張飛燕
(山西省農(nóng)業(yè)廳,山西太原030001)
巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的野生動物、家畜和家禽共患的傳染性疾病。急性病例以敗血癥和出血性炎癥為臨床特征,因此曾被稱為出血性敗血癥(簡稱出?。1]。慢性病例則表現(xiàn)為皮下、關(guān)節(jié)以及各臟器的局灶性化膿性炎癥。
由于巴氏桿菌病在不少動物中并不表現(xiàn)“出敗”特點,而不少其他疾病卻出現(xiàn)出血性敗血癥,因此,目前以巴氏桿菌病命名比較恰當(dāng),以免發(fā)生混淆。該病世界各地均有發(fā)生,熱帶地區(qū)更為嚴重,給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴重損失。各種動物均可發(fā)生,呈散發(fā)性流行。
現(xiàn)將山西某奶牛場奶牛多殺性巴氏桿菌病的診治報告如下。
山西某奶牛場有奶牛230頭,從2006年5月初開始,新生犢牛陸續(xù)出現(xiàn)不明原因的死亡,到5月底死亡數(shù)達到7頭,使用青鏈霉素、哌拉西林等藥物治療效果不佳。
病牛呼吸困難,呼吸40次/min,精神沉郁,耳下垂,四肢冰冷,心跳120次/min,體溫升高至40~41℃。病牛尾翹起,廢食2 d,大小便困難,胃稍鼓脹。
主要病理變化為喉頭黏膜有大小不等的出血點。呼吸道、氣管、支氣管內(nèi)有粉紅色氣泡,胸腔內(nèi)有大量淡紅色滲出液,其間混有纖維素性絮狀物,胸膜及肺膜上有大小不等的出血點,并附有一層灰白色纖維膜。肺呈深紅色或暗紅色,間質(zhì)增厚,切面流出多量帶泡沫血液,右肺呈深紅色,部分壞死。肝稍腫大、質(zhì)脆,與周圍組織有粘連。腹膜炎嚴重有大量腹水。膽囊腫大,膽汁稀薄。脾未出現(xiàn)肉眼可見病變。膀胱及腸道黏膜有不同程度的出血斑點。小腸有大量出血斑,腸系膜有出血點且大部分粘連腸。腸內(nèi)容物稀薄并混有血液。腎稍腫大,表面有少量出血點。
取病死牛的肝、脾和心,進行實驗室檢查。
4.1.1 瑞氏染色法
4.1.1.1 病料觸片 先用鑷子夾持組織局部,然后以滅菌剪刀剪取一塊,夾出后以其新鮮切面在載玻片上壓印或涂成一薄層,室溫中自然干燥。
4.1.1.2 染色[2]室溫中自然干燥后,滴加瑞氏染色液于載玻片上,為了避免很快變干,染色液可稍多加,看情況補充滴加;經(jīng)10 min后直接用水沖洗,晾干,鏡檢,用油鏡觀察細菌形態(tài)、排列等??梢妰蓸O濃染的藍色卵圓形細菌。
4.1.2 革蘭氏染色法(復(fù)色染色法)
4.1.2.1 病料觸片 方法同4.1.1.1。
4.1.2.2 染色 在已干燥、固定的觸片上,滴加草酸銨結(jié)晶紫染色液,經(jīng)1~2 min,水洗。加革蘭氏碘液于觸片上媒染,經(jīng)1~3 min,水洗。加95%酒精于觸片上脫色,經(jīng)1 min,水洗。加10倍稀釋石炭酸復(fù)紅液復(fù)染1~2 min,水洗。吸干染液,鏡檢,可見兩極濃染的藍色卵圓形細菌。
將病料分別接種于有葡萄糖的營養(yǎng)肉湯中,在37℃下培養(yǎng)24 h,觀察細菌的生長情況,可見營養(yǎng)肉湯試管底生長成黏稠狀沉淀物,液體呈輕度渾濁,輕輕振搖則形成小辮樣盤旋的混懸液。釣取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物接種于鮮血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板上,置37℃保溫箱中培養(yǎng)24 h,鮮血瓊脂平板上見淡灰白色、表面光滑、閃光的露珠樣小菌落,菌落中間呈藍綠色、邊緣呈橘紅色、帶金光;在麥康凱瓊脂平板上未見細菌生長。
取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物注射到小白鼠皮下,劑量為0.5 mL/只。小白鼠多數(shù)24~48 h死亡,死后取其肺進行涂片,用美蘭染色后鏡檢,可見兩極濃染的藍色卵圓形細菌。對小白鼠進行剖解,在接種局部可見到肌肉及皮下組織發(fā)生水腫和炎灶;胸腔和心包有漿液性纖維素性滲出物;心外膜有大量出血點;淋巴結(jié)水腫并增大;肝臟淤血。
該巴氏桿菌能產(chǎn)生靛基質(zhì),M.R.試驗和V-P試驗均為陰性,能發(fā)酵葡萄糖和蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不能發(fā)酵乳糖、麥芽糖、棉實糖;石蕊牛乳呈中性。
根據(jù)疫情調(diào)查、臨床癥狀、流行病學(xué)、剖解變化可作出初步診斷,經(jīng)過細菌的分離培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)觀察、生化試驗、動物試驗,可診斷為牛多殺性巴氏桿菌病。
建議畜主用四環(huán)素配入5%葡萄糖生理鹽水中緩慢靜脈滴注,1次/d;同時用2.5%恩諾沙星按0.1~0.2 mL/kg體質(zhì)量進行肌肉注射,連用4 d,疫情可得到控制,或選用頭孢噻肟、美洛西林、丁胺卡那霉素進行肌肉注射(用藥量參照說明書)。利用恢復(fù)健康?;驗l死期屠宰犢牛的血清給患病牛進行注射,每頭20~40 mL/次,連用5 d,并及時對同群及本村牛只進行逐頭檢查,將可疑病牛和健康牛隔離。當(dāng)疫情緩解后,用該牛場分離的多殺性巴氏桿菌制成自家苗給奶牛接種,每頭5 mL。
預(yù)防措施主要包括加強飼養(yǎng)管理、對新進動物加強檢疫和護理、疫苗預(yù)防接種及患病動物的隔離和治療等綜合性預(yù)防措施[3]。
高度免疫血清也應(yīng)用于緊急接種,但免疫期僅10 d,可作為治療和預(yù)防接種。
對被污染場地欄舍及周圍環(huán)境用20%氫氧化鈉溶液全面消毒,每周1次,連續(xù)4次。并定期(每年2次)做好牛巴氏桿菌病的免疫。對病死牛只進行深埋,嚴禁死后出售。
采取上述措施后,其余牛再沒有發(fā)生死亡,該病得到了有效的控制。
該牛場地處山西省雁門關(guān)地區(qū),2006年5月上旬因氣溫下降出現(xiàn)降雪。由于巴氏桿菌病的發(fā)生與環(huán)境條件及動物抵抗力狀況緊密相關(guān),一切降低動物抵抗力的因素都會促使該病發(fā)生和流行。氣溫的突然下降導(dǎo)致動物抵抗力降低,使多殺性巴氏桿菌通過外源性和內(nèi)源性傳染侵入動物機體,很快通過淋巴結(jié)進入血液形成菌血癥,并可在24 h內(nèi)發(fā)展為敗血癥而死亡[4-5]。
該病臨床癥狀很容易與牛肺疫和牛惡性卡他熱相混淆[6],診斷時應(yīng)加以區(qū)別,有條件的應(yīng)進行實驗室診斷。
通過藥敏試驗篩選經(jīng)濟、療效好的高敏藥物進行治療,既可取得良好的治療效果,又可為以后該病的治療提供參考。
臨床藥物治療,除應(yīng)用抗菌素、高免血清及磺胺類藥物外,根據(jù)機體臨床癥狀,可結(jié)合支持療法和糾正酸堿、離子平衡及脫水等綜合治療措施。許多疾病常因脫水、酸、堿中毒和離子平衡失調(diào)等發(fā)生各種意外,使病情更加復(fù)雜。
臨床處理應(yīng)采取綜合性治療措施[7-10]:按傳染病流行特點隔離患病動物,以切斷病原微生物在動物中間通過空氣、污染物品進行傳播和流行的途徑;加強對患病動物的全面護理,以增強機體抵抗力。
綜上所述,對于牛多殺性巴氏桿菌應(yīng)采取以預(yù)防為主、治療為輔的防治措施。
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