摘 要以2.5 μm的單分散聚苯乙烯為種子,乙二醇二甲基丙烯酸酯 (EDMA)為交聯(lián)劑,甲苯和環(huán)己醇為致孔劑,采用“一步種子溶脹聚合法”制備了單分散微球; 再以過硫酸鉀為引發(fā)劑將水溶性溫敏單體N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)分子引發(fā)聚合到微球表面,制備了粒徑為7.0 μm、分散系數(shù)為0.02的單分散交聯(lián)溫敏色譜填料,溫敏單體NIPAM的接枝率為5.2%??疾炝嗽撎盍蠈藴实鞍踪|(zhì)的分離性能、溫敏性能、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性以及動態(tài)吸附容量對蛋白保留的影響。實驗結(jié)果表明,該色譜填料對蛋白的分離性能、溫敏性能、穩(wěn)定性及重現(xiàn)性良好,且對溶菌酶的動態(tài)吸附容量為32.3 mg/g。在疏水模式下,該填料不但可以同時基線分離5種標準蛋白,而且通過改變溫度可以有效地將3種在低溫下保留時間重疊的蛋白(細胞色素-C、β-乳球蛋白和核糖核酸酶)完全分離。
關(guān)鍵詞N-異丙基丙烯酰胺; 單分散溫敏色譜固定相; 蛋白質(zhì)分離