于麗莉 王艾琳 李堅(jiān)

葡萄球菌是醫(yī)院感染的重要病原菌之一,其中以耐甲氧西林葡萄球菌尤為嚴(yán)重。隨著抗菌藥物種類的不斷增加及臨床的廣泛使用,耐甲氧西林葡萄球菌的感染日漸增多,常常導(dǎo)致治療失敗、感染復(fù)發(fā)、延長(zhǎng)住院日、增加昂貴抗生素的使用等。為了解九臺(tái)市部分醫(yī)院的葡萄球菌感染及耐藥狀況,我們收集了從九臺(tái)市人民醫(yī)院及九臺(tái)市中醫(yī)院臨床各類標(biāo)本中分離的 158株葡萄球菌,對(duì)其耐藥性進(jìn)行了分析。

1 材料和方法

1.1 菌株來源 收集 2008年 6月至 2010年 5月間九臺(tái)市人民醫(yī)院臨床各類標(biāo)本 158株,其中呼吸道標(biāo)本 55株、尿 34株、分泌物 30株、糞便 9株、血液 12株、其他標(biāo)本 18株。

標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌 ATCC25923和大腸埃希菌 ATCC25922,苯唑西林敏感對(duì)照菌為金黃色葡萄球菌ATCC29213,苯唑西林耐藥對(duì)照菌株為金黃色葡萄球菌ATCC38591[1],均購自國(guó)家衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2 抗菌藥物 苯唑西林等16種抗生素紙片均購自浙江軍區(qū)后勤部衛(wèi)生防疫檢驗(yàn)所。

1.3 培養(yǎng)基 MH瓊脂培養(yǎng)基購于中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4 β-內(nèi)酰胺酶測(cè)定紙片 由大連輝瑞制藥有限公司提供。

1.5 方法

1.5.1 按常規(guī)方法培養(yǎng)分離和鑒定葡萄球菌,并做血漿凝固酶試驗(yàn)。

1.5.2 藥敏實(shí)驗(yàn) K-B法,按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLs)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.5.3 MRSA檢測(cè)[2]將藥敏試驗(yàn)中耐苯唑西林(1μg/m l,≤10為耐藥,≥13為敏感)的菌株做適度稀釋,調(diào)整菌量為0.5麥?zhǔn)蠁挝?接種于含 6μg/m l苯唑西林,4%NaCl的 MH培養(yǎng)基上,經(jīng) 35℃培養(yǎng) 24 h,生長(zhǎng)者為 MRSA。

1.5.4 β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)[3]按β-內(nèi)酰胺酶測(cè)定紙片的說明對(duì)凝固酶陽性的葡萄球菌進(jìn)行操作和結(jié)果判定。

2 結(jié)果

2.1 凝固酶試驗(yàn)及耐藥性檢測(cè)結(jié)果見表1。

158株葡萄球菌中,金黃色葡萄球菌 87株,凝固酶陰性葡萄球菌 71株。MRS 106株,檢出率為 67.1%,其中 MRSA為 38.0%,MRSCoN為 29.1%,。

表1 凝固酶試驗(yàn)及MRS檢測(cè)結(jié)果

2.2 158株葡萄球菌對(duì) 16種抗菌藥的抗菌譜見表 2。

表2 158株葡萄球菌對(duì) 16種抗菌藥的耐藥率(%)

萬古霉素對(duì) 106株耐藥葡萄球菌有良好的抗菌活性,僅有 10.0%的 MRSA和 13.0%的 MRSCON對(duì)泰能耐藥,MRSA、MRSCON對(duì)頭孢菌素類、氟喹諾酮類抗菌藥物的耐藥性明顯增加,大多數(shù)抗菌藥物尤其是頭孢菌素類對(duì) MSSA作用較好,而MSSA對(duì)紅霉素、青霉素、克林霉素的耐藥率分別為59.3%、92.6%、55.6%。葡萄球菌對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥性在70.4%～93.5%。詳見表 2。

2.3 β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果 受試菌產(chǎn)酶株占 80.4%,其中MRSA產(chǎn)酶株占 85.7%,MSSA產(chǎn)酶株占 75.4%,二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 討論

3.1 158株葡萄球菌中,MRS葡萄球菌的檢出率高達(dá)67.1%,其中 MRSA的平均耐藥率為 69.0%,顯著高于MSSA 31.0%的耐藥率,并且呈現(xiàn)多重耐藥性;對(duì) β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、磺胺類抗菌藥及克林霉素等高度耐藥。MRSCON的耐藥率為 64.8%也明顯高于 MSSCON的耐藥率 35.2%,說明MRS葡萄球菌在我市部分醫(yī)院臨床標(biāo)本中已成為重要的耐藥菌株。

3.2 目前 MRSA的臨床分離國(guó)內(nèi)報(bào)道不盡相同[3],本資料MRSA占金葡菌比率為 69.0%,檢出率低于北京、上海等地,MRSA對(duì)抗菌藥物的耐藥率普遍略低于上述地區(qū),可能與地區(qū)差異、抗生素選擇性壓力有關(guān)。

3.3 MRS對(duì) β-內(nèi)酰胺類抗菌藥耐藥性可能是由于 3種不同機(jī)制引起:1MRS產(chǎn)生一種新的青霉素結(jié)合蛋白(PBP-2′);2失活酶尤其是 β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生;3細(xì)胞壁通透性降低。MRS對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類及克林霉素的耐藥性可能是由于 MRS的核糖體 23SrRNA被甲基化所致[3]。MRS對(duì)喹諾酮類和復(fù)方新諾明的耐藥機(jī)制目前還不清楚。本文報(bào)道凝固酶陽性葡萄球菌產(chǎn)酶率為 80.70%。而MRSA與 MSSA產(chǎn)酶率差別不顯著,其耐藥與產(chǎn)酶量、種類可能有關(guān)。

3.4 本資料顯示,158株葡萄球菌對(duì)紅霉素、復(fù)方新諾明呈高度耐藥,因此,臨床醫(yī)生在治療葡萄球菌感染的病例時(shí),應(yīng)盡量根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)選擇敏感藥物進(jìn)行治療。值得注意的是,體外藥敏實(shí)驗(yàn)時(shí),雖然 MRS對(duì)泰能等 β-內(nèi)酰胺抗菌藥表現(xiàn)出敏感結(jié)果,但用藥無效,應(yīng)向臨床解釋。因?yàn)橐阎?MRS感染的絕大多數(shù)病例對(duì)該抗菌藥治療反應(yīng)很差,而且尚缺乏令人信服的臨床數(shù)據(jù)來證實(shí)這些藥物的臨床效力。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,臨床上耐藥菌的感染日益嚴(yán)重,正確及時(shí)地檢出MRS并協(xié)助臨床制定抗感染方案,避免濫用抗菌藥是控制MRS進(jìn)一步流行的關(guān)鍵。醫(yī)院內(nèi) MRS感染的發(fā)生與原發(fā)疾病輕重、免疫功能、長(zhǎng)期廣譜抗菌藥物應(yīng)用等多種因素有關(guān),MRS定植或感染者常為感染源,醫(yī)護(hù)人員、醫(yī)療機(jī)械常為其傳播媒介,對(duì)MRS感染,除了強(qiáng)調(diào)根據(jù)藥敏試驗(yàn)合理選藥外,也應(yīng)依據(jù)感染部位、免疫狀況、合并癥加強(qiáng)綜合治療,還應(yīng)重視清除定植,切斷傳播,最大可能降低感染危險(xiǎn)。

[1］李雅卿,黃衛(wèi)紅.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染臨床分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2002,12(2):151.

[2］宋世平,解曉珍,席道友,等.158株金黃色葡萄球菌的耐藥性監(jiān)測(cè)與分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2003,13(4):384-385.

[3］黃加權(quán),李小丹,楊慧,等.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性研究.同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2000,29(3):264-267.