林峰 劉嘉祺 孫展鵬 李孟全 金秀東

(牡丹江醫(yī)學(xué)院,黑龍江 牡丹江 157011)

咳爾康口服液是在經(jīng)典名方“六君子湯”基礎(chǔ)之上,經(jīng)過臨床多年實(shí)踐反復(fù)潛心研究衍化而成。主要成分包括茯苓、陳皮、甘草、紫苑、白術(shù)等,具有理氣、健脾、燥濕,化痰、止咳之功效。

本課題組前期藥效學(xué)研究結(jié)果表明：該產(chǎn)品具有止咳、祛痰、平喘作用[1];毒理學(xué)研究結(jié)果表明該口服液是比較安全的[2]。本實(shí)驗(yàn)旨在探討其一般藥理學(xué)作用,研究本品對大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)有無影響,為本品作新藥研發(fā)提供安全性依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物

咳爾康口服液制備：處方藥材用清水速洗,水煎兩次,合并煎液,除塵,濃縮至規(guī)定量,分裝滅菌即得,黑龍江仁和堂藥業(yè)有限公司代加工,批號：080216。臨床推薦使用劑量0.165ml?kg-1。

1.1.2 動物

Sprague-Dawley(SD)大鼠120只,SPF級,體重(200±10g),雌雄各半,由牡丹江醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供,實(shí)驗(yàn)動物合格證號：P00102008。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)一周(溫度20～25℃,相對濕度55%～65%)。

1.1.3 儀器

高架十字迷宮視頻分析系統(tǒng)：上海移數(shù)信息科技有限公司研制,型號：RD1208-EPM-R,采用國際通用方法制作(附紅外自動跟蹤分析系統(tǒng))。由兩個(gè)相對的開臂(長×寬：40 cm×10 cm)、兩個(gè)相對的閉臂(長×寬×高：40 cm×10 cm×30 cm)、一個(gè)連接四只臂的中央平臺(10 cm×10 cm)和圍繞在開臂邊緣的1 cm高的矮擋板組成。迷宮整體固定于金屬架上,使迷宮底板調(diào)節(jié)到距實(shí)驗(yàn)室地面50 cm。實(shí)驗(yàn)時(shí)紅外裝置實(shí)施自動追蹤,電腦相關(guān)軟件自動記錄數(shù)據(jù)。

1.2 方法

1.2.1 咳爾康口服液對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響[3]

實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為四組,每組30只?？葼柨悼诜旱?、中、高三個(gè)劑量組[4],分別給予咳爾康口服液16.65、33.30、66.60ml?kg-1,空白對照組給予同等體積生理鹽水。給藥后30min,各組動物均腹腔注射40 mg?kg-1戊巴比妥鈉。以翻正反射消失至恢復(fù)的時(shí)間為睡眠持續(xù)時(shí)間,記錄各組大鼠給藥后的睡眠持續(xù)時(shí)間。

1.2.2 咳爾康口服液對大鼠翻正反射的影響

實(shí)驗(yàn)動物分組、給藥途徑及給藥劑量同上,連續(xù)給藥5 d,最后1次給藥后60、120、180、240、360min進(jìn)行翻正反射實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法[5]：提著大鼠尾巴騰空旋轉(zhuǎn)3周,再輕拋出后觀察其落地姿勢,共進(jìn)行5次,用Liwin行為分級法進(jìn)行合并評分。評分標(biāo)準(zhǔn)：0級,四足落地;1級,側(cè)臥1-2次;2級,側(cè)臥3-4次;3級,側(cè)臥5次;4級,背向下 1-2次;5級,背向下 3-4次;6級,背向下5次;7級,翻正遲鈍;8級,不能反應(yīng)。按相應(yīng)分級給予1-8分。

1.2.3 咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動的影響

實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為四組,每組30只,將大鼠置于自發(fā)活動箱內(nèi),適應(yīng)5min后,記錄10min內(nèi)大鼠的自發(fā)活動次數(shù),然后給藥。分別觀察記錄給藥后15、30、60、120、180min各時(shí)段各組大鼠10min內(nèi)自發(fā)活動次數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 咳爾康口服液對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響

咳爾康口服液高、中、低劑量組對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響,與正常對照組比較,均無顯著性差異(p＞0.05),提示咳爾康口服液對大鼠睡眠時(shí)間無明顯影響(見表1)。

表1 咳爾康口服液對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響(min,d n=30)

表1 咳爾康口服液對戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響(min,d n=30)

組別 劑量(ml?kg-1) 睡眠時(shí)間(min)對照組 - 33.38±7.19低劑量組 16.65 34.50±5.86中劑量組 33.30 36.63±4.87高劑量組 66.60 38.50±3.96

2.2 咳爾康口服液對大鼠翻正反射的影響

與正常對照組比較,咳爾康口服液高、中、低劑量組給藥60、120、180、240、360min末大鼠翻正反射積分各組均在正常范圍內(nèi),差異無顯著性(p＞0.05)。與正常對照組比較,給藥后60min末翻正反射積分差異無顯著性(p＞0.05),提示咳爾康口服液對大鼠翻正反射無明顯影響(見表2)。

表2 給藥后60min末咳爾康口服液對大鼠翻正反射的影響(分,d n=30)

表2 給藥后60min末咳爾康口服液對大鼠翻正反射的影響(分,d n=30)

組別 劑量(ml?kg-1) 翻正反射評級對 照組 - 0.125±0.33低劑量組 16.65 0.125±0.33中劑量組 33.30 0.125±0.33高劑量組 66.60 0.200±0.40

2.3 咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動的影響

不同劑量咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動的影響見表3,咳爾康口服液高、中、低劑量組給藥 15、30、60、120、180min后,記錄大鼠10min內(nèi)的自發(fā)活動數(shù),與正常對照組比較,差異均無顯著性(p＞0.05),提示咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動無明顯影響(見表3)。

表3 咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動的影響(d,n=30)

表3 咳爾康口服液對大鼠自發(fā)活動的影響(d,n=30)

組別 自發(fā)活動數(shù)用藥前 15min 30min 60min 120min 180min對 照 組 127.8±10.19 122.0±9.62 119.3±14.01 119.4±9.04 116.1±9.78115.0±11.08低劑量組 101.0±37.60 115.5±9.59 116.3±8.84 111.8±10.94112.6±10.70114.4±8.07中劑量組 74.5±52.16 116.6±10.62 115.4±8.18 111.8±10.19 116.0±8.73115.1±5.14高劑量組 114.0±11.34112.1±10.34 120.6±7.25 117.3±9.05 118.9±10.87119.0±11.96

3 討論

一般藥理學(xué)研究是藥物臨床前安全性評價(jià)的重要組成部分,通過一般藥理學(xué)研究,可為臨床研究和安全用藥提供信息。

本課題組前期藥效學(xué)研究表明,咳爾康口服液不僅可以止咳、平喘、祛痰,而且具有提高機(jī)體的抵抗力和良好的早期抗炎作用[6-7];而前期的毒理學(xué)研究結(jié)果表明,該口服液具有一定的安全性。為了系統(tǒng)研究咳爾康口服液的藥理作用,本實(shí)驗(yàn)采用低、中、高三個(gè)劑量組研究咳爾康口服液對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一般藥理作用,分別觀察了咳爾康口服液對由戊巴比妥鈉致大鼠睡眠作用、翻正反射和自發(fā)活動行為的影響,結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)大鼠上述指標(biāo)與正常對照組比較無顯著性差異,提示咳爾康口服液在毒性劑量下對大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響,由此可知,咳爾康口服液在藥效劑量下安全性良好,這將為開發(fā)咳爾康口服液新藥提供一定的一般藥理學(xué)依據(jù)。

1 孫展鵬,李孟全,王元奕,等.咳爾康口服液止咳、祛痰、平喘的實(shí)驗(yàn)研究[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009,28(3)：29-31.

2 李厚忠,孫展鵬,王元奕,等.咳爾康口服液長期毒性試驗(yàn)[J].毒理學(xué)雜志,2009,23(6)：508-509.

3 張立偉,張勝,陳立紅,等.銀杏達(dá)莫的一般藥理學(xué)研究[J].中藥藥理與臨床,2006,22(2)：31-33.

4 黃正明.中藥新藥長期毒性試驗(yàn)及其資料整理中易出現(xiàn)的問題與解決方法[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2005,24(11)：975-975.

5 彭代銀,韓嵐,張叢芬,等.丹皮多糖一般藥理學(xué)研究[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,24(2)：30-32.

6 才玉婷,李孟全,梁億紅,等.咳爾康口服液對小白鼠碳粒廓清功能的影響[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,30(5)：16-17.

7 郭強(qiáng),李孟全,張小軻,等.咳爾康口服液對蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,30(5)：14-15.