曹弟勇,周燕知,吳丹陽,鄭 倩

(1.川北醫(yī)學院機能實驗中心;2.川北醫(yī)學院 2007級護理學院;3.川北醫(yī)學院 2007級臨床學院,四川 南充 637000)

缺氧實驗是機能實驗學中一個重要的基礎性實驗,缺氧瓶是該實驗中關鍵儀器。傳統(tǒng)缺氧瓶將鈉石灰放入瓶底(如圖 1),與實驗動物直接接觸,易受動物分泌物污染,每使用一次就需重新更換,這不僅造成了實驗藥品浪費,也加大了實驗準備人員的工作負擔。為此,本小組對缺氧瓶進行了改良,將鈉石灰分別置于廣口瓶上部和中部,并用改良后的缺氧瓶與傳統(tǒng)型缺氧瓶進行缺氧實驗,對實驗結果進行了對比研究。

1 材料和方法

1.1 實驗動物:30只健康小白鼠由川北醫(yī)學院動物實驗中心提供,雌雄不限,體重 25g±0.5g。

1.2 藥品:鈉石灰(H3Ca2NaO4)購自上海順強生物科技有限公司。

1.3 改良型缺氧瓶的制作:將細金屬濾網(wǎng)固定于廣口瓶的上部,鈉石灰置于濾網(wǎng)中,即得到改良 A型缺氧瓶(如圖 2);將鈉石灰密封包裹于干燥紗布內,用細線將包裹懸吊于廣口瓶中部,即得到改良 B型缺氧瓶(如圖 3)。

1.4 小鼠存活時間的測定:30只小白鼠隨機分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組,每組 10。三種類型缺氧瓶編號為 1-10號。Ⅰ組小白鼠分別放入 1-10號傳統(tǒng)型缺氧瓶,Ⅱ組小白鼠分別放入 1-10號改良 A型缺氧瓶,Ⅲ組小白鼠分別放入 1-10號改良 B型缺氧瓶中,同時塞緊瓶塞,用秒表分別記錄每組中各小白鼠存活時間,即從塞緊瓶塞到小白鼠死亡的時間。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計方法:數(shù)據(jù)處理采用 EXCEL2003統(tǒng)計軟件,小鼠平均存活時間的比較采用方差分析。

表1 各組小白鼠存活時間(分鐘)

2 結 果

傳統(tǒng)型缺氧瓶中小白鼠平均存活時間與改良 A型和 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶小鼠平均存活時間與改良 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),見表 1。

3 討 論

氧是維持生命活動所必需的物質,缺氧是存在于多種疾病中的基本病理過程之一,也是造成細胞損傷的重要原因,嚴重缺氧狀態(tài)下,機體可以在數(shù)分鐘內死亡[1-4]。

缺氧實驗的開設,在于幫助我們正確理解缺氧對機體的危害以及氧療在疾病治療中的重要意義[5]。缺氧瓶是缺氧實驗的關鍵儀器,動物在缺氧下的存活時間是實驗觀察的重要指標。為了消除二氧化碳吸入對動物存活時間的影響,需在瓶中加入鈉石灰以吸收呼出氣中二氧化碳。傳統(tǒng)缺氧瓶將鈉石灰置于瓶底與動物直接接觸,這樣就存在兩個問題:一是易受動物分泌物污染,影響二氧化碳的吸收效果;二是部分動物舔食鈉石灰,易致氣道阻塞。這兩個因素都可能導致或者加速動物的死亡,使小鼠在缺氧下存活的時間出現(xiàn)較大偏差。另外,每用完一次就需廢棄更換新的鈉石灰,這不僅造成了藥品的較多浪費,而且增加了實驗準備的工作量。

為了解決傳統(tǒng)缺氧瓶存在的弊病,降低儀器因素對實驗結果的影響,本小組對傳統(tǒng)缺氧瓶進行了改良,將鈉石灰置于缺氧瓶上部(改良 A型)或中部(改良 B型),并用傳統(tǒng)型缺氧瓶和改良型缺氧瓶同時進行缺氧實驗,對實驗結果進行對比研究,結果顯示,改良型缺氧瓶內小鼠平均存活時間與傳統(tǒng)型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶內小鼠平均存活時間與改良 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05)。標準差是反映所有觀察值與均數(shù)的平均離散程度的指標,其值越大,數(shù)據(jù)的離散程度就大[6]。本研究結果數(shù)據(jù)顯示,改良型缺氧瓶與傳統(tǒng)型缺氧瓶小鼠存活時間的標準差有明顯不同,前者較小(A型為 1.65,B型為 3.13),后者較大(為8.83),這說明改良型缺氧瓶對實驗結果的影響小,小鼠存活時間集中度好,實驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定,而傳統(tǒng)型缺氧瓶相對較差。

綜上結果,改良后的缺氧瓶將鈉石灰與小鼠隔離,很好的解決了傳統(tǒng)型缺氧瓶實驗中存在的兩大主要問題,能有效地消除實驗的誤差,數(shù)據(jù)穩(wěn)定性好,而且不受動物分泌物的影響,勿需用一次換一次,在一定程度上減少了藥品的浪費和實驗準備的工作量。另外,改良型缺氧瓶僅將鈉石灰放置的位置加以變更,無需增加過多的實驗經(jīng)費投入即可制作完成,在實驗中有重要的推廣價值。

[1] 王 晶,馮秀娟,張燕榮,等.急性缺氧對小鼠丘腦肥大細胞的影響[J].農(nóng)業(yè)科學研究,2008,29(4):55-58

[2] 劉淑英,梁西西,于洪川,等.小鼠急性缺氧后頸部淋巴結內肥大細胞的變化[J].寧夏大學學報(自然科學版),2009,30(1):69-71,80

[3] 于洪川,魏智清,張振漢,等.小鼠急性缺氧后肺內肥大細胞的變化[J].寧夏大學學報(自然科學版),2007,28(3):499-251

[4] 金惠銘,王建枝.病理生理學[M].第 6版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2006.76-87

[5] 鄭 倩.醫(yī)學機能實驗學[M].北京:科學出版社,2009.112-115

[6] 顏 虹.醫(yī)學統(tǒng)計學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.40-41