于志瀛

（廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院，廣州市 510520）

1 抗腫瘤作用

早在20世紀(jì)80年代，就有香加皮中具有抗腫瘤活性成分孕甾烷苷類（PeriplocosidesA、B、C、D、E、L、M、J、K、F、O）的報(bào)道。在2008～2009年，抗腫瘤作用研究更加深入，發(fā)表研究資料占65%，主要對(duì)香加皮的單體成分寶藿苷Ⅰ、杠柳苷、杠柳毒苷、杠柳苷元、羽扇豆烷乙酸酯及水提、醇提、乙酸乙酯提取物等多種成分開展研究。結(jié)果表明，以上單體或不同的提取部位均顯示出一定的體內(nèi)、外抗腫瘤作用。香加皮及其提取物抗腫瘤作用主要研究進(jìn)展見表1[1～9]。

對(duì)香加皮構(gòu)效關(guān)系也有初步研究。Spera D等[10]在從長(zhǎng)果杠柳Periploca graeca L.提取的6個(gè)17β強(qiáng)心苷和3個(gè)17α強(qiáng)心苷（其中包括一個(gè)杠柳毒苷的異構(gòu)體）中，發(fā)現(xiàn)3個(gè)14位具有OH的17β強(qiáng)心苷對(duì)于前列腺癌PC3細(xì)胞具有最強(qiáng)的抗增殖活性，其半數(shù)抑制濃度（IC50）值為18～50 nmol·L-1，而相應(yīng)的17α異構(gòu)體活性較低，IC50值約為前者192倍，且糖基的加入對(duì)其活性影響不大。這些研究表明，香加皮蘊(yùn)含著豐富的、具有抗腫瘤活性的成分，有望成為尋求或經(jīng)過結(jié)構(gòu)改造合成低毒性抗腫瘤藥物的新源泉。

2 強(qiáng)心作用

治療心悸氣短是香加皮的傳統(tǒng)用途之一，20世紀(jì)60年代，國(guó)外就已有關(guān)于香加皮中杠柳毒苷在氫氧化鋅所致貓心損傷及心肌供血不足患者治療方面的研究報(bào)道。20世紀(jì)80年代，我國(guó)開展了對(duì)香加皮臨床上治療心臟性水腫、心衰及房顫、慢性充血性心力衰竭心臟疾病的研究。李玉紅等[11]研究表明，香加皮提取物A能顯著升高大鼠離體心臟的左室收縮峰壓（LVSP），增加最大上升速率（±dp/dtmax），降低左室舒張期末壓（LVEDP），改善心功能，具有強(qiáng)心作用。馬立等[12，13]利用超聲心動(dòng)圖觀察并證明了杠柳毒苷對(duì)慢性心衰（CHF）大鼠左室結(jié)構(gòu)和功能具有改善作用，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了研究，認(rèn)為杠柳毒苷能提高CHF模型大鼠Ca2+-三磷酸腺苷（ATP）mRNA表達(dá)，降低心肌受磷蛋白mRNA表達(dá)，改善心肌受磷蛋白/Ca2+-ATP酶比值，揭示了杠柳毒苷抗心力衰竭的可能機(jī)制。

表1 香加皮及其提取物抗腫瘤作用主要研究進(jìn)展

3 免疫抑制及抗炎作用

Tokiwa T等[14]研究認(rèn)為，杠柳的水提物能夠抑制風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)和白細(xì)胞介素（IL）-6的產(chǎn)生，活性物質(zhì)可能與提取物中低分子量的物質(zhì)有關(guān)。顧衛(wèi)等[15]則研究了杠柳苷元對(duì)大鼠和小鼠肥大細(xì)胞脫顆粒及釋放組胺的影響，表明杠柳苷元對(duì)體外培養(yǎng)肥大細(xì)胞的組胺釋放有顯著的抑制作用，可使組胺釋放濃度降低（69.4±8.6）%，對(duì)抗原致敏大鼠肥大細(xì)胞在20 μg·mL-1濃度可使組胺釋放濃度減少73.55%；口服給予致敏小鼠后，在50 mg·kg-1劑量時(shí)即可使小鼠組胺釋放濃度減少80%以上，并呈顯著的劑量依賴關(guān)系。

2006～2009年，免疫抑制作用的研究主要集中于孕甾烷苷類成分。在對(duì)從杠柳P.sepium中提取的杠柳苷A的研究中，Zhang J等[16]研究發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠灌胃給予杠柳苷A（50 mg·kg-1或25 mg·kg-1）能夠顯著地減輕實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的發(fā)生率及嚴(yán)重程度，其機(jī)制與阻止IL-17生成及抑制Th17細(xì)胞分化有關(guān)；Wan J等[17]研究表明，杠柳苷A具有預(yù)防刀豆球蛋白A誘導(dǎo)的小鼠肝炎的作用，能夠改善肝損傷，降低血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、IL-4、干擾素（IFN）-γ水平，提高存活率，其機(jī)制與抑制自然殺傷T細(xì)胞（NKT）有關(guān)。Zhu YN等[18]研究了從杠柳中提取的杠柳苷E的免疫抑制作用，杠柳苷E可顯著抑制刀豆球蛋白A誘導(dǎo)的脾細(xì)胞增殖。小鼠給予杠柳苷E，可抑制遲發(fā)型超敏反應(yīng)和卵白蛋白（OVA）誘導(dǎo)的抗原特異性免疫應(yīng)答，其機(jī)制與直接抑制T細(xì)胞的激活有關(guān)。Feng J等[19]對(duì)從杠柳和滇杠柳P.forrestii中提取的9個(gè)在糖鏈中含有過氧基團(tuán)孕甾烷苷類進(jìn)行了研究，認(rèn)為其具有抑制T淋巴細(xì)胞增殖的作用，體外IC50為0.29～1.97 mmol·L-1。上述研究不僅對(duì)香加皮可傳統(tǒng)用于治療風(fēng)寒濕痹、腰膝酸軟等證提供了藥理學(xué)基礎(chǔ)，而且也揭示了杠柳或香加皮中孕甾烷苷類成分應(yīng)用于自身免疫性疾病的潛力。

4 藥動(dòng)學(xué)

隨著研究的深入，如何更好地發(fā)揮香加皮潛在的多種藥理活性，克服其屢見不鮮的毒性及不良反應(yīng)日益成為關(guān)注焦點(diǎn)，人們需要進(jìn)一步揭示其在機(jī)體內(nèi)發(fā)生的變化，因此藥動(dòng)學(xué)的研究顯得十分迫切。目前，共發(fā)表僅約10篇論文。這些研究幾乎都是針對(duì)強(qiáng)心有效成分及毒性成分杠柳毒苷進(jìn)行，內(nèi)容涉及吸收、分布、代謝及排泄過程，為香加皮的藥代研究積累了初步的研究數(shù)據(jù)。

在吸收過程方面，進(jìn)行了杠柳毒苷在模擬消化液中的穩(wěn)定性[20]、大鼠小腸對(duì)杠柳毒苷的吸收特性[21]、杠柳毒苷的大鼠腸吸收動(dòng)力學(xué)的研究[22]，表明杠柳毒苷在模擬空腹胃液中可被水解為杠柳苷元，在大鼠小腸內(nèi)吸收機(jī)制為被動(dòng)擴(kuò)散，有良好的膜通過性，腸壁代謝酶的作用不明顯。在血藥濃度的檢測(cè)方面，闞紅玉等[23]以高效液相色譜法測(cè)定小鼠血漿中杠柳毒苷的血藥濃度，采用尾靜脈注射方式，按1 mg·kg-1給藥后，認(rèn)為杠柳毒苷在小鼠體內(nèi)符合二室代謝模型，分布半衰期（t1/2α）為2.04 min，消除半衰期（t1/2β）為13.9 min。李國(guó)信等[24]采用地高辛化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定了八味健骨片中杠柳毒苷在人體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)。由于此研究是利用杠柳毒苷與地高辛同屬?gòu)?qiáng)心苷類，其結(jié)構(gòu)上具有相同苷元，因此陳穎萍等[25]對(duì)此方法的可行性進(jìn)行了研究[25]。結(jié)果表明，受試者口服八味健骨片后，杠柳毒苷血漿藥時(shí)曲線符合二室代謝模型，達(dá)峰時(shí)間（tmax）約116～119 h ，t1/2β為13～14 h之間，36～72 h內(nèi)自尿中排泄率約為95%以上。在代謝及排泄方面，任曉亮等[26]研究認(rèn)為，杠柳毒苷在腸菌（大鼠、人體）作用下，代謝迅速，生成的代謝產(chǎn)物為杠柳次苷。王強(qiáng)等[27]研究了大鼠按12 mg·kg-1劑量灌胃給予杠柳毒苷后，原形藥物主要經(jīng)膽汁排泄，從尿液和糞便排泄很少，尿液中可能存在結(jié)合代謝物，糞便中主要以腸菌代謝物（杠柳次苷）的形式排泄。周昆等[28]針對(duì)香加皮配方顆粒中的毒性成分在小鼠體內(nèi)的代謝進(jìn)行研究，測(cè)定了小鼠灌胃和腹腔注射給藥的半數(shù)致死量（LD50），認(rèn)為小鼠口服生物利用度為11.61%；香加皮配方顆粒的毒性成分代謝過程較復(fù)雜，可能存在腸肝循環(huán)或毒性代謝產(chǎn)物生成。徐鑫等[29]開展了香加皮配方顆粒的急性毒性和蓄積毒性的實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明，小鼠在腹腔注射給藥后1 min開始出現(xiàn)毒性反應(yīng)，5 min后開始死亡，LD50為 9.84～11.43 g（生藥）·kg-1，24 h的蓄積率為0.196，毒效半衰期為10.20 h；大鼠心電圖在較大劑量下可以出現(xiàn)明顯的類洋地黃中毒樣變化；香加皮配方顆粒有急性毒性和低蓄積毒性并可導(dǎo)致心電圖異常改變。

5 展望

隨著時(shí)間推移及環(huán)境變化，香加皮這一傳統(tǒng)藥材的產(chǎn)地分布、植物多樣性等情況有了新的變化，對(duì)其化學(xué)成分、質(zhì)量控制方法有了新的進(jìn)展，其抗腫瘤、強(qiáng)心、免疫抑制及抗炎等多種藥理作用日益顯現(xiàn)，更使其成為一個(gè)具有研究?jī)r(jià)值和開發(fā)前景的中藥材。目前，對(duì)于香加皮及其提取物抗腫瘤、免疫抑制作用方面多為體外研究，其體內(nèi)的活性有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明，其強(qiáng)心作用機(jī)制研究及有效成分開發(fā)也有待深入。目前，藥動(dòng)學(xué)研究仍處于初步階段，有待建立更靈敏、專屬性更好的體內(nèi)微量成分測(cè)定方法，對(duì)其開展多種屬、多種體內(nèi)組織、多種目標(biāo)成分的體內(nèi)測(cè)定。在代謝方面，對(duì)其有效成分在體內(nèi)的代謝途徑及代謝產(chǎn)物的活性更須深入闡明，這些都將對(duì)這一傳統(tǒng)中藥材臨床安全有效的應(yīng)用提供科學(xué)參考依據(jù)，具有重要意義。藥學(xué)工作者應(yīng)該及時(shí)更新對(duì)香加皮的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)，挖掘其潛力，使其真正從“傳統(tǒng)”走向“現(xiàn)代化”。

[1]王麗芳，單保恩，劉麗華，等.香加皮單體成分寶藿苷Ⅰ對(duì)食管癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J].腫瘤，2009，29（2）：123.

[2]杜彥艷，劉 鑫，單保恩.香加皮杠柳苷通過抑Wnt/β-catenin信號(hào)通路誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞SW480凋亡[J].癌癥，2009，28（5）：456.

[3]趙連梅，單保恩，艾 軍，等.香加皮杠柳苷對(duì)人食管癌細(xì)胞TE-13生長(zhǎng)抑制作用[J].腫瘤，2008，28（3）：203.

[4]張麗杰，鹿 剛，張引娟，等.香加皮提取物杠柳苷抑制SMMC-7721細(xì)胞Stat3信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，30（15）：1448.

[5]張引娟，鹿 剛，張麗杰，等.杠柳苷對(duì)BT-549細(xì)胞增殖的抑制作用與p16、p27表達(dá)關(guān)系的研究[J].癌變·畸變·突變，2008，20（3）：216.

[6]Bloise E，Braca A，De Tommasi N，et al.Pro-apoptotic and cytostatic activity of naturally occurring cardenolides[J].Cancer Chemother Pharmacol，2009，64（4）：793.

[7]Egawa K，Kurihara Y，Ito T，et al.Induction of p16（INK 4a）transcription and of cellular senescence by aclacinomycin-derivatives and cardiac glycosides[J].Biol Pharm Bull，2002，25（4）：461.

[8]韓宇博，趙愛國(guó).杠柳苷元的抗腫瘤作用研究[J].中國(guó)小兒血液與腫瘤雜志，2008，13（1）：1.

[9]劉 洋，劉 虹，王小瑩，等.香加皮不同提取部位體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)研究[J].天津中醫(yī)藥，2008，25（2）：153.

[10]Spera D，Siciliano T，De Tommasi N，et al.Antiproliferative cardenolides from Periploca graeca[J].Planta Med，2007，73（4）：384.

[11]李玉紅，高秀梅，張柏禮，等.香加皮提取物對(duì)離體心臟心功能的影響[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，7（4）：396.

[12]馬 立，王 怡.杠柳毒苷對(duì)慢性心力衰竭大鼠心肌PLB和SERCA mRNA表達(dá)的影響[J].江蘇中醫(yī)藥，2009，41（3）：71.

[13]馬 立，姬艷蘇，韓 娟，等.超聲心動(dòng)圖觀察杠柳毒苷對(duì)慢性心衰大鼠左室結(jié)構(gòu)和功能的影響[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，27（2）：81.

[14]Tokiwa T，Harada K，Matsumura T，et al.Oriental medicinal herb，Periploca sepium，extract inhibits growth and IL-6 production of human synovial fibroblast-like cells[J].Biol Pharm Bull，2004，27（10）：1691.

[15]顧 衛(wèi)，趙力建，趙愛國(guó).杠柳苷元對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒及釋放組胺影響的研究[J].中國(guó)藥房，2008，19（3）：166.

[16]Zhang J，Ni J，Chen ZH，et al.Periplocoside A prevents experimental autoimmune encephalomyelitis by suppressing IL-17 production and inhibits differentiation of Th17 cells[J].Acta Pharmacol Sin，2009，30（8）：1144.

[17]Wan J，Zhu YN，F(xiàn)eng JQ，et al.Periplocoside A，a pregnane glycoside from Periploca sepium Bge，prevents concanavalin A-induced mice hepatitis through inhibiting NKT-derived inflammatory cytokine productions[J].Int Immunopharmacol，2008，8（9）：1248.

[18]Zhu YN，Zhao WM，Yang YF，et al.Periplocoside E，an effective compound from Periploca sepium Bge，inhibited T cell activation in vitro and in vivo[J].J Pharmacol Exp Ther，2006，316（2）：662.

[19]Feng J，Zhang R，Zhou Y，et al.Immunosuppressive pregnane glycosides from Periploca sepium and Periploca forrestii[J].Phytochemistry，2008，69（15）：2716.

[20]王 焱，任曉亮，潘桂湘，等.杠柳毒苷在模擬消化液中的穩(wěn)定性研究[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，26（2）：74.

[21]楊 穎，戚愛棣，潘桂湘.杠柳毒苷在大鼠體腸吸收動(dòng)力學(xué)研究[J].齊魯藥事，2009，28（2）：105.

[22]Xie YS，Ren XL，Pan GX，et al.The assessment of absorption of periplocin in situ via intestinal perfusion of rats by HPLC[J].Biomed Chromatogr，2008，22（2）：196.

[23]闞紅玉，謝躍生，王躍飛，等.HPLC法測(cè)定小鼠血漿中杠柳毒苷的血藥濃度[J].中草藥，2008，39（10）：1493.

[24]李國(guó)信，陳穎萍，田 原，等.八味健骨片中杠柳毒苷在人體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2005，32（6）：595.

[25]陳穎萍，田 原，韓 毅，等.化學(xué)發(fā)光酶免疫法測(cè)定八味健骨片中杠柳毒苷血藥濃度的可行性研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2006，17（6）：436.

[26]任曉亮，謝躍生，潘桂湘，等.香加皮強(qiáng)心成分杠柳毒苷腸菌代謝研究[J].天津中醫(yī)藥，2007，24（6）：515.

[27]王 強(qiáng)，任曉亮，王 焱，等.杠柳毒苷在大鼠體內(nèi)排泄的初步研究[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，27（1）：29.

[28]周 昆，徐 鑫，屈彩芹，等.香加皮配方顆粒在小鼠體內(nèi)的毒代動(dòng)力學(xué)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2008，35（3）：451.

[29]徐 鑫，周 昆，屈彩芹.香加皮配方顆粒的急性毒性和蓄積毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].江蘇中醫(yī)藥，2008，40（10）：117.