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        甲基綠-派洛寧染色方法在慢性子宮內(nèi)膜炎診斷中的應用

        2010-04-19 13:24:16陳永宏袁林秀廖曉丹
        中國民族民間醫(yī)藥 2010年14期

        陳永宏 袁林秀 廖曉丹

        山西省汾陽醫(yī)院病理科,山西 汾陽 032200

        慢性子宮內(nèi)膜炎為子宮內(nèi)膜的慢性炎癥。慢性子宮內(nèi)膜炎雖然發(fā)病率較低,可一旦患病則會給患者生活、工作帶來諸多影響,也給患者本人造成許多痛苦。在子宮內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)找到漿細胞是診斷子宮內(nèi)膜炎的關鍵。但是,混雜在子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞之間的漿細胞很不容易找到,不成熟的漿細胞就更不容易辨認。造成慢性子宮內(nèi)膜炎漏診。我們應用甲基綠-派洛寧染色方法幫助辨認漿細胞,確診慢性子宮內(nèi)膜炎64例,現(xiàn)報告如下。

        1 材料及方法

        1.1 材料

        山西省汾陽醫(yī)院門診及住院功能性子宮出血病例294例。

        1.2 方法

        采用Cook甲基綠-派洛寧提純法[1]

        [試劑配制]

        (1)甲基綠原液2%甲基綠溶液,氯仿抽提五次。

        (2)派洛寧原液2%派洛寧。

        (3)醋酸緩沖液(pH4.8)0.2M醋酸液41ml,0.2M醋酸鈉59ml。

        (4)甲基綠-派洛寧染液。甲基綠提純液15ml,派洛寧原液1ml,醋酸緩沖液20ml,甘油10ml。臨用前配制。

        [染色步驟]

        (1)組織切片脫蠟至水。

        (2)用醋酸緩沖液(pH4.8)浸洗。

        (3)置于甲基綠-派洛寧染液染色3分鐘。

        (4)用醋酸緩沖液(pH4.8)清洗。

        (5)濾紙吸干,迅速丙酮分化30秒。

        (6)用純丙酮、二甲苯等量(1∶1)混合液分化、脫水30秒。

        (7)二甲苯透明,光學樹膠封固。

        2 結果

        圖1

        294例功能性子宮出血病人的子宮內(nèi)膜組織,其中64例診斷為慢性子宮內(nèi)膜炎。子宮內(nèi)膜組織呈淡紅色,漿細胞核呈綠色,漿細胞胞漿呈鮮紅色。在HE形態(tài)下,子宮內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)有散在的或成簇淋巴細胞浸潤,部分淋巴細胞出現(xiàn)漿細胞樣分化,較少出現(xiàn)典型的成熟的漿細胞。早期的漿細胞的核形態(tài)與淋巴細胞相似,胞漿增多,核周出現(xiàn)淡染區(qū),后期則出現(xiàn)核內(nèi)染色質(zhì)分布呈點彩樣,成熟的漿細胞出現(xiàn)典型的車輪狀核。長期的慢性炎癥間質(zhì)細胞可出現(xiàn)纖維化及毛細血管增生。見圖1。

        3 討論

        甲基綠和派洛寧兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA顯現(xiàn)出綠色,而派洛寧對RNA的親和力強,使RNA呈現(xiàn)出紅色。漿細胞的胞漿內(nèi)合成蛋白質(zhì)旺盛,含有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),上有大量的核糖體,內(nèi)含大量的核糖核酸,故漿細胞胞漿著色呈鮮紅色。淋巴細胞分為T淋巴細胞、B淋巴細胞兩大類。B淋巴細胞最終發(fā)育為漿細胞,產(chǎn)生抗體,在發(fā)育的過程中,漿細胞內(nèi)核糖體逐漸增多。分泌抗體功能逐漸加強,形態(tài)也逐漸典型。

        慢性子宮內(nèi)膜炎在婦科臨床雖沒有宮頸糜爛及陰道炎那樣多見,但仍是危及廣大婦女身體健康的主要原因之一。慢性子宮內(nèi)膜炎多由急性子宮內(nèi)膜炎治療不徹底所致。慢性子宮內(nèi)膜炎的癥狀有疼痛的、白帶增多、經(jīng)量增多。由于子宮內(nèi)膜的生理性周期剝脫,嚴重的慢性子宮內(nèi)膜炎并不多見。這就給臨床診斷帶來困難。鏡下見內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)有多少不等的漿細胞及淋巴細胞浸潤,而漿細胞的存在是診斷慢性子宮內(nèi)膜炎的依據(jù)之一。但有時內(nèi)膜細胞增生、經(jīng)前期內(nèi)膜的蛻膜樣改變以及大量淋巴細胞的存在可能影響對漿細胞的辨認。應用免疫組化方法有助于診斷,但無法排除假陰性的問題,其費用較高,操作復雜,在沒有開展免疫組化的基層醫(yī)院很難實行。本方法294例功能性子宮出血病人的子宮內(nèi)膜組織,其中64例診斷為慢性子宮內(nèi)膜炎。漿細胞核呈綠色,漿細胞胞漿呈鮮紅色,特別鮮艷奪目容易辨認。因此,本法簡便、易行、實用,可清晰顯示漿細胞的存在,可明確診斷慢性子宮內(nèi)膜炎。

        輕度炎癥病人,雙合診可無異常情況發(fā)現(xiàn),故臨床常診斷為功能失調(diào)性子宮出血。有人在1000例功能失調(diào)性子宮出血病人中作病理組織檢查,發(fā)現(xiàn)11%為子宮內(nèi)膜炎。在增生過長的子宮內(nèi)膜組織中如發(fā)現(xiàn)星星點點的淋巴細胞做甲基綠-派洛寧染色往往能找到漿細胞,所以內(nèi)膜間質(zhì)內(nèi)發(fā)現(xiàn)淋巴細胞即可認為是慢性子宮內(nèi)膜炎。使用抗生素治療往往有效,可一旦漏診則造成病人不必要的痛苦。

        [1]龔志錦.病理組織制片和染色技術[M].上海:上??茖W技術出版社,1994,1:301.

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