摘要：以RT—PCR擴(kuò)增新城疫病毒JZ05株F基因F1片段和F2片段，以核酸內(nèi)切酶Kpn I 和Xba I 對(duì)目的基因片段及質(zhì)粒pGAPZαA進(jìn)行酶切，連接酶切產(chǎn)物，轉(zhuǎn)化Eacterium coli DH5α。以PCR方法確定JZO5 F1的陽性重組子為2個(gè)，JZO5 F2的陽性重組子為4個(gè)。對(duì)陽性重組子進(jìn)行酶切鑒定及序列分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，重組質(zhì)粒pCAPZαA—F1、pGAPZαA—F2及質(zhì)粒pCAPZαA的酶切電泳條帶與試驗(yàn)設(shè)計(jì)大小相符；基因測序得到的重組子中F1和F2序列長度分別為1198bp、269bp，與新城疫病毒JZO5株，基因序列比對(duì)。其序列長度和核苷酸排列完全一致。這表明重組質(zhì)粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正確的，為以酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)Fl和F2、研究強(qiáng)毒株與弱毒株F蛋白的抗原性差異程度及研制重組亞單位疫苗打下了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：新城疫病毒：F基因；質(zhì)粒pGAPZαA；重組

中圖分類號(hào)：S852.65⁺9:Q78

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439—8114(2009)11—2639—03