李占富 宮宏亮

（1、五常市林業(yè)局森林病蟲防治檢疫站，黑龍江 五常 150200 2、五常市林業(yè)局，黑龍江 五常 150200）

1 室內(nèi)試驗研究方法

農(nóng)藥的室內(nèi)試驗主要是測定一種藥劑的毒性、毒力或比較幾種藥劑的毒力的大小，也可以在一定程度上測定藥劑的藥效，室內(nèi)試驗的結(jié)果除可作為藥劑初步篩選的依據(jù)，還可以作為田問試驗的參考材料，在一定情況下，有時在田問發(fā)現(xiàn)的問題必須事回室內(nèi)作比較梢細的試驗研究.由此看來，兩者是互相補充、互相配合的，也只有這樣才能對農(nóng)藥有全面的了解。

室內(nèi)試驗的優(yōu)點是：

①一般應用室內(nèi)飼育或培養(yǎng)的生物作為研究對象.由于飼育或培養(yǎng)的條件比較一致，獲得的供試生物的生理狀態(tài)也近似一致，從而減少了個體間的差異，因此毒力測定的結(jié)果較為準確。

②可以控制環(huán)境條件，便于在一定溫度、濕度下進行比較。

③可以控制藥量、均勻度，節(jié)省人力、物力、并可以同時比較多種藥劑及各種濃度的效果，能較快地得到比較準確的試驗結(jié)果。

室內(nèi)試驗的這些優(yōu)點也帶來了另一方面的缺點，如室內(nèi)的環(huán)境條件、室內(nèi)飼養(yǎng)的生物及用藥方式等均與田問差異較大，其試驗結(jié)果不能完全反映田間條件下的實際情況，所以不能以室內(nèi)工作完全代替田間試驗，因此，要先在空內(nèi)控制條件下進行藥劑毒力試驗，選擇有效的藥劑和濃度，然后再做野外田間試驗，以作出最后鑒定。

1.1 孢子萌發(fā)法

孢子萌發(fā)法是室內(nèi)測定抑茵作用通常采用的一種方法。測定的步驟是先將藥劑的溶液或懸浮液與孢子懸浮液混合，然后滴在玻璃載片上或裝在小試管或小燒杯中，放在適當?shù)臈l件下使之萌發(fā)，經(jīng)過一定時間.觀察孢子的萌發(fā)率。此外，先用藥劑處理玻璃裁片，然后滴加孢子懸液的方法也常被應用，如野外施放硫磺煙劑常用此法檢驗藥效，藥劑處理玻璃載片的方法是將藥劑經(jīng)噴筒噴灑、浸漬、吸管滴加或噴霧處理.其中噴霧法的效果為最好，而利用噴霧塔控制沉量及噴灑時間，可以在玻璃載片上獲得十分均勻的藥量，當載片上的藥液干燥后，即可滴加孢子懸液，然后放置在適當?shù)臈l件下測定孢子的萌發(fā)情況.另一種做法是將藥液直接滴在玻璃片的小洼或所謂小島上，然后加進孢子，這個方法較為筒單，無需特別的噴藥裝置，且可克服藥液在玻璃片上易于流失的缺點。

1.2 抑制菌圈法

將病原菌孢子或菌絲體的懸浮液與培養(yǎng)基(冷卻至45℃為宜)混合，傾入培養(yǎng)皿內(nèi)，冷卻凝固后，在培養(yǎng)基平面上放上蘸有不問濃度藥劑的小片消過毒的圓形濾紙，或用消過毒的木塞鉆孔器從培養(yǎng)基平面上切去小塊培養(yǎng)基，然后往切口中加入供試藥劑.經(jīng)過一定時間后.根據(jù)抑制圈大小，可以測定供試藥劑的毒性強弱。試驗結(jié)果可繪制抑制圈直徑平方或抑制圈面積—濃度對數(shù)毒力曲線。

1.3 培養(yǎng)基加藥法

可以測定藥劑對真菌孢子萌發(fā)、菌絲體生長以及細菌生長的抑制毒力。根據(jù)測定的對象不同，配制適于供試病菌生長的培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌后冷卻到45℃，倒人含有不同濃度藥液的培養(yǎng)皿內(nèi)，凝固后，在培養(yǎng)基平面上接供試病菌，在定溫條件下培養(yǎng)一定時間后(24-48h)，用顯微鏡檢查孢子萌發(fā)率、觀察菌落生長情況或記載菌絲體生長直徑，并與不含藥劑的對照組的生長發(fā)育情況相比較。

2 林間藥效測定方法

寶內(nèi)試驗通常為藥劑毒力的初少測定.而林間試驗則是空內(nèi)試驗的擴展與繼續(xù)。林間試驗除了對新藥劑在室內(nèi)試驗結(jié)果作進一步的驗證外。也可比較幾種農(nóng)藥在室外的防治效果或比較已肯定有防效的農(nóng)藥在不同地區(qū)的殺蟲、防病能力.因林間試驗的自然條件比較復雜，如氣象、土壤、地區(qū)或歷年環(huán)境條件的不同，常使試驗結(jié)果有差異，因此，必須通過林間藥效試驗，才能確定藥劑的最適宜的使用時期、應用次數(shù)和使用方式方法等，所以說林間試驗對于直接指導林業(yè)生產(chǎn)實踐具有特別重要的意義。

3 農(nóng)藥對植物的藥害及對溫血動物毒害的測定方法

一種化合物經(jīng)測定對病蟲害有毒性之后，還要經(jīng)過對植物的藥害及對溫血動物的毒害測定，方能正式推廣使用。一種對林木引起藥害的化合物顯然不能用于林木上，這就是為什么很多種砷化物、氯化物沒有被采用的原因(在特殊條件下，可用做毒餌)；一種對人畜毒性過高的化合物也不適于作為殺蟲或殺菌劑.這就是對硫磷、內(nèi)吸磷等有機磷殺蟲劑逐漸被樂果、敵百蟲等所替代的原因。為此，在農(nóng)藥毒力和藥效測定中，一般在最后總要測定一下它們對植物的藥害及對溫血動物的毒害程度。

對植物藥害的測定方法

作為殺蟲劑或殺茵劑不但應具有較高的防治病蟲害的效力，還應具有對植物不易產(chǎn)生藥害的優(yōu)點。藥劑使植物體發(fā)生藥害的原因比較復雜，大致分為物理和化學兩種作用。物理作用是藥劑使植物的皮孔或氣孔堵塞，因而妨礙了植物正常的呼吸及蒸發(fā)，使植物的光合作用或其它新陳代謝作用失常；化學作用是由于藥劑中的化學成分同植物細胞內(nèi)含物質(zhì)起化學反應，破壞了正常的生理活動。藥劑對植物藥害的主要因素包括藥劑的理化性狀 (水溶性和脂溶性等)。藥劑的加工形式(包括填料的種類和細度)及使用劑型(包括粉劑、乳油、油劑等)等。一般粉劑對植物不易產(chǎn)生藥窖，而油劑最易發(fā)生藥害。兩方面的作用都能影響到植物遭受藥害的程度。有的藥劑在一定的使用劑量下對植物生長發(fā)育有促進作用，以致有增加產(chǎn)量的效果；有的則不然。藥劑對植物要害的測定方法基本上可分為兩類：直接對植物施藥（噴粉或噴霧，主要是噴霧）；對種子發(fā)芽的藥害測定。

4 毒力的表示和分析方法

農(nóng)藥的殺蟲或殺菌毒力即毒性程度，常用“致死中量”表示.“致死中量”即殺死種群半數(shù)(50%)所需用的劑量。藥劑的毒力一般均以劑量與生物的關(guān)系來表示。在生物學中刺激與反應的關(guān)系有兩種表現(xiàn)方式：(1)漸進關(guān)系，即刺激增大一些，反應也就相應地增大一些；(2)限閾關(guān)系；即刺激有一個限閾值，在限閾值之下的刺激不引起反應，而在這限閥值之上的刺激不論多大.都引起同樣的反應。后一種方式也就是“全或無”的方式。殺蟲劑對昆蟲的關(guān)系也是這樣，在一定限閾值之下的劑量對昆蟲沒有影響，而在限閾值之上的劑量都引起死亡，因此這里只有死亡與不死亡兩種方式。殺茵劑與病菌的關(guān)系則表現(xiàn)為漸進關(guān)系，隨藥劑的濃度增加，病菌生長相應減弱，而菌孢子表現(xiàn)為“萌發(fā)正?！薄ⅰ懊劝l(fā)不正?！奔啊安幻劝l(fā)”等，茵絲體表現(xiàn)出繼續(xù)擴展或停止擴展等狀況.此外，如病菌對寄主產(chǎn)生嫂侵染，寄主感病后所表現(xiàn)的被害性都可看做是對藥劑毒力的不同反應結(jié)果。

5 生物統(tǒng)計在藥效測定上的應用

在藥劑的室內(nèi)外藥效測定中，除了技術(shù)、儀器的差別外，由于生物個體的內(nèi)在差別及外在條件的不同也表現(xiàn)為生物學上的差異.因此試驗結(jié)果的誤差是不可避免的，為了使試驗誤差減少到最小，在處理時必須設(shè)有多次重復，每種處理中必須有相當數(shù)量的供試生物個體，在同次試驗中應設(shè)對照，這樣，試驗所得的結(jié)果在未經(jīng)處理前是一些凌亂的數(shù)字，需要利用生物統(tǒng)計的方法整理和分析試驗所獲得的結(jié)果，以提高試驗的精確程度.這有助于數(shù)量資料的歸納，有助于試驗結(jié)果的判斷，換言之，有助于規(guī)律的揭示、證實和表述。

6 結(jié)語

研究藥劑對林業(yè)害蟲和病原茵的作用，必須把藥劑的“毒力”與“藥效”區(qū)別開來.毒力系指毒劑本身對生物體影響的性質(zhì)及其程度，是比較單純的現(xiàn)象，藥效除了毒劑本身所發(fā)生的毒力外。還包括許多其它因素，如毒劑粒子的大小，附著量，分布于昆蟲、病原體或植物表面的情況及環(huán)境條件等，是各因素綜合地作用于生物的結(jié)果，是比較復雜的，通常田間藥劑試驗在很大程度上只是藥劑的藥效測定，當然也包括對某些毒力的研究，在植保工作中，對藥劑藥效的研究比單純的毒力研究更具有實際意義。

[1]張澤溥等.殺蟲劑及殺菌劑的生物測定，中國工業(yè)出版社.1963

[2]屠豫欽.農(nóng)藥的化學鑒定和生物鑒定，中國青年出版社.1960.

[3]張宗炳，殺蟲劑的毒力測定，科學出版社，1988.