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        伴大豆球蛋白亞基色譜分離和制備及結(jié)構(gòu)表征

        2010-04-12 00:00:00袁德保楊曉泉黃科禮
        分析化學(xué) 2010年6期

        摘 要研究了色譜方法對伴大豆球蛋白組成3個(gè)亞基的分離純化工藝條件,并利用圓二色光譜對純化得到的3個(gè)亞基的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。結(jié)果顯示:利用離子交換色譜(DEAE-sepharose fast flow, DEAE為二乙氨乙基)和金屬螯合層析(Immobilized metal affinity column, IMAC)相結(jié)合的方法,能將3個(gè)亞基組分完全分開,得到了能制備相對大量的3個(gè)亞基α′, α和 β的穩(wěn)定工藝,純度為95%,回收率達(dá)75%。遠(yuǎn)紫外CD結(jié)果顯示,在3個(gè)亞基的二級結(jié)構(gòu)中, α螺旋較少,但都具有較高含量的β折疊和無規(guī)卷曲; 近紫外CD結(jié)果顯示, 3個(gè)亞基在制備過程中因?yàn)槟蛩氐淖冃宰饔?,都已?jīng)散失了三級結(jié)構(gòu)。

        關(guān)鍵詞伴大豆球蛋白; 亞基; 純化; 結(jié)構(gòu)

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