李 穎

（安徽省中醫(yī)院，安徽 合肥 230031）

非索偽麻緩釋片是鹽酸非索非那定與鹽酸偽麻黃堿的復(fù)方制劑。鹽酸非索非那定是組胺H1受體拮抗劑，屬無(wú)鎮(zhèn)靜作用的抗組胺藥物，用于季節(jié)性過(guò)敏性鼻炎及慢性特發(fā)性蕁麻疹，具有很好的臨床治療效果[1-2]。鹽酸偽麻黃堿具有選擇性收縮血管作用，可收縮鼻腔、鼻竇及上呼吸道黏膜血管，消除組織水腫和充血，使呼吸道暢通。二者合用，可有效治療慢性特發(fā)性蕁麻疹和季節(jié)性過(guò)敏性鼻炎。兩者的復(fù)方緩釋制劑國(guó)外已上市，筆者參考了相關(guān)文獻(xiàn)[3]，建立了反相離子對(duì)高效液相色譜法，用于同時(shí)測(cè)定鹽酸非索非那定和鹽酸偽麻黃堿含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Shimadzu LC-10AT高效液相色譜儀（日本島津），Shimadzu SPD-10AVP檢測(cè)器（日本島津）。非索偽麻緩釋片（研制時(shí)自制）；非索非那定對(duì)照品（批號(hào)為100852-200601）、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)為171237-200304）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Shim-pack VP-ODS 柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀-十二烷基硫酸鈉（70∶30∶0.03，用磷酸調(diào) pH 至 3.0）；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：20 μL；靈敏度：0.100 0 AUFS。在此色譜條件下，各組分的分離效果良好，分離度大于10.0，理論塔板數(shù)以鹽酸偽麻黃堿計(jì)不低于3 000，色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取鹽酸非索非那定對(duì)照品30.0 mg，鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品60.0 mg，置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。精密稱取樣品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸偽麻黃堿120 mg、鹽酸非索非那定60 mg），置乳缽中，加流動(dòng)相適量，研磨，并用流動(dòng)相分次轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中，超聲處理使鹽酸偽麻黃堿與鹽酸非索非那定溶解，放冷至室溫，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：分別精密量取對(duì)照品貯備液0.1，0.2，0.5，1.0，2.0 mL置10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得系列質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，精密量取20 μL，進(jìn)樣測(cè)定。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得非索非那定的回歸方程Y=55 942.78 X+86 409.14，r=0.999 9（ n=5）；鹽酸偽麻黃堿的線性方程 Y=34 848.78 X+187 045.70，r=0.999 9（n=5）。結(jié)果表明，鹽酸非索非那定和鹽酸偽麻黃堿質(zhì)量濃度分別在6.01～120.20 mg/L和12.08～241.68 mg/L內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果鹽酸非索非那定和鹽酸偽麻黃堿峰面積的 RSD分別為0.76%和0.52%（n=6）。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于 0，2，4，6，8 h 時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果鹽酸非索非那定和鹽酸偽麻黃堿的 RSD分別為0.89%和0.82%（n=5），表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一批樣品，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法配制供試品溶液，依法測(cè)定含量。結(jié)果非索非那定的平均標(biāo)示含量為99.77%，RSD為0.50%（n=6）；鹽酸偽麻黃堿的平均標(biāo)示含量為99.99%，RSD 為 0.38%（n=6）。

加樣回收試驗(yàn)：按照模擬處方比例分別精密加入對(duì)照品及輔料適量，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法制成低、中、高濃度各3份共9份的溶液，取樣測(cè)定含量并計(jì)算回收率[4]。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.4 樣品含量測(cè)定

取供試品溶液20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取經(jīng)105℃干燥至恒重的鹽酸偽麻黃堿與鹽酸非索非那定對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法用峰面積計(jì)算供試品中鹽酸非索非那定與鹽酸偽麻黃堿的標(biāo)示百分含量。結(jié)果批號(hào)為20060224，20060325，20060417的3批樣品中，鹽酸非索非那定的標(biāo)示百分含量分別為100.34%，99.75%，100.32%，鹽酸偽麻黃堿的標(biāo)示百分含量分別為99.93%，99.77%，98.81%。

3 討論

曾取非索非那定對(duì)照品與鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品適量，分別用流動(dòng)相溶解，并制成每1 mL分別含非索非那定30 μg和鹽酸偽麻黃堿15 μg的溶液，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定吸收光譜。結(jié)果顯示鹽酸偽麻黃堿紫外吸收較弱，僅在210 nm波長(zhǎng)附近有最大吸收，而非索非那定的最大吸收波長(zhǎng)在220 nm附近。為了能同時(shí)檢測(cè)非索非那定與鹽酸偽麻黃堿，故選用210 nm作為本品的檢測(cè)波長(zhǎng)。

考察0.05 mol/L磷酸二氫鉀-甲醇（30∶70）作為流動(dòng)相時(shí)，對(duì)比了加與不加離子對(duì)試劑十二烷基硫酸鈉對(duì)色譜分離的影響，以選擇最佳流動(dòng)相條件。結(jié)果顯示不加離子對(duì)試劑，非索非那定的出峰時(shí)間和溶劑峰接近，且兩者不能有效分離，影響準(zhǔn)確定量；加入十二烷基硫酸鈉，則可增加非索非那定的保留性，使樣品不至于過(guò)快洗脫，與溶劑峰達(dá)到有效分離。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，反相離子對(duì)高效液相色譜法可以同時(shí)測(cè)定非索偽麻緩釋片中鹽酸非索非那定和鹽酸偽麻黃堿的含量，且快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確。

[1]Bunnag C，Jareoncharsri P，Tunsuriyawong P，et al.A non-comparative trial of the efficacy and safety of fexofenadine for treatment of perennial allergic rhinitis[J].Asian Pac J Allergy Immunol，2000，18（3）：127-133.

[2]Nelson HS，Reynolds R，Mason J.Fexofenadine HCl is safe and effective for treatment of chronic idiopathic urticaris[J].Ann Allergy Astma Immunol，2000，84（5）：517-522.

[3]王 琳，張?zhí)旌?，江榮高.HPLC法同時(shí)測(cè)定非索偽麻緩釋雙層片中鹽酸非索非那定與鹽酸偽麻黃堿的含量[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，20（4）：266-271.

[4]Maggio RM，Castellano PM，Vignaduzzo SE，et al.Alternative and improved method for the simultaneous determination of fexofenadine and pseudoephedrine in their combined tablet formulation[J].J Pharm Biomed Anal，2007，45（5）:804-810.