張海亮 張芹 李建文 劉紅 趙磊 張偉

顆粒飼料加工過程中，調(diào)質(zhì)、制粒及冷卻前期物料的溫度常處在80～90℃，水分含量為15%左右，在這樣條件下，酶制劑的活性會(huì)有一定的降低。如木聚糖酶在75～95℃時(shí)，其活性會(huì)降低15%～30%；β-葡聚糖酶65℃條件下保存時(shí)，酶活力迅速下降，4 h后僅剩余11.2%；大多數(shù)纖維素酶在70～80℃時(shí)，15～60 min失活。因此，雖然在飼料加工過程維持這種高溫狀態(tài)的時(shí)間較短，但是酶制劑的活性降低是不可避免。但從理論上來看，調(diào)質(zhì)、制粒及冷卻過程的溫度條件也處于飼料中常用的NSP酶制劑產(chǎn)生催化降解的范圍。如大多數(shù)纖維素酶一般最適溫度為40～65℃；β-葡聚糖酶反應(yīng)最適溫度為35～37℃；65.4℃為纖維素酶降解纖維素的最佳溫度。即制粒過程既可能導(dǎo)致NSP酶被滅活，同時(shí)也滿足其產(chǎn)生催化的條件。本研究擬通過對制粒過程中加有復(fù)合非淀粉多糖酶小麥型飼料纖維、半纖維以及還原糖的測定，研究含復(fù)合非淀粉多糖酶飼料在加工時(shí)催化降解作用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及方法

1.1.1 試驗(yàn)飼料配方

小麥65%、豆粕24%、菜粕5%、石粉1%、磷酸氫鈣1.7%、鹽0.3%、油2%、預(yù)混料1%。

小麥飼糧專用復(fù)合酶，酶譜組成為：木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-甘露聚糖酶、纖維素酶。酶制劑來源：武漢新華揚(yáng)生物股份有限公司。

1.1.2 檢測儀器及藥品

堿滴定管（50 ml）、吸量管（1 ml和 2 ml）、容量瓶（100 ml）、燒杯、量筒（10 ml、100 ml）、電熱恒溫水浴鍋、722分光光度計(jì)；分析天平（1/10000）、冷凝器或冷凝裝置2套、抽濾瓶、布氏漏斗高腳燒杯、古式坩堝、滴管、洗瓶、真空泵、調(diào)溫電熱板、烘箱、馬福爐等。

DNS試劑、0.1%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液、85%乙醇；中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）、酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）、1.00 mol/l硫酸、酸性石棉、無水亞硫酸鈉、丙酮、十氫化萘（或正辛醇）。

1.1.3 飼料加工設(shè)備

武漢工業(yè)學(xué)院湖北省飼料工程技術(shù)研究中心100 kg/h顆粒飼料加工機(jī)組，包括爪式粉碎機(jī)、不銹鋼混合機(jī)、18型實(shí)驗(yàn)用制粒機(jī)及配套設(shè)備。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組及步驟

試驗(yàn)設(shè)置了試驗(yàn)組和對照組。對照組物料是按試驗(yàn)飼料配方配制的飼料，試驗(yàn)組是在試驗(yàn)飼料配方的基礎(chǔ)上，按0.02%比例添加小麥飼糧專用復(fù)合酶。

試驗(yàn)組和對照組飼料在相同的條件下，進(jìn)行加工，在各取樣點(diǎn)取樣后，對相關(guān)測定指標(biāo)進(jìn)行測定。每組飼料重復(fù)三次試驗(yàn)。

1.2.2 飼料加工條件

環(huán)境室溫24℃、相對濕度49%原料的粉碎采用孔徑Φ1.0 mm的粉碎機(jī)，原料混合時(shí)間為5 min。蒸汽壓強(qiáng)0.46 MPa，調(diào)質(zhì)后物料溫度：75℃左右。

1.2.3 取樣

分別在調(diào)質(zhì)前、調(diào)質(zhì)器出料口、制粒機(jī)出料口和冷卻20 min后采集樣品。

1.2.4 纖維測定

中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、纖維素的測定及半纖維素的計(jì)算均采用范氏（Van Soest）測定法測定。

1.2.5 還原糖的測定

還原糖的測定采用比色法。即將試樣的水溶濾液與DNS進(jìn)行反應(yīng)，利用分光光度計(jì)測定其光吸收值，并將其與葡萄糖溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對照，查得其還原糖含量。

由于樣品在測定過程中，需經(jīng)過50℃加熱處理，非淀粉多糖酶可產(chǎn)生降解作用，從而嚴(yán)重影響測定結(jié)果。因此，測定前，樣品經(jīng)115℃干熱處理60 min，以消除影響。

為了使測定結(jié)果有橫向可比性，本文所列各指標(biāo)測定值（計(jì)算值）均按干基計(jì)算。

2 結(jié)果與討論

2.1 還原糖

測定結(jié)果如表1所示。

表1 制粒過程中，飼料中還原糖含量測定結(jié)果（%）

試驗(yàn)結(jié)果表明：不添加非淀粉多糖酶時(shí)，制粒過程中，飼料中還原糖含量無顯著變化；添加酶制劑飼料在調(diào)質(zhì)和制粒過程中，還原糖含量均有極顯著差異，冷卻前后還原糖含量無顯著變化。經(jīng)制粒加工，加酶飼料中還原糖含量增加17.76%(P＜0.01)。

2.2 中性洗滌纖維素、酸性洗滌纖維、半纖維素及纖維素

測定值見表2、表3，根據(jù)測定結(jié)果計(jì)算出的半纖維素、纖維素含量見表4、表5。

表2 制粒過程中，飼料中中性洗滌纖維含量測定結(jié)果（%）

表3 制粒過程中，飼料中酸性洗滌纖維含量測定結(jié)果（%）

表4 制粒過程中，飼料中半纖維素含量計(jì)算結(jié)果（%）

表5 制粒過程中，飼料中纖維素含量測定結(jié)果（%）

試驗(yàn)結(jié)果表明：制粒過程中，對照組飼料中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維以及半纖維素含量無顯著變化；試驗(yàn)組在制粒過程中，中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維均有極顯著降低（P＜0.01）；半纖維素含量在調(diào)質(zhì)及制粒過程中有極顯著降低（P＜0.01），但冷卻過程中沒有顯著變化。試驗(yàn)組中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維及半纖維素含量經(jīng)制粒加工后分別降低4.03、2.61和1.41個(gè)百分點(diǎn)，降低率分別為：23.70%、29.33%和17.43%。各取樣點(diǎn)中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維及半纖維素含量，試驗(yàn)組與對照組相比，除混合后無顯著差異外，均有極顯著減少（P＜0.01）。制粒加工過程中，對照組纖維素含量無明顯變化，而試驗(yàn)組經(jīng)冷卻后，纖維素的含量相對于加工前下降了0.44個(gè)百分點(diǎn)（P＜0.05），降低率為 26.35%。

3 結(jié)論

試驗(yàn)表明，添加非淀粉多糖酶飼料在制粒過程中，還原糖含量增加17.76%(P＜0.01)。中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維及半纖維素含量分別降低4.03、2.61和1.41個(gè)百分點(diǎn)，降低率分別為23.70%、29.33%和17.43%；纖維素含量降低了0.44個(gè)百分點(diǎn)，降低率為26.35%。非淀粉多糖酶在飼料制粒加工過程中產(chǎn)生了催化降解的作用。

[1]王成章，王恬.飼料學(xué)[M].中國農(nóng)業(yè)出版社，2003（6）：24-25.

[2]賀建華.飼料分析與檢測[M].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2005（3）：20-92.

[3]楊鳳.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)[M].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000（12）：74.

[4]徐學(xué)萬，張芳.纖維素酶的特性及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J].糧食與食品工業(yè),2001（4）：14-17.

[5]錢發(fā)鐘，王新華.飼料纖維素酶的研究進(jìn)展[J].中國微生物學(xué)雜志，2002，5（14）：308-310.

[6]譚權(quán)，張克英，丁雪梅.木聚糖酶對不同能量飼料的體外酶解效果研究[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2007，19(5)：593-599.