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(1.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院 婦產(chǎn)科，黑龍江 哈爾濱 150040)

子宮內膜異位癥(endometriosis,EM)多發(fā)于生育期婦女，臨床主要表現(xiàn)為痛經(jīng)、不孕和性交痛等，是一種良性疾病，卻有著一些類似惡性疾病的生物學特征。限制該疾病研究的一個主要原因是這種疾病僅發(fā)生于人類和靈長類動物。由于實際操作與倫理學方面的約束，很難在人體中進行內異癥的對照研究，更不能反復進行創(chuàng)傷性檢查，所以人們不停地在探索能夠復制該疾病的模型。動物模型種類有大鼠、小鼠、家免、獼猴、狒狒、小毛猴、巴馬香豬、雞胚尿素膜(CAM)等[1-5]。本文就EM動物模型應用研究進展，綜述如下。

1 在EM發(fā)病機制的應用研究

1.1 種植學說 Hooghe[6]成功地在狒狒體內將經(jīng)血中的子宮內膜自體移植入腹腔，并通過外源性激素的支持，使種植的內膜得以存活，該實驗有利地支持了子宮內膜種植學說。

宗利麗等[7]成功構建了獼猴模型,發(fā)現(xiàn)獼猴內膜異位生長，從大體形態(tài)到組織病理改變與人類子宮內膜異位癥很相似。腸套疊是實驗獼猴死亡的主要原因，說明子宮內膜種植在盆腔不僅僅產(chǎn)生盆腔黏連，對獼猴全身狀態(tài)均有明顯的影響，這一現(xiàn)象也為子宮內膜種植學說提供了一個客觀依據(jù)。

1.2 遺傳因素 宗利麗等[7]研究發(fā)現(xiàn)并不是所有異位的內膜均能形成內異癥，4只建模型的獼猴中有1只未形成盆腔內異癥，重要的是這只獼猴盆腔無任何黏連(對照獼猴有盆腔黏連)，此現(xiàn)象說明內異癥的發(fā)生與個體遺傳因素有關。

1.3 激素影響 通過在裸鼠腹腔種植培養(yǎng)的人子宮內膜細胞后發(fā)現(xiàn)，混合培養(yǎng)細胞未經(jīng)過任何處理，種植成功率為25%。種植前用孕激素處理細胞不影響種植成功率;而用雌激素處理后成功率提高達66%,證明雌激素能促進異位病灶的形成。異位子宮內膜中存在細胞色素芳香化酶p450的表達,可以促進局部雌激素產(chǎn)生增加[8]。這些實驗都提示EM是雌激素依賴性疾病。

1.4 免疫因素與炎癥 免疫因素在內異癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。NK細胞具有多種免疫功能，可殺傷和清除機體病原微生物及其他異物,在免疫監(jiān)護中起重要作用。Ota等[9]將EM大鼠模型的脾切除，并將脾細胞再注入大鼠靜脈中，然后測量脾細胞中NK細胞的活性；結果顯示該模型中NK細胞活性較正常大鼠明顯下降，但比未注入脾細胞的EM大鼠模型的NK細胞活性下降要小；證實EM大鼠中NK細胞活性下降，清除異位內膜的能力降低，使得異位內膜得以種植和生長。

補體C3在免疫反應中參與炎癥反應,可活化巨噬細胞、介導淋巴細胞功能。

1.5 血管形成和神經(jīng)因素 子宮組織在異位必須經(jīng)過“黏附、侵襲和血管形成”才能生存、生長[10]。異位灶的形成需要有血管的建立來提供能量。Gashaw等[11]應用狒狒模型研究發(fā)現(xiàn)，異位病灶內的血管生成因子前體CYR61水平升高，進一步認為,種植病灶存在反饋機制，升高了CYR61水平，促進了局部病灶的生長。微血管密度(MVD)是對新生血管生成做出定量描述的一個指標。張穎等[12]對皮下筋膜層與腹壁肌層之間移植自體子宮內膜制作的EM模型進行評估，檢測EM模型大鼠的在位與異位子宮內膜MVD的變化,發(fā)現(xiàn)異位內膜病灶區(qū)的MVD值明顯增高，證實病灶的出現(xiàn)及維持與局部血供密切相關。

Berkley等[13]將大鼠自體子宮內膜移植于腸系膜根部血管周圍誘導EM模型,證實異位內膜生長過程中不但形成本體感覺神經(jīng)，而且有交感神經(jīng)傳出。這些神經(jīng)不僅導致EM相關的癥狀，且可能維持著異位病灶的生長。并且這些大鼠都表現(xiàn)有陰道痛覺增敏。

另外,近年已有學者將EM的機制研究深入到基因水平。Konno等[14]進行自體子宮移植建立SD大鼠EM模型，進行病灶和子宮cDNA微陳列比對，發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白、Lyn、Vav 1、Runx1以及I-選擇蛋白的cDNA量明顯增高，認為其在EM的發(fā)病中發(fā)揮作用。

2 在EM引起不孕的應用研究

史常旭[15-16]報道EM患者腹腔液在不孕中的作用，將患EM而不孕婦女的腹腔液作用于小鼠的胚胎植入期，小鼠的植入數(shù)減少且白細胞抑制因子在植入時表達。觀察腹腔液涂片，模型鼠腹腔液巨噬細胞增多，同時被包裹的卵泡液中亦見大量的巨噬細胞、淋巴細胞和粒細胞。說明EM的腹腔液對不孕有一定的作用。

LUFS(黃素化未破裂卵泡綜合征)是引起不孕癥的原因之一。徐邦生等[17]對EM模型鼠進行觀察，發(fā)現(xiàn)大量的卵泡液被結締組織包裹，卵泡液不能排出。

3 在EM治療方面的應用研究

Efstathiou等[18]證實，不同非甾體抗炎藥抑制病灶生長的程度不同，而且不影響小鼠的發(fā)情周期。與控制組相比，塞來昔布、消炎痛、萘普生、樞力達、羅非昔布、布洛芬均不同程度減小了病灶面積。而阿司匹林無明顯療效。建議臨床醫(yī)生應選擇性應用非甾體抗炎藥，以達到抑制病灶的最大療效。

徐穎等[19]用大鼠模型做研究發(fā)現(xiàn)，芳香化酶抑制劑單用及聯(lián)合環(huán)氧化酶抑制劑治療可短暫(1周)降低大鼠血清雌激素水平，但隨著治療時間的延長(4周)該作用消失而使血清雌激素水平恢復至與未治療組相近。鼠類雌激素主要來源于卵巢，說明芳香化酶抑制劑并不能徹底抑制卵巢來源的雌激素水平。單用芳香化酶抑制劑、聯(lián)合環(huán)氧化酶抑制劑治療均使異位囊腫縮小，聯(lián)合治療囊腫消失率高于單用組。

動物模型對EM研究意義重大，克服了許多對人體進行直接研究的實踐問題。但在選擇動物模型時要權衡各種模型的利弊，充分發(fā)揮不同動物模型的長處，為臨床研究提供指導。

[1]易曉芳,徐叢劍,劉惜時.子宮內膜異位癥動物模型的研究進展[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2001,10(4):291-293.

[2]劉學軍,何援利.子宮內膜異位癥動物模型的建立及應用[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2002,18(7):444-445.

[3]Einspanier A,Lieder K,Bruns A,et al.Induction of endometri osis in the marmoset monkey(Callithrix jacchus) [J].Mol Hum Reprod,2006,12(5):291-299.

[4]羅剛,張樂,劉連生,等.我國實驗用小型豬的應用研究前景[J].實驗動物科學與管理,2004,6(2):37-38.

[5]馬玉霞,王琳,孔燕,等.巴馬香豬腹腔皮下種植子宮內膜建立子宮內膜異位癥模型的研究[J].第三軍醫(yī)大學學報,2008,30:530-532.

[6]D'Hooghe TM,Bambra CS,Raeymaekers BM,et al.Intrapelvic injection of menstrual endometrium causes endometriosis in baboons(Papio cynocephalus and Papio anubis).Am J Obstet Gynecol,1995,173(1):125.

[7]宗利麗,李亞里,汪龍霞,等.子宮內膜異位癥獼猴動物模型的建立[J].第一軍醫(yī)大學學報,2003,23(10):1006-1009.

[8]Zheng Hui,LiHongyi,et al.A study on the an imalmodel of experim ental endom etriosis [J].AnatRes,2002,23:114-11.8.

[9]Ota,H irotaka,Rong,et al Suppression of natural killer cell activity by splenocyte transplantation in a ratmodel of endometriosis [J].Copyright Oxford University press,2002,17(6):1453.

[10]郎景和.子宮內膜異位癥研究的新里程[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2005,40(1):3-4.

[11]GashawI,Hasting JM,Jackson KS,et al.Induced endometriosis in the baboon(Papioanubis)increases the expression of the proangio-genic factor CYR61(CCN1)in eutopic and ectopic endometrial [J].Biol Reprod,2006,74(6):1060-1066.

[12]張穎,曹洪,張昌軍.改良大鼠子宮內膜異位癥模型的建立及微血管密度觀察[J].中國實驗動物學報,2008,16(1):56-58.

[13]Berkley KJ,Dmitrieva N,Curtis KS,et al.Innervation of ectopic endometriumin a rat model of endometriosis[J].Proc Natl Acad Sci USA,2004,101(30):11094-11098.

[14]Konno R,Fujiwara H,Netsu S,et al.Gene expression profiling of the rat endometriosis mode[J].Am J Reprod Immunol,2007,58(4):330-343.

[15]史常旭.子宮內膜異位癥患者腹腔液在不孕中的作用[J].第三軍醫(yī)大學學報,2002,24(1):100.

[16]Illera M J,Juan L,Stew art CL,et al.Effect of peritoneal fluid from women with endometriosis on implantation in the mouse model[J].Fertil-Steril,2000,74(1):41.

[17]徐邦生,魯曉燕,蔡云平,等.大鼠與兔子宮內膜異位動物模型的比較[J].南通醫(yī)學院學報,2003,23(1):31-33.

[18]Efstathiou JA,Sampson DA,Levine Z,et al.Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model[J].Fertil Steril,2005,83(1):171-181.

[19]徐穎,鄭志群,馬炎輝.芳香化酶及環(huán)氧化酶抑制劑對大鼠子宮內膜異位癥模型的作用[J].生殖與避孕,2005,25(9):520-526.