張 勝,周 濤,付四毛,朱建萍,吳 濤,羅序峰

輪狀病毒 (RV)是世界范圍內(nèi)嬰幼兒腹瀉的重要病原體,1973年澳大利亞學(xué)者 Bishop在非細(xì)菌性胃腸炎患兒的腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn) RV,RV感染一直被認(rèn)為是局限于胃腸道內(nèi),然而近 20年來(lái),不斷有 RV腸炎患兒病程中出現(xiàn)各種腸道外臟器損傷的報(bào)道[1]。許多學(xué)者推測(cè) RV可以通過(guò)病毒血癥逸出胃腸道從而直接造成這些臟器的損傷[2]。目前發(fā)現(xiàn)腸道外神經(jīng)系統(tǒng)病變的發(fā)病率為 6%[1]。近年來(lái) RV感染患兒中相當(dāng)一部分合并無(wú)熱抽搐癥狀,臨床上既不能診斷為病毒性腦炎,也不能診斷為中毒性腦病,文獻(xiàn)均以良性驚厥予以診斷,目前對(duì)其研究仍然停留在臨床水平。本研究通過(guò)對(duì) RV腸炎伴良性驚厥患兒血清及腦脊液白介素的測(cè)定,了解其對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)損傷的輕重及對(duì)預(yù)后的影響,為臨床提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2008年 6月—2009年 2月我院住院的25例臨床確診為 RV性腸炎伴良性驚厥的患兒為驚厥組,其中男 15例,女 10例;平均年齡 (1.5±1.1)歲;其中無(wú)脫水 5例,輕度脫水 12例,中度脫水 8例。同時(shí)選擇同期 25例單純RV腸炎無(wú)驚厥的患兒為單純腸炎組,其中男 11例,女 14例;平均年齡 (2.2±0.7)歲。35例外科疾患住院手術(shù)治療需行硬膜外麻醉的患兒為對(duì)照組,其中男 26例,女 9例;平均年齡 (1.9±0.3)歲。均排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患。家屬均簽署知情同意書(shū)。三組患兒男女構(gòu)成、年齡間有均衡性。

1.2 RV腸炎伴良性驚厥診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]高發(fā)年齡 1～2歲;既往體健,無(wú)或有驚厥史;驚厥多發(fā)生在 RV腸炎病程的 1～5 d;驚厥以全身性強(qiáng)直 -陣攣發(fā)作為主,一次發(fā)病中可反復(fù)發(fā)作多次;無(wú)明顯酸中毒和電解質(zhì)紊亂;血生化、腦脊液、顱腦CT等檢查正常,發(fā)作間期腦電圖正常,大便 RV抗原陽(yáng)性;預(yù)后良好,一般無(wú)復(fù)發(fā)。除外熱性驚厥、顱腦損傷、腦炎、腦膜炎、腦病和已明確為其他類(lèi)型的癲癇者。

1.3 方法 入院 24 h內(nèi) (急性期)常規(guī)抽取患兒血清標(biāo)本,因單純腸炎組患兒不具備抽取腦脊液指征僅驚厥組及對(duì)照組抽取腦脊液標(biāo)本,檢測(cè)血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8。驚厥組及單純腸炎組患兒并在恢復(fù)期 (發(fā)病后 5～7 d,無(wú)臨床癥狀,RV轉(zhuǎn)陰)再次檢測(cè)血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8。SIL-2R、IL-6、IL-8試劑盒由德國(guó)西門(mén)子公司提供的同批次試劑,采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。使用西門(mén)子公司生產(chǎn)的Immulite 1000化學(xué)發(fā)光儀,檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及樣品結(jié)果監(jiān)測(cè)由專(zhuān)人負(fù)責(zé)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 Excel-Xp建立數(shù)據(jù)庫(kù),采用 SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用 (x ±s)表示,采用方差分析和 t檢驗(yàn),以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組對(duì)象入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、 IL-6、IL-8水平比較 驚厥組、單純腸炎組及對(duì)照組入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。驚厥組及單純腸炎組入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平較對(duì)照組均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05,見(jiàn)表 1)。

2.2 驚厥組與對(duì)照組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8比較驚厥組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平較對(duì)照組均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05,見(jiàn)表 2)。

表1 三組血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 (x ±s)Table 1 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8amorg serum in three groups

表2 驚厥組與對(duì)照組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較(x ±s)Table 2 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in CSF between seizure group and the colitis group

2.3 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05,見(jiàn)表 3)。

2.4 RV性腸炎伴良性驚厥患兒不同程度脫水組血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 RV性腸炎伴良性驚厥患兒無(wú)脫水組、輕度脫水組及中度脫水組血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05);無(wú)脫水組、輕度脫水組及中度脫水組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05,見(jiàn)表 4)。

表3 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 (x ±s)Table 3 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in serum and CSF between seizure group and the colitisgroup

表4 不同程度脫水血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較(x ±s)Table 4 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in patients with varying degrees of dehydration

3 討論

輕度胃腸炎伴良性驚厥是一種以胃腸炎伴驚厥發(fā)作為主要特征的疾病,多發(fā)生在冬春季,以嬰幼兒多見(jiàn),病因可能與病毒或細(xì)菌感染相關(guān),病毒感染占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),一半以上為 RV感染,實(shí)驗(yàn)室檢查多正常[4]。急性感染狀態(tài)下患兒的驚厥閾降低是發(fā)病的因素之一。遺傳易感性在疾病發(fā)生中起重要作用[5]。RV腸炎伴良性驚厥患兒中 7%存在熱性驚厥史,6%存在熱性驚厥家族史。目前已經(jīng)證實(shí)多種細(xì)胞因子參與 RV炎癥免疫反應(yīng),與發(fā)病及轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[7-8]。隨著分子免疫學(xué)深入研究,腸炎與免疫功能異常的關(guān)系越來(lái)越引起重視,腸道病毒侵犯外周血及腦細(xì)胞,激活免疫系統(tǒng),一方面發(fā)揮抗感染的免疫保護(hù)作用,維持機(jī)體的生理平衡,另一方面也由于免疫失調(diào)而產(chǎn)生對(duì)機(jī)體有害的超敏反應(yīng),加重腦組織損傷[6]。本研究留取血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8并做相關(guān)檢測(cè),以了解疾病發(fā)生過(guò)程是否存在免疫功能紊亂及對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的損害。

腦脊液 SIL-2R來(lái)源于顱內(nèi)病灶,而非外周循環(huán)中 SIL-2R透過(guò)血 -腦脊液屏障進(jìn)入腦脊液。SIL-2R可與腦膜 SIL-2R競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 IL-2,使 IL-2的水平降低,抑制 T細(xì)胞增殖,導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂。SIL-2R與神經(jīng)系統(tǒng)感染關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn),正常人腦脊液中水平較低,不易透過(guò)血 -腦脊液屏障,在炎癥情況下,腦脊液內(nèi)的 SIL-2R會(huì)出現(xiàn)明顯上升,腦脊液水平的高低可反映神經(jīng)系統(tǒng)的病變情況,其增高的程度與病情的輕重及預(yù)后密切相關(guān)。國(guó)內(nèi)學(xué)者認(rèn)為,其水平可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷預(yù)后的判斷標(biāo)準(zhǔn)之一,其水平高低可以反應(yīng)體液的免疫活性[9]。本研究結(jié)果顯示驚厥發(fā)生時(shí)腦脊液 SIL-2R與腸炎脫水輕重水平無(wú)相關(guān)性,腸炎脫水程度不同僅改變外周血免疫功能調(diào)控,而腦脊液白介素水平改變無(wú)差異。腸炎脫水程度改變并沒(méi)有影響腦脊液的白介素水平變化,推測(cè)原因:此類(lèi)患兒在感染狀態(tài)下驚厥閾降低,或具有遺傳易感性特點(diǎn)有關(guān)。本研究證明患兒腦脊液 SIL-2R尚處于低激活狀態(tài),提示其參與體液反應(yīng)的免疫紊亂較輕。

IL-6是一種多功能細(xì)胞因子,在不同的生物學(xué)過(guò)程中起主導(dǎo)作用,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)機(jī)體抗損傷防御的重要因素[10]。腦脊液 IL-6主要來(lái)源于腦內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞,IL-6既是T細(xì)胞激活增殖的主要因子,使 T細(xì)胞的免疫和細(xì)胞功能增強(qiáng),又能刺激已激活的 B細(xì)胞分泌特異性抗體[11]。Kamashima等[12]發(fā)現(xiàn) RV血清和腦脊液中一氧化氮 (NO)明顯升高,推測(cè) NO可能通過(guò)誘導(dǎo)致炎因子 IL-6參與發(fā)病,血清和腦脊液中 IL-6水平可作為反映腦實(shí)質(zhì)損傷程度的重要指征。本研究結(jié)果顯示驚厥組患兒腦脊液 IL-6水平較對(duì)照組明顯升高。提示 IL-6參與了本病的免疫應(yīng)答。腦脊液中過(guò)量的 IL-6起到神經(jīng)保護(hù)作用,減少興奮神經(jīng)遞質(zhì)毒性對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損害,同時(shí)也可通過(guò)其致炎作用導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的病理過(guò)程發(fā)生驚厥[13]。IL-6在免疫失衡過(guò)程中起到關(guān)鍵的作用。

IL-8主要是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種炎癥遞質(zhì),在各種急性或慢性炎癥中起主要作用,IL-8在體內(nèi)的生物學(xué)功能為誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),增強(qiáng)血管通透性,在感染、創(chuàng)傷的患者血清及組織液中都可以檢測(cè)到高水平的 IL-8[14]。腦脊液中 IL-8水平升高與腦脊液病變的病理生理相關(guān),與它們的發(fā)病密切相關(guān),其水平與病情輕重亦相關(guān),本研究結(jié)果顯示驚厥組患兒腦脊液中 IL-8較對(duì)照組明顯升高,IL-6很可能是腦脊液感染的共同參與者,但不具有病原學(xué)的特異性。李孟榮等[15]發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染不同致病原之間 IL-8活性沒(méi)有顯著區(qū)別,血清中 IL-8活性也沒(méi)有升高,僅提示其在炎癥過(guò)程中起一定作用,臨床意義不大。

本研究結(jié)果顯示,SIL-2R、IL-6、IL-8均參與了 RV腸炎伴良性驚厥的免疫病理過(guò)程,提示嬰幼兒 RV腸炎伴良性驚厥存在免疫失衡并同時(shí)導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的病理生理改變。在臨床診斷的同時(shí),通過(guò)動(dòng)態(tài)跟蹤白介素的水平變化,為判斷預(yù)后及病情發(fā)展提供了有效的細(xì)胞學(xué)依據(jù)。

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