李占富 宮宏亮

（1、五常市林業(yè)局森林病蟲防治檢疫站，黑龍江 五常 150200 2、五常市林業(yè)局，黑龍江 五常 150200）

1 室內(nèi)試驗(yàn)研究方法

農(nóng)藥的室內(nèi)試驗(yàn)主要是測(cè)定一種藥劑的毒性、毒力或比較幾種藥劑的毒力的大小，也可以在一定程度上測(cè)定藥劑的藥效，室內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果除可作為藥劑初步篩選的依據(jù)，還可以作為田問(wèn)試驗(yàn)的參考材料，在一定情況下，有時(shí)在田問(wèn)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題必須事回室內(nèi)作比較梢細(xì)的試驗(yàn)研究.由此看來(lái)，兩者是互相補(bǔ)充、互相配合的，也只有這樣才能對(duì)農(nóng)藥有全面的了解。

室內(nèi)試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是：

①一般應(yīng)用室內(nèi)飼育或培養(yǎng)的生物作為研究對(duì)象.由于飼育或培養(yǎng)的條件比較一致，獲得的供試生物的生理狀態(tài)也近似一致，從而減少了個(gè)體間的差異，因此毒力測(cè)定的結(jié)果較為準(zhǔn)確。

②可以控制環(huán)境條件，便于在一定溫度、濕度下進(jìn)行比較。

③可以控制藥量、均勻度，節(jié)省人力、物力、并可以同時(shí)比較多種藥劑及各種濃度的效果，能較快地得到比較準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果。

室內(nèi)試驗(yàn)的這些優(yōu)點(diǎn)也帶來(lái)了另一方面的缺點(diǎn)，如室內(nèi)的環(huán)境條件、室內(nèi)飼養(yǎng)的生物及用藥方式等均與田問(wèn)差異較大，其試驗(yàn)結(jié)果不能完全反映田間條件下的實(shí)際情況，所以不能以室內(nèi)工作完全代替田間試驗(yàn)，因此，要先在空內(nèi)控制條件下進(jìn)行藥劑毒力試驗(yàn)，選擇有效的藥劑和濃度，然后再做野外田間試驗(yàn)，以作出最后鑒定。

1.1 孢子萌發(fā)法

孢子萌發(fā)法是室內(nèi)測(cè)定抑茵作用通常采用的一種方法。測(cè)定的步驟是先將藥劑的溶液或懸浮液與孢子懸浮液混合，然后滴在玻璃載片上或裝在小試管或小燒杯中，放在適當(dāng)?shù)臈l件下使之萌發(fā)，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間.觀察孢子的萌發(fā)率。此外，先用藥劑處理玻璃裁片，然后滴加孢子懸液的方法也常被應(yīng)用，如野外施放硫磺煙劑常用此法檢驗(yàn)藥效，藥劑處理玻璃載片的方法是將藥劑經(jīng)噴筒噴灑、浸漬、吸管滴加或噴霧處理.其中噴霧法的效果為最好，而利用噴霧塔控制沉量及噴灑時(shí)間，可以在玻璃載片上獲得十分均勻的藥量，當(dāng)載片上的藥液干燥后，即可滴加孢子懸液，然后放置在適當(dāng)?shù)臈l件下測(cè)定孢子的萌發(fā)情況.另一種做法是將藥液直接滴在玻璃片的小洼或所謂小島上，然后加進(jìn)孢子，這個(gè)方法較為筒單，無(wú)需特別的噴藥裝置，且可克服藥液在玻璃片上易于流失的缺點(diǎn)。

1.2 抑制菌圈法

將病原菌孢子或菌絲體的懸浮液與培養(yǎng)基(冷卻至45℃為宜)混合，傾入培養(yǎng)皿內(nèi)，冷卻凝固后，在培養(yǎng)基平面上放上蘸有不問(wèn)濃度藥劑的小片消過(guò)毒的圓形濾紙，或用消過(guò)毒的木塞鉆孔器從培養(yǎng)基平面上切去小塊培養(yǎng)基，然后往切口中加入供試藥劑.經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后.根據(jù)抑制圈大小，可以測(cè)定供試藥劑的毒性強(qiáng)弱。試驗(yàn)結(jié)果可繪制抑制圈直徑平方或抑制圈面積—濃度對(duì)數(shù)毒力曲線。

1.3 培養(yǎng)基加藥法

可以測(cè)定藥劑對(duì)真菌孢子萌發(fā)、菌絲體生長(zhǎng)以及細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制毒力。根據(jù)測(cè)定的對(duì)象不同，配制適于供試病菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌后冷卻到45℃，倒人含有不同濃度藥液的培養(yǎng)皿內(nèi)，凝固后，在培養(yǎng)基平面上接供試病菌，在定溫條件下培養(yǎng)一定時(shí)間后(24-48h)，用顯微鏡檢查孢子萌發(fā)率、觀察菌落生長(zhǎng)情況或記載菌絲體生長(zhǎng)直徑，并與不含藥劑的對(duì)照組的生長(zhǎng)發(fā)育情況相比較。

2 林間藥效測(cè)定方法

寶內(nèi)試驗(yàn)通常為藥劑毒力的初少測(cè)定.而林間試驗(yàn)則是空內(nèi)試驗(yàn)的擴(kuò)展與繼續(xù)。林間試驗(yàn)除了對(duì)新藥劑在室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果作進(jìn)一步的驗(yàn)證外。也可比較幾種農(nóng)藥在室外的防治效果或比較已肯定有防效的農(nóng)藥在不同地區(qū)的殺蟲、防病能力.因林間試驗(yàn)的自然條件比較復(fù)雜，如氣象、土壤、地區(qū)或歷年環(huán)境條件的不同，常使試驗(yàn)結(jié)果有差異，因此，必須通過(guò)林間藥效試驗(yàn)，才能確定藥劑的最適宜的使用時(shí)期、應(yīng)用次數(shù)和使用方式方法等，所以說(shuō)林間試驗(yàn)對(duì)于直接指導(dǎo)林業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐具有特別重要的意義。

3 農(nóng)藥對(duì)植物的藥害及對(duì)溫血?jiǎng)游锒竞Φ臏y(cè)定方法

一種化合物經(jīng)測(cè)定對(duì)病蟲害有毒性之后，還要經(jīng)過(guò)對(duì)植物的藥害及對(duì)溫血?jiǎng)游锏亩竞y(cè)定，方能正式推廣使用。一種對(duì)林木引起藥害的化合物顯然不能用于林木上，這就是為什么很多種砷化物、氯化物沒(méi)有被采用的原因(在特殊條件下，可用做毒餌)；一種對(duì)人畜毒性過(guò)高的化合物也不適于作為殺蟲或殺菌劑.這就是對(duì)硫磷、內(nèi)吸磷等有機(jī)磷殺蟲劑逐漸被樂(lè)果、敵百蟲等所替代的原因。為此，在農(nóng)藥毒力和藥效測(cè)定中，一般在最后總要測(cè)定一下它們對(duì)植物的藥害及對(duì)溫血?jiǎng)游锏亩竞Τ潭取?/p>

對(duì)植物藥害的測(cè)定方法

作為殺蟲劑或殺茵劑不但應(yīng)具有較高的防治病蟲害的效力，還應(yīng)具有對(duì)植物不易產(chǎn)生藥害的優(yōu)點(diǎn)。藥劑使植物體發(fā)生藥害的原因比較復(fù)雜，大致分為物理和化學(xué)兩種作用。物理作用是藥劑使植物的皮孔或氣孔堵塞，因而妨礙了植物正常的呼吸及蒸發(fā)，使植物的光合作用或其它新陳代謝作用失常；化學(xué)作用是由于藥劑中的化學(xué)成分同植物細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)，破壞了正常的生理活動(dòng)。藥劑對(duì)植物藥害的主要因素包括藥劑的理化性狀 (水溶性和脂溶性等)。藥劑的加工形式(包括填料的種類和細(xì)度)及使用劑型(包括粉劑、乳油、油劑等)等。一般粉劑對(duì)植物不易產(chǎn)生藥窖，而油劑最易發(fā)生藥害。兩方面的作用都能影響到植物遭受藥害的程度。有的藥劑在一定的使用劑量下對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有促進(jìn)作用，以致有增加產(chǎn)量的效果；有的則不然。藥劑對(duì)植物要害的測(cè)定方法基本上可分為兩類：直接對(duì)植物施藥（噴粉或噴霧，主要是噴霧）；對(duì)種子發(fā)芽的藥害測(cè)定。

4 毒力的表示和分析方法

農(nóng)藥的殺蟲或殺菌毒力即毒性程度，常用“致死中量”表示.“致死中量”即殺死種群半數(shù)(50%)所需用的劑量。藥劑的毒力一般均以劑量與生物的關(guān)系來(lái)表示。在生物學(xué)中刺激與反應(yīng)的關(guān)系有兩種表現(xiàn)方式：(1)漸進(jìn)關(guān)系，即刺激增大一些，反應(yīng)也就相應(yīng)地增大一些；(2)限閾關(guān)系；即刺激有一個(gè)限閾值，在限閾值之下的刺激不引起反應(yīng)，而在這限閥值之上的刺激不論多大.都引起同樣的反應(yīng)。后一種方式也就是“全或無(wú)”的方式。殺蟲劑對(duì)昆蟲的關(guān)系也是這樣，在一定限閾值之下的劑量對(duì)昆蟲沒(méi)有影響，而在限閾值之上的劑量都引起死亡，因此這里只有死亡與不死亡兩種方式。殺茵劑與病菌的關(guān)系則表現(xiàn)為漸進(jìn)關(guān)系，隨藥劑的濃度增加，病菌生長(zhǎng)相應(yīng)減弱，而菌孢子表現(xiàn)為“萌發(fā)正常”、“萌發(fā)不正?！奔啊安幻劝l(fā)”等，茵絲體表現(xiàn)出繼續(xù)擴(kuò)展或停止擴(kuò)展等狀況.此外，如病菌對(duì)寄主產(chǎn)生嫂侵染，寄主感病后所表現(xiàn)的被害性都可看做是對(duì)藥劑毒力的不同反應(yīng)結(jié)果。

5 生物統(tǒng)計(jì)在藥效測(cè)定上的應(yīng)用

在藥劑的室內(nèi)外藥效測(cè)定中，除了技術(shù)、儀器的差別外，由于生物個(gè)體的內(nèi)在差別及外在條件的不同也表現(xiàn)為生物學(xué)上的差異.因此試驗(yàn)結(jié)果的誤差是不可避免的，為了使試驗(yàn)誤差減少到最小，在處理時(shí)必須設(shè)有多次重復(fù)，每種處理中必須有相當(dāng)數(shù)量的供試生物個(gè)體，在同次試驗(yàn)中應(yīng)設(shè)對(duì)照，這樣，試驗(yàn)所得的結(jié)果在未經(jīng)處理前是一些凌亂的數(shù)字，需要利用生物統(tǒng)計(jì)的方法整理和分析試驗(yàn)所獲得的結(jié)果，以提高試驗(yàn)的精確程度.這有助于數(shù)量資料的歸納，有助于試驗(yàn)結(jié)果的判斷，換言之，有助于規(guī)律的揭示、證實(shí)和表述。

6 結(jié)語(yǔ)

研究藥劑對(duì)林業(yè)害蟲和病原茵的作用，必須把藥劑的“毒力”與“藥效”區(qū)別開來(lái).毒力系指毒劑本身對(duì)生物體影響的性質(zhì)及其程度，是比較單純的現(xiàn)象，藥效除了毒劑本身所發(fā)生的毒力外。還包括許多其它因素，如毒劑粒子的大小，附著量，分布于昆蟲、病原體或植物表面的情況及環(huán)境條件等，是各因素綜合地作用于生物的結(jié)果，是比較復(fù)雜的，通常田間藥劑試驗(yàn)在很大程度上只是藥劑的藥效測(cè)定，當(dāng)然也包括對(duì)某些毒力的研究，在植保工作中，對(duì)藥劑藥效的研究比單純的毒力研究更具有實(shí)際意義。

[1]張澤溥等.殺蟲劑及殺菌劑的生物測(cè)定，中國(guó)工業(yè)出版社.1963

[2]屠豫欽.農(nóng)藥的化學(xué)鑒定和生物鑒定，中國(guó)青年出版社.1960.

[3]張宗炳，殺蟲劑的毒力測(cè)定，科學(xué)出版社，1988.