漁　訊

家兔人工授精是先進(jìn)科學(xué)的配種方式，與傳統(tǒng)的自然交配方式相比有以下優(yōu)點(diǎn)：①可以節(jié)省種公兔的飼養(yǎng)成本。②可以防止品種退化，保持和不斷提高兔群的品種質(zhì)量。③可以充分利用優(yōu)良種公兔的精液資源，而且繁殖的仔兔個(gè)體大、生長(zhǎng)快、成活率高、出欄早，實(shí)行人工授精可提高兔場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益30%。④避免了種兔間的直接接觸，可預(yù)防兔病的傳播。人工授精主要有采精、精液品質(zhì)檢驗(yàn)、精液的濃縮或稀釋、精液的保存和輸精等幾個(gè)關(guān)鍵工序。

一、采精

1. 種公兔的準(zhǔn)備。種公兔在采精前1周和整個(gè)采精期間必須加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)、增強(qiáng)光照和運(yùn)動(dòng)，每天在室外活動(dòng)2個(gè)小時(shí)。一般經(jīng)過1周的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充和誘導(dǎo)發(fā)情，公兔性活動(dòng)已明顯增強(qiáng)，精液生成旺盛。在采精的前兩天讓公兔與母兔自然交配2次，以便能采到最佳品質(zhì)的精液。采精最好安排在家兔性欲最活躍的清晨或晚上涼爽時(shí)進(jìn)行。第一次采精后隔1天采2次（清晨、晚上各1次），連續(xù)2周、休息1周，然后再重復(fù)上述過程。如果公兔已停止使用15天以上，在使用前都要有一個(gè)上述的調(diào)理過程。

2. 采精器的準(zhǔn)備。①假陰道。外殼為直徑30毫米、長(zhǎng)80～85毫米的硬塑料管，內(nèi)胎為人用避孕套。②集精杯。雙層玻璃套瓶，外層為棕色保護(hù)瓶，內(nèi)層為貯精瓶。③采精器的清洗與消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高錳酸鉀液刷洗干凈，再用自來(lái)水、蒸餾水（或注射用水）依次沖洗，然后將塑料管和集精杯放在干燥箱內(nèi)（160℃）或沸水內(nèi)消毒20～30分鐘。避孕套用蒸汽消毒15分鐘。④假陰道的安裝。先將消毒好的避孕套從管內(nèi)穿過，一端翻套固定在外殼上，避孕套和塑料管之間加入40毫升左右45℃的熱水，再將另一端翻套在外殼上，并用皮筋或膠圈固定，防止漏水或滑脫。集精杯兩層之間加入37℃滅菌的溫水，然后將其安裝在假陰道的一端，固定。假陰道使用前，采精器整個(gè)內(nèi)腔用配制的等滲精液稀釋液沖洗1～2次。⑤采精的方法。將大小適宜、體質(zhì)健壯、發(fā)情良好的母兔做臺(tái)兔，將其陰部清洗消毒后，放到公兔籠內(nèi)，先讓公兔與臺(tái)兔追逐片刻，以引起公兔的性欲。當(dāng)公兔出現(xiàn)性沖動(dòng)開始爬跨時(shí)，采精者左手抓住臺(tái)兔的雙耳及頸部皮膚，兔頭向采精者方向固定，右手握住安裝好的假陰道，以中指和無(wú)名指護(hù)住集精杯，從臺(tái)兔腹部一側(cè)將假陰道放到臺(tái)兔兩后腿之間，使假陰道口緊貼在陰門下部，并稍微用力托起臺(tái)兔臂部。當(dāng)公兔爬跨陰莖挺出時(shí)，采精者立即調(diào)整假陰道方向和位置，讓公兔陰莖插入假陰道內(nèi)。當(dāng)公兔突然向前一挺、伴隨一聲尖叫倒在臺(tái)兔一側(cè)，說明公兔已射精完畢。這時(shí)，迅速把假陰道抽出，豎直，取下集精杯，采精完畢。

二、精液品質(zhì)檢驗(yàn)

1. 射精量。一般公兔射精量為0.5～2毫升，射精間隔時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)精液量有一定的影響。射精量越多，精子密度越高，活力越強(qiáng)，表示精液的品質(zhì)越好。

2. 顏色和氣味。正常家兔的精液呈淡乳白色，黏稠狀，略帶點(diǎn)腥味或無(wú)味。

3. 精子的活力。精子的活力是根據(jù)直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子占總精子數(shù)的百分比而判定，一般分為10個(gè)等級(jí)。如果全部精子幾乎都呈直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)則評(píng)為“1.0”級(jí)，90%的精子呈直線運(yùn)動(dòng)則評(píng)為“0.9”級(jí)，依次類推，直到“0.1”級(jí)。如果沒有直線運(yùn)動(dòng)的精子，則為“0”級(jí)。顯微鏡觀察方法：將0.5毫升精子在35℃溫水中水浴5分鐘，然后用吸管吸取少許精液滴于載玻片上，輕輕蓋好蓋玻片，用顯微鏡觀察精子的活力和密度大小。優(yōu)質(zhì)精液呈直線運(yùn)動(dòng)的精子在70%以上，合格精液呈直線運(yùn)動(dòng)的精子在60%以上。

4. 精子的密度。測(cè)定精子密度的方法有估測(cè)法與計(jì)數(shù)法。①估測(cè)法。估測(cè)法是直接觀察顯微鏡視野中精子的稠密程度。精子布滿整個(gè)視野，像云霧一樣為高度密集，這種精液每毫升含有精子3億個(gè)以上；精子在視野間有明顯的空隙，相當(dāng)于2個(gè)精子的長(zhǎng)度，可以看清各個(gè)精子的活動(dòng)情況，這種精液為中等密集，每毫升有精子1億～2億個(gè)；精子在視野中零星分布，空隙很大，超過2個(gè)精子長(zhǎng)度，這種精液稀薄，每毫升精子在1億個(gè)以下。估測(cè)法一般在平時(shí)采精時(shí)使用。如果精子要進(jìn)行精選保存，最好用計(jì)數(shù)法對(duì)精子密度進(jìn)行評(píng)定。②計(jì)數(shù)法。計(jì)數(shù)法是檢查精子數(shù)量最準(zhǔn)確的方法。取精液稀釋液1毫升于試管內(nèi)，用毛細(xì)吸管吸取0.01毫升精液于稀釋液內(nèi)混勻，然后用滴棒將稀釋好的精液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi)，計(jì)數(shù)5個(gè)方格內(nèi)的精子數(shù)，乘以10萬(wàn)即得每毫升精子總數(shù)。精子總數(shù)在2億個(gè)以上為優(yōu)，1億至2億個(gè)為合格。在進(jìn)行人工授精時(shí)，所采用的精液其射精量應(yīng)在2毫升左右，精子活力在0.7以上，精子密度要為每毫升1.5億個(gè)以上。

5. 精子的形態(tài)。精子的形態(tài)是關(guān)系到精子質(zhì)量的另一項(xiàng)重要指標(biāo)。正常的精子呈比例勻稱的蝌蚪狀?；尉佑蓄^部過大、頭部過小、頭部殘缺、尾部殘缺、頭部斷折、雙頭雙尾、尾部卷曲斷折等多種形態(tài)，未成熟的精子也屬畸形精子。正常情況下，精子畸形率一般不超過15%。精子形態(tài)檢查方法：用清潔吸管吸取原精液一小滴于干凈玻片一端，另取一載玻片如制作血片一樣制成均勻的精液抹片。等抹片自然干燥后，用龍膽紫染色3分鐘，沖去染料后，用濾紙吸干水分放在400倍或600倍顯微鏡下觀察，計(jì)數(shù)500個(gè)精子，數(shù)出畸形精子，畸形率=畸形數(shù)/500×100%

三、精液的稀釋

在人工輸精時(shí)，都要進(jìn)行精液稀釋。稀釋目的是為了擴(kuò)大精液的容積，增強(qiáng)精子的活力，延長(zhǎng)精子的壽命，便于精子的運(yùn)輸與保存。常用的精液稀釋液主要有以下3種：

1. 5%葡萄糖卵黃稀釋液。將醫(yī)院輸液用的10%葡萄糖溶液用注射用水稀釋成5%的濃度，用注射器抽取1～3毫升新鮮的卵黃加入到5%的葡萄糖注射液中，然后加入青、鏈霉素各10萬(wàn)單位，搖勻即可。

2. 11%蔗糖卵黃稀釋液。取蔗糖11克加蒸餾水80毫升，待溶解后加水至100毫升，過濾，密封，高壓滅菌20分鐘，待溫度降至25℃時(shí)，用注射器抽取1～3毫升新鮮卵黃加入到11%蔗糖溶液內(nèi)，再加青、鏈霉素各10萬(wàn)單位，搖勻即可。

3. 蔗糖、奶粉、磷酸鹽稀釋液。取磷酸二氫鈉0.41克、磷酸氫二鈉1.69克，溶于50毫升蒸餾水中。取蔗糖5.5克、牛奶2.5克放入磷酸鹽溶液中，再加蒸餾水至100毫升。過濾后密封高壓消毒20分鐘，冷卻后加入青、鏈霉素各10萬(wàn)單位，搖勻即可。

上述稀釋液可在4℃下保存14天左右。稀釋液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，以免時(shí)間過久變質(zhì)腐敗。稀釋液使用前都要在溫水中預(yù)熱到35℃。精液稀釋時(shí)，取品質(zhì)優(yōu)良的精液1毫升和精液稀釋液3～5毫升混勻即可。

四、輸精

家兔人工授精應(yīng)著重掌握什么時(shí)候輸精和怎樣輸精兩個(gè)要點(diǎn)。家兔屬于交配刺激排卵型動(dòng)物，雌兔在發(fā)情期間，只有經(jīng)過公兔爬跨交配刺激后，其卵巢中的卵才會(huì)在10～12小時(shí)排出。若不進(jìn)行交配刺激，卵巢中的卵便會(huì)在體內(nèi)自行萎縮，退化吸收。因此，在給發(fā)情母兔輸精前，必須先用結(jié)扎的公兔進(jìn)行爬跨交配刺激或注射性激素促其卵巢排卵。具體操作方法是：當(dāng)發(fā)情母兔正值旺情期時(shí)，將其放入已結(jié)扎的公兔的籠內(nèi)，讓公兔與其自然交配后取出，5～6個(gè)小時(shí)后進(jìn)行輸精。也可肌內(nèi)注射促排3號(hào)，6個(gè)小時(shí)后輸精。為了保證輸精成功，可在第二天再重復(fù)輸精1次。

1. 輸精器的準(zhǔn)備。規(guī)格為5毫升的注射器和150毫米長(zhǎng)的女用尿管經(jīng)消毒處理后，放在無(wú)菌盒中待用。輸精前用注射器吸取2～3毫升精液稀釋液，將輸精管（導(dǎo)尿管）沖洗1～2次，然后將待輸?shù)木何胱⑸淦鲀?nèi)，套上輸精管。為了防止精液在輸精管中滯留，注射器在抽取精液前可先吸入1毫升的空氣，輸精時(shí)連同空氣一同推入陰道內(nèi)，這樣輸精管內(nèi)的精液就可全部推入陰道。

2. 輸精操作。先將母兔保定好，外陰用生理鹽水沖洗干凈。接著把母兔臀部抬高，輸精者左手分開陰唇，右手持輸精管緩緩插入陰道。當(dāng)插入7～8厘米深時(shí)（家兔陰道長(zhǎng)度一般在8～12厘米）將膠管來(lái)回抽動(dòng)數(shù)次，刺激母兔，然后將精液注入。輸精完畢，在母兔臀部拍幾下，讓母兔陰道收縮，這樣可防止精液倒流。輸精后要讓母兔安靜休息。

3. 注意事項(xiàng)。①在整個(gè)輸精過程中，一定要嚴(yán)格消毒，無(wú)菌操作，防止感染。②在整個(gè)輸精過程中，手法要輕，操作要干凈利落。要保證輸精器具內(nèi)沒有對(duì)精子有害的藥物及液體，保證精液溫度和輸入過程盡量模仿自然交配過程。③輸精的部位一定要準(zhǔn)確無(wú)誤，避免將輸精管插入尿道口中。母兔的膀胱在陰道內(nèi)5～6厘米深處的下方，在插輸精管時(shí)要沿陰道壁的背側(cè)面插入6～7厘米深，越過尿道口以后再往里插1～2厘米，如沒有尿液流出證明已插入子宮，這時(shí)再輸入精液。④輸精完畢后，器具要及時(shí)清洗、消毒，防止液體在其內(nèi)粘結(jié)，影響下次使用。⑤輸精后要及時(shí)進(jìn)行登記、備案。

五、精液的保存

精液經(jīng)稀釋處理后，可以存放在一恒定溫度中。如現(xiàn)采現(xiàn)用，精液保存在30℃左右的環(huán)境中即可。若存放4～8小時(shí)，可在15～20℃的室溫環(huán)境中保存。需長(zhǎng)時(shí)間存放的，則須先緩慢降溫，再放入冰箱（或冷藏杯等）內(nèi)0～5℃保存，使用時(shí)再緩慢升溫。據(jù)試驗(yàn)，只要保存得當(dāng)，精子的存活時(shí)間可達(dá)200小時(shí)以上。

作者簡(jiǎn)介：漁訊，養(yǎng)兔技術(shù)指導(dǎo)專家，出版專著《新法養(yǎng)兔》（金盾出版社）。聯(lián)系地址：北京市石景山碣石坪小區(qū)11樓2單元501B室，郵編：100043。