王文昆 沙德先 余 瓊 謝英瓊

摘要通過應(yīng)用同一批次的禽流感疫苗,在同一雞群中采用相同的免疫方法和部位(均采用頸部皮下注射),在同一時(shí)間內(nèi)進(jìn)行不同免疫劑量的禽流感疫苗免疫注射試驗(yàn)。根據(jù)免疫劑量的不同,將所選養(yǎng)殖場的同群雞分別分為4個(gè)試驗(yàn)組(0.3mL/只、0.4mL/只、0.5mL/只和0.8mL/只)進(jìn)行疫苗免疫,免疫后采用相同的飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行同群飼養(yǎng)管理,在間隔相同的時(shí)間后,采樣進(jìn)行免疫抗體水平檢測,結(jié)果其產(chǎn)生的免疫抗體效價(jià)陽性率與免疫劑量成正比,高的達(dá)到92%,而低的僅11%。根據(jù)群體抗體達(dá)標(biāo)檢測要求,抗體效價(jià)檢測陽性率達(dá)到全群的70%才能達(dá)到免疫合格,而該次試驗(yàn)中免疫劑量為0.5mL/只和0.8mL/只的試驗(yàn)組其群體抗體效價(jià)陽性率達(dá)到免疫抗體效價(jià)群體合格的要求,其余2組未達(dá)標(biāo)。

關(guān)鍵詞禽流感;免疫;劑量;效價(jià)

中圖分類號 S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號 1007-5739(2009)11-0214-01

為了摸清畜牧業(yè)生產(chǎn)中禽流感疫苗免疫劑量對免疫抗體效價(jià)的影響,切實(shí)達(dá)到免疫目的,2008年底配合禽流感的強(qiáng)制免疫工作,西昌市選取了2家規(guī)模場和2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的農(nóng)戶所養(yǎng)殖的健康雞作為試驗(yàn)動物,進(jìn)行了同一雞群不同免疫劑量的雞所產(chǎn)生的免疫效果的對比試驗(yàn)?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動物

選取1個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖蛋雞場、1個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖商品雞場和2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)戶所養(yǎng)的5周齡以上的健康雞作為試驗(yàn)動物。

1.2試驗(yàn)器材

(1)免疫疫苗。黑龍江省生物制品一廠生產(chǎn)的重組禽流感病毒滅活疫苗(H5N1亞型,Re-1株)。批號:200761;生產(chǎn)日期:20070927;有效期:12個(gè)月;參考免疫劑量:2～5周齡0.3 mL/只,5周齡以上0.5mL/只;保存狀況:2～8℃避光保存,嚴(yán)禁凍結(jié);規(guī)格:250mL/瓶。

(2)注射器。使用上海市萬佳動物保健器械有限公司生產(chǎn)的獸醫(yī)用可調(diào)連續(xù)注射器,在使用前進(jìn)行嚴(yán)格清洗和消毒,由專人進(jìn)行統(tǒng)一調(diào)試和注射。

(3)采樣器械。碘酒、酒精、一次性注射器、消毒后的離心管和青霉素瓶等。

(4)試驗(yàn)器械。一次性96孔V型微量反應(yīng)板、定量移液器、吸頭、量筒、燒杯、加液槽、微量振蕩器等。

(5)診斷試劑。哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)?？乖枮?007050704,有效期2年;陽性血清批號為200705,有效期2年。阿氏液、雞紅細(xì)胞懸液、pH值7.2、0.01moL/L PBS液等按照《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制。

1.3試驗(yàn)方法

根據(jù)《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行抗體效價(jià)檢測。選取4個(gè)養(yǎng)殖場的5周齡以上健康雞為試驗(yàn)動物,每個(gè)場的雞均分為1～4組,每個(gè)組100只雞,各場的試驗(yàn)雞均分別進(jìn)行同群飼養(yǎng)。各場的免疫劑量1～4組均分別為0.3mL/只、0.4 mL/只、0.5mL/只和0.8mL/只。根據(jù)《GB/T18936-2003禽流感血凝抑制試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn),以完全抑制4單位抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度;只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2,陽性對照孔血清滴度誤差不超過1個(gè)滴度,試驗(yàn)有效。HI效價(jià)≤3log2(1∶8)判定為HI試驗(yàn)陰性;HI效價(jià)=4log2(1∶16)判為可疑,需重復(fù)試驗(yàn);HI效價(jià)≥5log2(1∶32)判為HI試驗(yàn)陽性。免疫群體其抗體效價(jià)陽性率在70%以上的判群體免疫抗體效價(jià)合格。

2結(jié)果與分析

蛋雞養(yǎng)殖場1～4試驗(yàn)組免疫雞抗體效價(jià)陽性率分別為16%、55%、80%、90%;商品雞養(yǎng)殖場1～4試驗(yàn)組免疫雞抗體效價(jià)陽性率分別15%、54%、78%、88%;鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)戶散養(yǎng)戶1～4試驗(yàn)組免疫雞的抗體效價(jià)陽性率分別為12%、51%、82%、91%和11%、52%、83%、92%。根據(jù)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求:免疫群體其抗體效價(jià)陽性率在70%以上的判群體免疫抗體效價(jià)合格。本次試驗(yàn)中免疫劑量為0.5mL/只和0.8mL/只的試驗(yàn)組均達(dá)到免疫合格要求,其余2組均未達(dá)標(biāo)。

3結(jié)論與討論

(1)本試驗(yàn)所選擇的試驗(yàn)動物為各養(yǎng)殖場的同群雞,各場在免疫前后都分別進(jìn)行同群飼養(yǎng),這樣就使同一養(yǎng)殖場的雞其飼養(yǎng)水平、飼養(yǎng)環(huán)境均相同,僅免疫劑量不同,其免疫抗體效價(jià)合格率差異較大,高的達(dá)到92%,而低的僅11%,這說明疫苗免疫劑量對同群雞產(chǎn)生的免疫抗體效價(jià)影響大。

(2)本試驗(yàn)中,劑量為0.5mL/只的試驗(yàn)組抗體效價(jià)陽性率平均為80.75%,最低78%,完全達(dá)到試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中群體免疫陽性率達(dá)70%以上的免疫合格要求,而疫苗使用說明中的參考劑量要求也是5周齡以上的注射0.5mL/只。這充分表明,只要嚴(yán)格按照使用說明的劑量進(jìn)行免疫,就能達(dá)到免疫效果的要求,劑量過小產(chǎn)生的抗體效價(jià)陽性率不能達(dá)標(biāo),過大又容易引起雞群的應(yīng)急反應(yīng),造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

(3)因注射禽流感疫苗時(shí),使用的是連續(xù)注射器,就要求對注射器嚴(yán)格清洗和消毒,特別是注射器注射劑量要嚴(yán)格根據(jù)雞的大小適時(shí)調(diào)校準(zhǔn)確,以保證免疫效果。

(4)免疫后要多喂水,適量添加富含維生素的飼料,以增強(qiáng)體質(zhì),減少疫苗免疫引起的應(yīng)急反應(yīng),保障免疫效果。

4參考文獻(xiàn)

[1] 楊志豐.如何做好雞群的疫苗接種管理[J].中國家禽,2005,27(13):51-52.

[2] 宋明則,張亞萍,張紅,等.給雞接種油乳劑苗的技術(shù)要求[J].中國家禽,2005,27(16):38.