1.井底低溫保藏
這是利用井底恒溫且溫度低的原理進(jìn)行菌種保藏的方法,適用于不具備保鮮冰箱的菇農(nóng)。將要保藏的試管母種裝入密閉的廣口瓶或塑料袋中扎緊,用無菌橡皮塞蘸石蠟封口,可保藏2~5個(gè)月。
2.石蠟封口保藏
把蠟紙裁成長、寬各6~8厘米大小,放入75%酒精中浸泡1分鐘。將已培養(yǎng)好試管種的管口在酒精燈火焰上方旋轉(zhuǎn)滅菌后,用浸泡好的蠟紙?jiān)o管口。再將包好蠟紙的管口浸入熔化的石蠟中,以蠟紙完全浸入為止,使蠟紙緊緊封包在管壁上,絕對不漏氣。待石蠟冷卻凝固后,放置冰箱或室溫下保存。
用石蠟封口后的菌種能有效保持培養(yǎng)基水分,提高管內(nèi)二氧化碳濃度,避免雜菌污染,轉(zhuǎn)管后菌絲恢復(fù)生長快。在室溫條件下保藏6個(gè)月,培養(yǎng)基還未見干縮,菌絲仍有較強(qiáng)生命力;在0~4℃條件下保存12個(gè)月后菌絲體外觀正常,無老化現(xiàn)象,轉(zhuǎn)管成活率高。
3.廄肥保藏
此法適合保藏雙孢菇等草腐菌類。將腐熟牛糞等堆肥曬干、打碎,取300克干堆肥,用5毫米孔徑篩過篩,加1000毫升水調(diào)濕,裝入試管,占管深1/3~1/2,在0.15兆帕壓力下滅菌2小時(shí)。確認(rèn)無菌后接種,菌絲長滿后,放在3℃冰箱內(nèi)保藏,每隔2年移植一次。在長期保藏中,如培養(yǎng)基失水,應(yīng)將保藏菌種及時(shí)接種在瓊脂斜面上進(jìn)行活化,再繼續(xù)保存。此法連續(xù)保藏4年后,其生產(chǎn)性狀未出現(xiàn)明顯變化。
4.麩皮保藏法
稱取一定量的麩皮加水或營養(yǎng)液后拌勻即可使用。水、麩皮裝入試管,高壓滅菌后接入菌種,放在適溫下培養(yǎng)。菌絲體發(fā)育好后,將試管放入干燥室在室溫下進(jìn)行干燥,干燥后放在20℃以下干燥處保藏,可保藏3~5年時(shí)間。
5.生理鹽水保藏法
將菌種接入馬鈴薯培養(yǎng)液中,每250毫升三角瓶裝60毫升培養(yǎng)液,振蕩培養(yǎng)或每天搖動5~10次,培養(yǎng)5~7天,然后將形成的菌絲球移入裝有5毫升無菌生理鹽水的試管中,每管約移入4~5個(gè)菌絲球,塞上棉塞,用蠟封好口,置于低溫下,可保藏1年。
6.麥粒保藏法
取優(yōu)質(zhì)小麥,淘洗后浸入20℃水中泡5小時(shí),稍加晾干,裝管。裝入量以管長的1/4~1/3為宜,滅菌,趁熱播散,冷卻后接入菌絲體,適溫培養(yǎng)至大多數(shù)麥粒上出現(xiàn)稀疏菌絲時(shí)終止培養(yǎng)。置于25℃以下干燥處,可保藏1~2年。(河北省吳橋縣楊家寺中學(xué) 楊淑璽 郵編:061800)