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        大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位基因的原核表達(dá)

        2009-12-31 00:00:00梁望旺周丹娜劉澤伍楊克禮段正贏鄧均華徐滌平
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2009年11期

        摘要:大腸桿菌(Escherichia coli)不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)不僅是重要的黏膜免疫原,而且作為佐劑在黏膜免疫中起著重要的作用。試驗(yàn)采用PCR方法擴(kuò)增了腸毒素性大腸桿菌的LTB基因.并將其克隆到pGEX—KG原核表達(dá)載體上,構(gòu)建了重組質(zhì)粒pKG—LTB,經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定后,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)SDS—PAGE和westem—h1ot分析表明,克隆的LTB基因與谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)基因獲得了高效融合表達(dá),表達(dá)的融合蛋白GST—LTB分子量約為35kDa,并具有免疫反應(yīng)活性。這為進(jìn)一步研究LTB蛋白黏膜免疫原性和黏膜佐劑的作用奠定了基礎(chǔ)。

        關(guān)鍵詞:腸毒素大腸桿菌;不耐熱腸毒素:克?。辉吮磉_(dá)

        中圖分類號(hào):S852.61+2;Q78

        文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

        文章編號(hào):0439—8114(2009)11—2627—03

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