徐慶華 范冬春
摘要:以火龍果(Hvlocereus undatus)、玉翁(Cephalocereu sen…)和生石花(Lihops pseudotruncateIIa)三種植物的種子為材料,進行多肉類植物試管微型花卉培育的研究,最終確定試管微型花卉繁育的適宜培養(yǎng)基是MS,蔗糖3%,脫乙酰吉蘭糖膠0.37%,pH值5.8~6.0,并且通過在培養(yǎng)基中添加紅、藍墨水調配出不同顏色的培養(yǎng)基,增加試管微型花卉的觀賞性。
關鍵詞:多肉類植物,試管微型花卉,植物組培
多肉類植物是一種外觀別致、形態(tài)奇特、花色艷麗、刺密且尖的花卉,具有不畏干旱、不畏高溫、不擇環(huán)境,生命力極強的特點。試管花卉,也稱天使花房,是通過植物組織培養(yǎng)技術,在人工控制的無菌環(huán)境下,生長在玻璃或透明塑料容器等相對密封的空間內的一系列迷你微型植物的總稱。本試驗開展多肉類植物試管微型花卉培育的研究,植物小苗生長在一個相對封閉的微小環(huán)境,方便攜帶運輸,易于觀賞,不需要特別的養(yǎng)護。這種微型花卉因其成本不高、見效快、可操作性強等優(yōu)勢可作為本科畢業(yè)生自主創(chuàng)業(yè)的新項目,制作成手機鏈、各種掛飾、擺設等,還可作為生物教育載體,便于學生深入了解植物組織培養(yǎng)及生長發(fā)育的規(guī)律。
材料與方法試驗材料與試劑
試驗材料選用火龍果(Hyloce reus undatus)、玉翁(Cephalocereu senilli)和生石花(Lithops pseudotruncatella)三種植物的種子。配置MS培養(yǎng)基相關試劑、蔗糖、脫乙酰吉蘭糖膠(Gelrite)、升汞、吐溫、酒精、紅和藍墨水、青霉素小藥瓶等均購置于哈爾濱博大化學試劑公司。
種子滅菌
三種種子25℃蒸餾水浸泡24h后,超凈工作臺上,先用75%酒精溶液浸泡30s,用無菌水沖洗一遍:再用0.1%的升汞和吐溫混合液浸10min,無菌水沖洗5次~6次。
種子萌發(fā)及培養(yǎng)基篩選
超凈工作臺上,滅菌的種子置于高壓滅菌過的濾紙上吸干水分,最后將無菌種子接入含MS、1/2MS、1/4MS三種無菌培養(yǎng)基的錐形瓶(50 mL培養(yǎng)基/150mL錐形瓶)、每瓶10粒種子,在25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒溫光照培養(yǎng)并適時觀察記錄發(fā)芽及生長狀況。以上培養(yǎng)基均含蔗糖3%、脫乙酰吉蘭糖膠0.2%,pH值5.8~6.0,并用紅藍墨水調節(jié)培養(yǎng)基顏色。
無菌苗轉微型試管及馴化培養(yǎng)
無菌條件下,將錐形瓶中培養(yǎng)一個月后的無菌小苗接入含MS培養(yǎng)基(含蔗糖3%、脫乙酰吉蘭糖膠0.37%,pH值5.8~6.0)的微型試管(10mL培養(yǎng)基/20mL微型試管,5mL培養(yǎng)基/10mL微型試管),用紅和藍墨水調色,25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒溫光照培養(yǎng)三個月:之后轉入室溫下正常培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中適時觀察記錄小苗生長狀況。
結果與分析種子發(fā)芽率及培養(yǎng)基篩選
無菌種子接入MS、1/2MS、1/4MS三種無菌培養(yǎng)基中,每瓶20粒種子,每個種子接5瓶:種子在25±1℃、光照2000Lx、16h/d恒溫光照培養(yǎng)。培養(yǎng)一周后,MS培養(yǎng)基中種子發(fā)芽率最高,發(fā)芽率統(tǒng)計結果見表1:MS中一月齡無菌苗生長狀態(tài)最好,見圖1、圖2和圖3。
無菌苗轉微型試管培養(yǎng)
一月齡無菌小苗接入微型試管恒溫光照培養(yǎng)三個月;轉入室溫下繼續(xù)培養(yǎng)一個月。培養(yǎng)過程中小苗生長狀況見圖4。
結論
多肉類植物火龍果、玉翁、生石花的種子為材料,試管微型花卉繁育的適宜培養(yǎng)基是MS,蔗糖3%,脫乙酰吉蘭糖膠0.2%,pH值5.8~6.0。成品保持每天至少6h的光照(普通燈光,日光管),無需其它管理,目前結果顯示能正常生長五個月,無霉菌污染,是一種綠色觀賞佳品。
培養(yǎng)基的固化劑選用透明度高、韌性強的脫乙酰吉蘭糖膠(Gelrite),又名植物凝膠(Phytagel),用紅、藍墨水調配出色彩鮮艷的凝膠狀透明營養(yǎng)基,培育的試管花卉既可觀葉又可觀根,增強了微型試管花卉的觀賞價值。