顏 紅， 夏新華， 羅 堃， 雷志丹

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410208）

舒胸片系《中國(guó)藥典》2005版一部收載的復(fù)方中藥制劑［1］，由三七、川芎、紅花三味中藥制備而成。三七含皂苷類(lèi)成分（人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1），川芎含生物堿類(lèi)成分（川芎嗪）與有機(jī)酸類(lèi)成分（阿魏酸），紅花含黃酮類(lèi)成分（羥基紅花黃色素A）。為便于應(yīng)用大孔樹(shù)脂對(duì)該制劑混合提取液進(jìn)行精制，本文對(duì)舒胸片混合提取液中上述6 種有效成分在 LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100 五種大孔樹(shù)脂上的靜態(tài)吸附性能進(jìn)行了研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津高效液相色譜儀;SPD－10A vp型紫外檢測(cè)器;LC－10AT vp色譜泵;N3000色譜工作站;島津AY120型托盤(pán)電子分析天平;98－1－B型電熱恒溫套（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2 試藥 人參皂苷 Rg1（批號(hào)110703－200322，供含量測(cè)定用）、人參皂苷Rb1（批號(hào)110704－200318，供含量測(cè)定用）、三七皂苷 R1（批號(hào) 110745－200312）、川芎嗪（批號(hào) 110817－200305，供含量測(cè)定用）、阿魏酸（批號(hào) 07733－9910，供含量測(cè)定用）、羥基紅花黃色素A對(duì)照品（批號(hào)111637－200502，供含量測(cè)定用），均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純（Caledon Laboratories LTD.），水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。三七、川芎、紅花藥材由湖南三湘中藥飲片有限公司提供。

LSA－7、LSA－10、LSA－30 型大孔吸附樹(shù)脂，由西安藍(lán)深交換吸附材料有限責(zé)任公司提供;D101A大孔吸附樹(shù)脂由天津市骨膠廠(chǎng)提供;HPD－100型大孔吸附樹(shù)脂由滄州寶恩化工有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 舒胸片提取液的制備 按《藥典》舒胸片處方各藥味比例，取三七細(xì)粉，加50%乙醇浸泡2.5 h，回流提取2次，加醇量分別為藥材的8倍、6倍量，提取時(shí)間分別為2.5 h、2.0 h，收集醇提液，回收乙醇，備用;取川芎，加10倍量水煎煮2 h，濾過(guò)，濾液另存，藥渣與紅花加8倍量水煎煮2次，每次1 h，合并煎液，60℃減壓濃縮至每1 mL含1 g生藥，在攪拌下緩緩加入乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置24 h，濾過(guò)，濾液回收乙醇，與上述醇提濃縮液合并，60℃減壓濃縮至適當(dāng)濃度（0.3 g生藥/mL），濾過(guò)，即得。

2.2 不同樹(shù)脂的靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn) 稱(chēng)取LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五種預(yù)處理好的大孔吸附樹(shù)脂各2 g（濕重），置于具塞三角錐形瓶中，分別加入濃度為0.3 g生藥/mL的舒胸片提取液（pH為4.0）50 mL，密封置于25℃恒溫水浴中并定時(shí)振搖，24 h后精密吸取上清液各2 mL，分別用HPLC法測(cè)定三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷Rb1、川芎嗪、阿魏酸及羥基紅花黃色素A的含量，同時(shí)測(cè)定原液（未經(jīng)吸附的舒胸片提取液）中上述各有效成分的含量，并按下式計(jì)算各有效成分在大孔樹(shù)脂上的比吸附量（A）與相對(duì)比吸附量（RA）。結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

式中:A為比吸附量（absorbtion ratio，mg/g），即單位質(zhì)量干樹(shù)脂吸附某成分的量;M1為起始濃度（mg/mL）;M2為剩余濃度（mg/mL）;V為溶液體積（mL）;W為干樹(shù)脂重量（g），可根據(jù)樹(shù)脂的含水量由濕樹(shù)脂重量折算得到。

采用Excel中的數(shù)據(jù)分析工具對(duì)表2中的數(shù)據(jù)進(jìn)行雙因素?zé)o重復(fù)的方差分析（ANOVA），結(jié)果見(jiàn)表3。

采用Tukey法［2］對(duì)6種有效成分的RA進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)（即兩兩比較），若顯著性水平（α）定為5%，對(duì)于6種有效成分，誤差自由度為20（見(jiàn)表3），查Q界值表［2］可知Q值為4.45，則:

表1 6種有效成分在5種樹(shù)脂上的比吸附量

表2 6種有效成分在5種樹(shù)脂上的相對(duì)比吸附量

表3 雙因素?zé)o重復(fù)的方差分析

式中:s2為上述方差分析中誤差的均方（MS），n為樣本容量。任意二種有效成分RA平均值之差若大于0.15，則兩者之間存在顯著性。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 6種有效成分RA的兩兩比較結(jié)果（Tukey法）

3 小結(jié)與討論

3.1 根據(jù)表1可知，復(fù)方提取液中不同組分在大孔樹(shù)脂上的比吸附量存在較大的差異，它與各組分在藥液中的初始濃度關(guān)系密切，如人參皂苷Rg與人參皂苷Rb在藥液中的初始濃度比三七皂苷R1大得多，其比吸附量也高得多。而同一組分在不同類(lèi)型大孔樹(shù)脂上的比吸附量，亦有不同程度的差異，可能與成分、樹(shù)脂的性質(zhì)有關(guān)，如水溶性強(qiáng)的羥基紅花黃色素A在極性樹(shù)脂LSA－7上具有相對(duì)高的比吸附量，而極性較低的川芎嗪在非極性樹(shù)脂（LSA－30、HPD－100、D101A）上有相對(duì)高的比吸附量。

3.2 對(duì)于復(fù)方提取液，由于不同組分在大孔樹(shù)脂上的比吸附量受初始濃度影響較大，故根據(jù)比吸附量難以直觀(guān)地評(píng)價(jià)大孔樹(shù)脂對(duì)不同性質(zhì)組分的吸附性能。為此，本文提出了相對(duì)比吸附量（RA，relative absorbtion ratio，g－1）的概念，即某組分的比吸附量相對(duì)于初始藥液中該成分總量的比率，它可在一定程度上消除復(fù)方提取液中各組分由于初始濃度不同而引起的比吸附量差異，從而對(duì)不同組分在樹(shù)脂上吸附能力的大小作出較為合理的評(píng)價(jià)。一般地對(duì)于一定濃度的復(fù)方提取液，若在同一樹(shù)脂上各組分的RA值相近，則可認(rèn)為它們彼此在該樹(shù)脂上的吸附性能接近，并有可能在相同的吸附工藝條件下使各成分同時(shí)達(dá)到較好吸附分離。反之，對(duì)于RA值相差太大的各組分，則難以在相同的條件下同時(shí)使它們獲得較滿(mǎn)意的吸附分離。由表2中不同組分的RA值可知，本實(shí)驗(yàn)所考察的舒胸片6種有效成分在LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五種樹(shù)脂上的吸附能力的大小依次為:人參皂苷Rb1、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、川芎嗪、阿魏酸＞羥基紅花黃色素A。對(duì)表2進(jìn)行雙因素?zé)o重復(fù)的方差分析（見(jiàn)表3）表明，5種樹(shù)脂的RA之間未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05），而6種有效成分的RA之間存在顯著性差異（P＜0.05）。進(jìn)一步采用Tukey法對(duì)6種有效成分的RA進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)，表明人參皂苷Rb1、羥基紅花黃色素A的RA與其它各成分均有顯著性，而三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、川芎嗪、阿魏酸4種成分RA之間差異不顯著（見(jiàn)表4）。

3.3 上述實(shí)驗(yàn)研究表明，舒胸片提取液中不同組分在大孔樹(shù)脂上的吸附能力，有些相近，有些則差異很大。因此，在采用大孔樹(shù)脂精制中藥復(fù)方提取液時(shí)，要注意復(fù)方中不同有效成分在樹(shù)脂上吸附性能的差異。若差異大，則應(yīng)特別注意相對(duì)比吸附量（RA）小的組分在上柱吸附過(guò)程中是否容易產(chǎn)生泄漏而損失。

［1］中國(guó)藥典［S］.一部.2005:636.

［2］徐秉玖編.藥物統(tǒng)計(jì)學(xué)［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)出版社，1999:128－129.