摘要:以克氏原螯蝦DNA為材料,對(duì)AFLP分析中的基因組酶切時(shí)間、選擇性擴(kuò)增中預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)、MP2+濃度等3個(gè)因素進(jìn)行了比較。結(jié)果表明,基因組用EcoRI和MseI雙酶切5h,選擇性擴(kuò)增的PCR反應(yīng)體系中Mg2+1.5mmol/L是進(jìn)行克氏原螯蝦AFLP分析的最佳反應(yīng)條件,能夠得到豐富穩(wěn)定的帶紋。而預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)對(duì)選擇性擴(kuò)增沒(méi)有明顯影響。該體系的構(gòu)建為AFLP技術(shù)在克氏原螯蝦相關(guān)研究中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:克氏原螯蝦(Procambarus clakii);AFLP;反應(yīng)體系
中圖分類(lèi)號(hào):0953
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):0439—8114(2009)11—2804—04