藥發(fā)酵物對生長豬養(yǎng)分利用率的影響

表4 中草藥發(fā)酵物對生長豬胰臟和十二指腸消化酶活性的影響

試驗結(jié)果如表4所示。飼料中補充400～800 mg/kg中草藥發(fā)酵物之后，胰臟的胰蛋白酶活性、胰糜蛋白酶活性和淀粉酶活性比對照組均顯著提高（P＜0.05），各中草藥發(fā)酵物添加組之間無顯著差異（P＞0.05）。飼料中補充400～800 mg/kg中草藥發(fā)酵物之后，十二指腸的胰蛋白酶活性和淀粉酶活性比對照組均顯著提高（P＜0.05），但對胰糜蛋白酶無顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

3.1 關(guān)于中草藥（植物）發(fā)酵物添加劑

發(fā)酵是中藥材傳統(tǒng)炮制方法之一。早在千余年前，我國已開始用發(fā)酵的方法制藥，如淡豆豉、沉香曲、五倍子、紅曲等都是發(fā)酵而得到的藥物[3，4]。這些都是利用微生物具有強大的生物轉(zhuǎn)化能力來實現(xiàn)的?，F(xiàn)代發(fā)酵過程研究表明，微生物具有氧化、酯化、甲基化、羥基化、還原化等多種能力，中草藥經(jīng)發(fā)酵后，其有效成分能被充分分離、提取，使其更具有生物活性，并含有大量的活性酶，服用后能被機體組織細(xì)胞迅速吸收，達(dá)到祛病、健體、增強免疫調(diào)節(jié)的功能，更好地發(fā)揮中草藥這一天然藥物的藥效作用。

同時還可以將某些成分分解轉(zhuǎn)化成新的成分，這些新成分成為增強藥理作用或出現(xiàn)新的藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。因此可以利用其進(jìn)行發(fā)酵制藥，從而降低用藥成本，提高功效[5]。

對中草藥發(fā)酵物的科學(xué)研究開始于上世紀(jì)80年代，但僅是對真菌類自身發(fā)酵的研究，如靈芝菌絲體、冬蟲夏草菌絲體、槐耳發(fā)酵等，大都是單一發(fā)酵。雖有報道加入中草藥，但也僅是將中藥當(dāng)做菌絲體發(fā)酵的菌質(zhì)，含有中草藥的菌質(zhì)對原發(fā)酵物的功效有影響，只是未見深入研究[6-7]。目前研究證實生物轉(zhuǎn)化與中草藥發(fā)酵是密不可分的。90年代初，日本人小橋恭一發(fā)現(xiàn)中草藥成分如番瀉葉甙，可借助腸道細(xì)菌轉(zhuǎn)化為致瀉有效成分而起到治療作用。相秀偉等（1996）認(rèn)為，在中藥有效成分與細(xì)菌的生物轉(zhuǎn)化過程中，許多甙類、黃酮類、黃酮醇、黃烷酮類、香豆素類等均經(jīng)過腸道菌進(jìn)行了化學(xué)修飾[8]。在中藥成分生物轉(zhuǎn)化的研究過程中，對代謝物提純、確定結(jié)構(gòu)模式固然需要，但更應(yīng)當(dāng)推出微生物發(fā)酵。中草藥等植物是發(fā)酵的基本物質(zhì)，本試驗所用產(chǎn)品選用羊紅膻、天青地白等植物為發(fā)酵基質(zhì)，以雙歧桿菌、乳桿菌等多種菌種聯(lián)合進(jìn)行生物工程發(fā)酵，提取其生物活性成分科學(xué)配伍而成。

3.2 中草藥發(fā)酵物對飼料養(yǎng)分利用率的影響

本試驗結(jié)果表明，中草藥發(fā)酵物添加組的日糧中干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分以及能量的表觀消化率均比對照組有明顯的提高。很多文獻(xiàn)都證實，中草藥能夠提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化率和利用率，增強新陳代謝，促進(jìn)血液循環(huán)，提高生長速度[9-10]。本研究試驗結(jié)果與上述報道一致，但本試驗的中草藥發(fā)酵物添加量僅為多數(shù)報道的中草藥（未發(fā)酵）添加量的1/5～1/10。

生長豬主要采食以植物性飼料為主的配合飼料，植物性飼料的細(xì)胞壁均由抗?fàn)I養(yǎng)因子非淀粉多糖(NSP)構(gòu)成。這些NSP不僅阻礙了動物消化道中內(nèi)源酶與植物性飼料中細(xì)胞內(nèi)容物的充分接觸和混合，而且其本身也不易被動物消化吸收。一部分水溶性非淀粉多糖如阿拉伯木聚糖和β-葡聚糖，在動物腸道中形成粘性膠狀物質(zhì)使食糜粘度增加，從而降低了養(yǎng)分與內(nèi)源酶的相互作用，養(yǎng)分的消化速度減慢，導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)的消化率降低和吸收率下降，非淀粉多糖還會抑制腸道酶活。本試驗中草藥發(fā)酵物的添加，可能改變了小腸中食糜的理化成分，一定程度上減弱了抗?fàn)I養(yǎng)因子的作用，減少了絨毛上的粘著物，使日糧中養(yǎng)分的消化吸收效率提高。后續(xù)的試驗研究也表明，中草藥發(fā)酵物的添加可顯著提高生長豬腸道蛋白酶、脂肪酶和部分糖代謝酶及纖維素酶的活性（另文報道）。除消化酶的作用外，腸道中的微生物菌群也是影響?zhàn)B分消化利用率的一個重要因素，是否中草藥發(fā)酵物對腸道菌群也有較大的影響，尚需進(jìn)一步的研究探索。

3.3 中草藥發(fā)酵物對仔豬消化酶的影響

本次試驗中觀察到生長豬飼喂添加中草藥發(fā)酵物的日糧后可使胰臟和十二指腸胰糜蛋白酶、胰蛋白酶和淀粉酶活性均有明顯提高，可能的原因是本試驗使用的是中草藥發(fā)酵產(chǎn)品，不是簡單的中草藥的混合物，也不是活菌制劑，而是以精心組合的中草藥復(fù)方經(jīng)過生物工程發(fā)酵之后，提取其更多的活性成分之后的二次組合配伍。這種發(fā)酵物可能是通過刺激腸道等臟器的健康發(fā)育，增加消化酶液的分泌。

4 小結(jié)

綜上可知，飼料中補充200～400 g/t的中草藥發(fā)酵物可有效改善生長豬的飼料養(yǎng)分利用率；補充400～800 g/t的中草藥發(fā)酵物可顯著提高胰臟和十二指腸消化酶活性。因此，400 g/t為中草藥發(fā)酵物在生長豬最合適的添加量，生長實踐中考慮到經(jīng)濟效益因素，建議添加200～400 g/t為宜。

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