摘要：為構(gòu)建β－甘露聚糖酶基因高效表達(dá)體系，采用重疊區(qū)擴(kuò)增基因拼接法將蘇云金芽孢桿菌(Bacil-lus thuringiensis)CTC S-層蛋白啟動子和歐文氏桿菌(Erwinia carotovora)CXJZ95-198 β－甘露聚糖酶基因完整開放閱讀框定向連接，得到基因拼接體slp-man。將slp-man克隆到高效表達(dá)載體pET-28a+上，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(Escherichia coli)JM109中。結(jié)果表明，β－甘露聚糖酶基因高效表達(dá)體系構(gòu)建成功，重組菌發(fā)酵11h酶活達(dá)到671.3U·mL^-1。是歐文氏桿菌CXJZ95－198的1.48倍。

關(guān)鍵詞：β－甘露聚糖酶基因；歐文氏桿菌；重疊區(qū)擴(kuò)增基因拼接法

中圖分類號：S188；0789 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439－8114(2009)08－1807－04