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        3種車(chē)前草穗中總黃酮含量的測(cè)定

        2010-04-03 05:48:25,,
        關(guān)鍵詞:黃酮中藥

        ,,

        (1.濱州醫(yī)學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264003;2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)煙臺(tái)研究院,山東 煙臺(tái) 264003)

        車(chē)前草是車(chē)前科車(chē)前屬植物,又稱車(chē)前菜、牛舌草、車(chē)輪菜、豬耳草等。車(chē)前全身是寶,嫩可食用,成可入藥。車(chē)前作為一味常用中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品,被國(guó)家衛(wèi)生部列入可用于保健品生產(chǎn)的原料名單。車(chē)前味甘、寒,無(wú)毒,具有清熱解毒、祛痰、止咳、利尿等作用,主氣癃止痛,利水通小便,除濕痹,久服輕身耐老?,F(xiàn)代藥理研究表明,車(chē)前全草中主要有效成分為烏蘇酸、車(chē)前苷、環(huán)烯醚苷類、黃酮類成分[1-4]。其中黃酮類化合物為鎮(zhèn)咳主要成分,車(chē)前草中的黃酮及其苷類對(duì)呼吸系統(tǒng)有著明顯的作用[5]。車(chē)前苷作用于呼吸中樞,具有明顯的鎮(zhèn)咳作用,通過(guò)興奮分泌神經(jīng)可促進(jìn)氣管、支氣管液及消化液的分泌,且無(wú)溶血作用。苯乙??Х弱L酋ヮ惢衔锬軌蛞种骗h(huán)腺苷酸磷酸二酯酶與5-脂氧合酶,說(shuō)明總黃酮類物質(zhì)是車(chē)前鎮(zhèn)咳抗炎活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)[6-9]。車(chē)前科植物有3屬約260種。而我國(guó)僅有車(chē)前屬1屬,13種[10]。目前開(kāi)發(fā)用于藥用的主要是車(chē)前(plantagoasiaticalL.)、平車(chē)前(PlantagodepresaaWilld.)和大車(chē)前(PlantagomajorL.)[11]。但是在不同植物體內(nèi),總黃酮的含量可能不同,這對(duì)于藥材的采集及中藥有效成分的提取都具有至關(guān)重要的關(guān)系[12]。因此本文選取車(chē)前、平車(chē)前和大車(chē)前為供試材料,通過(guò)對(duì)3種車(chē)前穗中總黃酮含量的比較研究,為中藥有效成分提取及車(chē)前草的開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

        1 材料與儀器

        722型分光光度計(jì)(上海分析儀器廠),試劑標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水。所用車(chē)前,7月采集于本地,自然晾干,待用。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 總黃酮的提取[13]分別精密稱取大車(chē)前、車(chē)前和平車(chē)前穗各1 g于索氏提取器中,加入70%的乙醇100 mL及少許CaCO3,提取8 h,提取液減壓濃縮蒸去乙醇。濃縮液于分液漏斗中用相同體積的乙醚洗2~3次,以除葉綠素及臘質(zhì)等,然后用70%的乙醇定容至100 mL,待測(cè)。

        2.2 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[13]精密稱取蘆丁10 mg,用70%的乙醇溶解并定容至100 mL,使其濃度為100 μg/mL。將蘆丁溶液用70%的乙醇稀釋成0,5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95,100 μg/mL,各取1 mL于試管中,加70%的乙醇1 mL,加入300 μL 5%的NaNO2,6 min后加入300 μL 10%的Al(NO3)3溶液,6 min后再加入2 mL 4% NaOH,10 min后于分光光度計(jì)波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定A值。繪制濃度CA標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        2.3 總黃酮含量的測(cè)定[13]取經(jīng)稀釋過(guò)的樣品溶液各1 mL,按上述同樣的步驟和方法測(cè)定得A值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品中總黃酮的含量(μg/mL),計(jì)算每克干物質(zhì)中總黃酮含量(μg/g),測(cè)得大車(chē)前、車(chē)前和平車(chē)前干穗中總黃酮含量分別為65 415.4,9 913.6,1 145.3 μg/g。

        2.4 精密度試驗(yàn) 精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液2.0 mL,按2.2項(xiàng)下方法連續(xù)測(cè)定6次,測(cè)定其吸收度后RSD=0.32 %(n=6)。表明儀器精密度良好。

        3 結(jié)語(yǔ)

        黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖、鎮(zhèn)咳抗炎等多種生理活性,是中藥車(chē)前重要的有效成分之一。分析結(jié)果顯示,3種車(chē)前草穗中大車(chē)前總黃酮含量較高,其次為車(chē)前和平車(chē)前。因此,就總黃酮類化合物而言,這3種車(chē)前草均可進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用,其中以大車(chē)前為優(yōu)先品種。

        [1]萬(wàn)茵,謝明勇,梁麗軍,戴和萍.車(chē)前子總黃酮的提取工藝優(yōu)化及體外抗氧化作用研究[J].食品科學(xué),2006,27(12):373-376.

        [2]姚曉惠.車(chē)前草藥用功效與有效成分測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(4):1053-1054,1062.

        [3]魯建江,王莉,劉志勇,等.車(chē)前草中總黃酮的微波提取及含量測(cè)定[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2002,30(1):34.

        [4]周清華.辨證治療泌尿系結(jié)石的臨床體會(huì)[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,25(2):221-222.

        [5]蔣琴芳.車(chē)前子臨床應(yīng)用偶拾[J].吉林中醫(yī)藥,2005,25(10):51-52.

        [6]高學(xué)敏.中藥學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2002.

        [7]姚曉惠.車(chē)前草藥用功效與有效成分測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(4):1053-1054.

        [8]季大洪,肖振宇.中藥車(chē)前研究與應(yīng)用概況[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2001,19(6):361-362.

        [9]譚萍,李煜.3種車(chē)前草葉片總黃酮的含量測(cè)定[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,17(1):54.

        [10]陳漢斌.山東植物志[M].濟(jì)南:山東科技出版社,1992:1174.

        [11]《中華本草》編委會(huì).中華本草[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社.1999:517-521.

        [12]林鶯,王 恩,張小華,等.中藥平車(chē)前不同部位總黃酮含量測(cè)定[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,26(1):129-130.

        [13]張志良,翟偉箐.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:高等教育出版社,2003:173.

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