劉 元， 李星宇， 宋志釗， 文志云， 韋煥英

（廣西中醫(yī)藥研究院，廣西南寧 530022）

復(fù)方石淋通片是中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布標(biāo)準(zhǔn)中成藥制劑十二冊(cè)收載品種［1］。主要由廣金錢草、石韋、海金沙、滑石粉、忍冬藤等中藥組成，具有清熱利濕、通淋排石之功效，臨床用于膀胱濕熱、石淋澀痛、尿路結(jié)石、泌尿系統(tǒng)感染屬肝膽膀胱濕熱者療效顯著。其制劑中含量測(cè)定的研究已有報(bào)道［2，3］，但未見(jiàn)其藥理作用方面的報(bào)道。根據(jù)其作用特點(diǎn)，我們從排石、利尿、抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛等方面。觀察復(fù)方石淋通片的活性作用，為臨床用于治療尿路結(jié)石、泌尿系統(tǒng)感染提供藥效學(xué)資料。

1 材料

1.1 動(dòng)物 昆明小鼠，普通級(jí)，合格證號(hào):桂醫(yī)動(dòng)字第11004號(hào);Wistar大鼠，普通級(jí)，合格證號(hào):桂醫(yī)動(dòng)字第11005號(hào);均由廣西中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 菌株 臨床分離株:金葡球菌（000415－1）、金葡球菌（000415－2）、金葡球菌（000415－3）、表皮葡萄球菌（000406－1）、表皮葡萄球菌（000406－2）、表皮葡萄球菌（000406－3）、綠膿桿 菌 （000411－1）、綠 膿 桿 菌 （000411－2）、大 腸 桿 菌（000407－1）、大腸桿菌（000407－2）、大腸桿菌（000407－3）、變形桿 菌 （000329－1）、變 形 桿 菌 （000329－2）、變 形 桿 菌（000329－3）均由廣西區(qū)人民醫(yī)院細(xì)菌室分離并提供。

1.3 復(fù)方石淋通片稠膏，每1 g膏含生藥13.9 g，批號(hào):00006，由廣西濟(jì)民制藥廠提供。五淋化石丹，批號(hào):990110，由廣西梧州市人民制藥廠生產(chǎn)。氫氯噻嗪片，25 mg/片，批號(hào):990622，由上海信誼藥廠生產(chǎn)。醋酸地塞米松片，批號(hào):981201－甲，由上海信誼制藥廠生產(chǎn)。羅通定片，批號(hào):990627，由廣西南寧制藥集團(tuán)公司生產(chǎn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 復(fù)方石淋通片的體外抑菌作用［4］采用平皿二倍稀釋法，將已稀釋好的實(shí)驗(yàn)藥物分布加入冷卻至55℃左右的滅菌培養(yǎng)基中，混勻，制成不同濃度的藥物平板。取金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等實(shí)驗(yàn)菌懸液（菌液濃度105CFU/mL），分別劃種于不同濃度的含藥平板，37℃培養(yǎng)18 h，觀察記錄最小抑菌濃度（MIC）。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 復(fù)方石淋通片的體外抑菌作用

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片對(duì)金葡球菌、表皮葡萄球菌、變形桿菌等所試菌株有不同程度的抑菌作用。

2.2 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠腎結(jié)石的影響［2］選取體重190～240 g♂性大鼠89只，隨機(jī)分為5組，每組17～18只。給藥劑量見(jiàn)表2。每天灌胃1次，連續(xù)30 d。在此期間，除空白對(duì)照組外，其余4個(gè)組喂加有2%乙二醇、1%氯化銨的基礎(chǔ)飼料（每100 g飼料中加入乙二醇2 g。氯化銨1 g），并于每周肌肉注射維生素D3一次，3萬(wàn)單位/kg，造成腎結(jié)石模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死動(dòng)物，剖腹觀察雙腎外形，取出雙腎，縱向剖開(kāi)，用解剖鏡觀察腎剖面有無(wú)明顯結(jié)晶沉淀物及游離結(jié)石或鈣化斑作為判斷結(jié)石的標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)結(jié)石形成的多少及腎臟損傷程度分為5級(jí)，Ⅰ級(jí):腎皮質(zhì)、髓質(zhì)及腎乳頭均為無(wú)可見(jiàn)的結(jié)石和結(jié)晶沉淀物，腎臟外形無(wú)異常變化，記0分;Ⅱ級(jí):腎皮質(zhì)或髓質(zhì)可見(jiàn)少量散在結(jié)晶沉淀物，記1分;Ⅲ級(jí):腎皮質(zhì)、髓質(zhì)及腎盂可見(jiàn)結(jié)晶沉淀物或有小的游離結(jié)晶，記2分;Ⅳ級(jí):腎剖面可見(jiàn)較多結(jié)晶，并有游離結(jié)石形成，腎乳頭可見(jiàn)鈣化斑，腎盂擴(kuò)張積水，記3分;Ⅴ級(jí):腎皮質(zhì)、髓質(zhì)可見(jiàn)大量結(jié)晶，有游離結(jié)石形成，腎乳頭可見(jiàn)鈣化斑，腎盂明顯擴(kuò)張積水，記4分;并根據(jù)腎結(jié)石形成率及腎結(jié)石程度與模型對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠腎結(jié)石的影響

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片各劑量組能明顯防止乙二醇、氯化銨誘發(fā)的腎結(jié)石形成，并使大鼠結(jié)石形成率降低。2.3 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠的利尿作用（代謝籠法）［2］Wistar大鼠50只，♂性，體重180～240 g，均分為5組，每組10只。禁食不禁水15 h后，每鼠灌胃給予水負(fù)荷5%葡萄糖鹽水3 mL/100 g 30 min后，然后灌胃給藥，給藥劑量同前實(shí)驗(yàn)。給藥后壓迫大鼠下腹，排盡余尿，然后置代謝籠中收集5 h尿液，最后同法壓迫大鼠下腹，分別測(cè)量各鼠尿液，并將給藥組與對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠的利尿作用（±s）

表3 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠的利尿作用（±s）

t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01。

組別 動(dòng)物數(shù)/只 劑量/（g/kg） 尿量/（mL/5 h）10 1.96±1.04復(fù)方石淋通片 10 27.2 3.88±1.47**10 13.6 3.91±1.45**10 6.8 3.14±1.19*氫氯噻嗪片 10 0.25 7.33±3.66對(duì)照組**

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片各劑量組均有明顯的利尿作用。

2.4 復(fù)方石淋通片對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響［3］小鼠50只，♂性，體重24～28 g，隨機(jī)分為5組，每組10只。然后灌胃給藥，給藥劑量見(jiàn)表4。藥后1 h，各鼠左耳用2%巴豆油合劑0.05 mL/耳致炎，右耳作對(duì)照。4 h后將小鼠拉斷頸椎處死，剪下兩耳，用直徑9 mm打孔器分別在同一部位打下耳片，以分析天平稱取小鼠左右耳重量，以其差值作為炎性腫脹程度，并計(jì)算腫脹抑制百分率。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 復(fù)方石淋通片對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片各劑量對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用。

2.5 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠胸腔白細(xì)胞游走的影響［2］選取體重230～300 g大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，♀、♂各半。然后灌胃給藥，給藥劑量見(jiàn)表5。于實(shí)驗(yàn)前48、24、1 h灌胃給藥3次，末次給藥后1 h，將大鼠用乙醚淺麻醉，仰位固定于手術(shù)臺(tái)上。在大鼠右側(cè)胸腔注入0.5%角叉菜膠0.5 mL，5 h后斷頭處死大鼠，在橫隔周邊部打開(kāi)胸腔，用吸管吸出胸腔液，記錄滲出液和白細(xì)胞數(shù)/只鼠（四個(gè)大方格白細(xì)胞數(shù)×50/μL×胸腔滲出液（mL×1 000 μL））。結(jié)果見(jiàn)表5。

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片各劑量組能明顯抑制大鼠白細(xì)胞游走。

2.6 復(fù)方石淋通片對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響［2］選取體重18～22 g小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，♀♂各半。然后灌胃給藥，給藥劑量見(jiàn)表6。藥后1 h，各鼠分別腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，觀察注射后20 min內(nèi)出現(xiàn)的扭體反應(yīng)，以及計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。結(jié)果見(jiàn)表6。

表5 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠白細(xì)胞游走的影響（±s）

表5 復(fù)方石淋通片對(duì)大鼠白細(xì)胞游走的影響（±s）

t檢驗(yàn)，與對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01。

組別 動(dòng)物數(shù)/只劑量/（g/kg）胸腔滲出液/mL白細(xì)胞總數(shù)/（個(gè)/只鼠）對(duì)照組 10 1.67±0.64 （9.96±3.44）×107復(fù)方石淋通片 10 27.2 1.38±0.20（5.72±1.34）×107**10 13.6 1.57 ±0.43（6.86 ±1.94）×107*10 6.8 1.39 ±0.67（5.93 ±3.17）×107*地塞米松片 10 0.08 0.98±0.36**（3.49±1.96）×107**

表6 復(fù)方石淋通片對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

結(jié)果表明，復(fù)方石淋通片各劑量組對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)均沒(méi)有明顯的抑制作用。

3 討論

泌尿系結(jié)石是指發(fā)生在腎、輸尿管、膀胱、尿道等泌尿系統(tǒng)的結(jié)石，是一種有地區(qū)傾向性的常見(jiàn)?。?］，屬于中醫(yī)學(xué)“石淋，砂淋”范疇。癥狀主要為腰腹痛，尿痛，尿血，尿中有砂石排出。本病主要與膀胱濕熱有關(guān)，采用的治法為清熱利濕，化痰軟堅(jiān)，通淋排石。復(fù)方石淋通片方中金錢草、海金砂、石韋、忍冬藤共奏清熱利濕、通淋化石、排石之功。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也說(shuō)明，復(fù)方石淋通片對(duì)泌尿系統(tǒng)感染常見(jiàn)的細(xì)菌具有不同程序的抑制作用;能明顯防止乙二醇、氯化銨誘發(fā)的腎結(jié)石形成，使大鼠結(jié)石形成率降低;有明顯的利尿作用及抗炎作用;并有顯著的鎮(zhèn)痛作用。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布標(biāo)準(zhǔn)中成藥制劑第十二冊(cè)［S］，Z12－117.

［2］陳 奇，孫建寧，林志彬，等，中藥藥理研究方法學(xué)［M］，人民衛(wèi)生出版社，1993，275，397，391，366，378.

［3］李儀奎，金若敏，王欽茂，等，中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］，上海科學(xué)技術(shù)出版社，1991:300.

［4］蒲萬(wàn)松，薛國(guó)慶，王朝沛，等，中西醫(yī)綜合療法治療泌尿系結(jié)石162 例［J］，中國(guó)民間療法，2008，（9）:41.