O同位素標記法標記蛋白質多肽"/>
摘 要 針對18O同位素標記反應兩個重要影響因素——肽段分散度和胰酶滅活方法,進行了標記條件的改進和滅活方法的優(yōu)化。在H218O中加入RapigestTM SF助溶劑并微波輔助加熱,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的標記效率得到明顯改進(18O/16O 峰面積比值>99%)。標記后,對胰酶進行還原烷基化化學修飾徹底滅活,使標記后的肽段穩(wěn)定性顯著提高,放置6 d不發(fā)生回交反應。對標準蛋白質甲狀腺球蛋白酶切肽段混合物標記后的質譜實驗結果表明:優(yōu)化的標記方法能快速穩(wěn)定地標記蛋白質酶切多肽。
關鍵詞 18O同位素標記;多肽;蛋白質組