摘要：對鄂西北地區(qū)47個豬場采樣342份血清，進行了PCV-2檢測，結(jié)果表明：血清抗體陽性率為80.4％，陰性率為19.6％，鄂西北地區(qū)圓環(huán)病毒流行面廣，疫情感染嚴重。調(diào)研為鄂西北地區(qū)豬Ⅱ型圓環(huán)病毒病的臨床診斷、治療和研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：鄂西北；豬圓環(huán)病毒；調(diào)查

中圖分類號：$858.28；$852.659.2 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X(2008)08-0008-02

斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭癥(Postweaning MuhisystemicWasting Syndrome，PMWS)是繼豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reoroductive and resoiratorv syndrome，PRRS)之后發(fā)現(xiàn)的感染豬的另一種主要傳染病。PCV-2是其重要的病因。1978年，德國學(xué)者Trischer首次從豬腎傳代細胞系PK-15中分離到該病毒，并于1982年將其命名為豬圓環(huán)病毒(PCV)。隨后，經(jīng)血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)在德國、加拿大、新西蘭、英國、北愛爾蘭、美國等國的豬群中PCV抗體陽性率都很高。其中，1997年Clark從加拿大西部患有斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的豬群中分離到一種新的病毒，該病毒與PK-15細胞中圓環(huán)病毒相似。并命名為PCV-2。此后。由PCV-2引起的各種疾病分布廣泛，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，已受到國內(nèi)外學(xué)者的高度重視。鄂西北地區(qū)還未見有關(guān)豬PCV-2相關(guān)的報道，為做好鄂西北地區(qū)由豬圓環(huán)病毒Ⅱ型引起的豬病的控制和治療，我們實習期間，對鄂西北地區(qū)47家豬場的豬圓環(huán)病毒Ⅱ型進行了血清學(xué)檢測，現(xiàn)將調(diào)研情況報告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣的采集

(1)采集地點：襄樊、十堰、隨州、荊門等12縣市47個規(guī)?；i場。

(2)采集時間：2007年4月至2008年4月。

(3)血樣采集數(shù)量：母豬血樣61份，育肥豬血樣281份，共采集血樣342份。

(4)采集方法和血樣的處理。

隨機采取5mL前腔靜脈血樣，靜置1h，待血清析出后，2000r／min離心10min，取上層血清待檢。

1.2 儀器與試劑

(1)酶標儀。GF—M2000型酶標儀，山東高密彩虹分析儀器有限公司。

(2)德國eppendoff單道微量可調(diào)移液槍。

(3)37℃恒溫培養(yǎng)箱。

(4)豬圓環(huán)病毒抗體檢測試劑盒。來自深圳康百得生物有限公司生產(chǎn)的豬Ⅱ型圓環(huán)病毒抗體檢測ELISA試劑盒。

1.3 試驗原理與方法

(1)原理：本試劑盒采用重組圓環(huán)病毒Ⅱ型Cap蛋白作為固相抗原，用于檢測豬血清中抗圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體，從而間接診斷豬群圓環(huán)病毒感染情況。

(2)試驗方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)。

(3)操作步驟：①樣本稀釋：將樣本稀釋液按1：40比例稀釋。②加樣反應(yīng)：將稀釋好的樣本液取lOOlxL注入已包被有圓環(huán)病毒Ⅱ型抗原的反應(yīng)孔。37~C避光反應(yīng)30rain后洗滌。③加酶反應(yīng)：每孔加入酶標二抗100uL，37℃避光反應(yīng)30min后洗滌。④顯色反應(yīng)：加底物和顯色劑各501uL。37℃避光反應(yīng)10min，加入終止液501xL，然后用酶標儀讀數(shù)。⑤詳細操作步驟按豬Ⅱ型圓環(huán)病毒病(ELISA)診斷試劑盒使用說明書操作。

(4)結(jié)果判斷：圓環(huán)病毒抗體的OD值≥0.150，表明豬只感染圓環(huán)病毒。

2 結(jié)果

送檢豬場47家，已知發(fā)病豬場25家，發(fā)病豬場占53.2％。血清342份，抗體陽性率80.4％，陰性率19.6％；待檢母豬血樣61份，抗體陽性率83.6％，陰性率16.4％；待檢肥豬血樣281份，抗體陽性率79.7％，陰性率20.3％。

將豬血清PCV-2抗體ELISA檢測結(jié)果與豬場豬只臨床診斷和病理解剖情況比較分析發(fā)現(xiàn)，血清抗體陽性豬只臨床和病理解剖的情況與有關(guān)文獻資料PCV-2感染報道的有關(guān)特征相吻合。綜上資料表明本地區(qū)有圓環(huán)病毒的存在，且感染情況嚴重。具體數(shù)據(jù)見表1。

3 討論

(1)送檢豬場47家，已知發(fā)病豬場25家，發(fā)病豬場占53.2％。血清342份，抗體陽性率80.4％，陰性率19.6％，表明鄂西北地區(qū)豬圓環(huán)病毒流行面廣，感染情況嚴重，希望引起有關(guān)部門重視，采取綜合防控措施。

(2)鑒于目前還沒有十分成熟的控制和消滅PCV-2感染的措施，所以對種豬場開展流行病學(xué)的調(diào)查，對血清陽性豬進行病原定性診斷，及時淘汰陽性豬，建立PCV陰性種豬場顯得十分必要。

(3)加強飼養(yǎng)管理，降低飼養(yǎng)密度，圈舍通風良好；減少環(huán)境應(yīng)激；合理分群與混養(yǎng)；實行全進全出，避免將不同日齡的豬混群飼養(yǎng)，以此減少和降低豬群之間PCV-2及其他病原的接觸感染機會。

(4)建立完善的生物安全體系，將消毒衛(wèi)生工作貫穿于養(yǎng)豬生產(chǎn)的各個環(huán)節(jié)，最大限度地降低豬場內(nèi)污染的病原微生物，減少或杜絕豬群繼發(fā)感染的機率剛，尤其減少或杜絕藍耳病毒、細小病毒和支原體的感染。

(5)為防止圓環(huán)病毒和其他疾病的混合感染，要做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病、豬氣喘病等疫苗的免疫接種工作，提高豬群整體的免疫水平，減少呼吸道病原體的繼發(fā)感染。增強肺臟對PCV-2的抵抗力。

(6)堅持自繁自養(yǎng)，加強飼養(yǎng)管理，及時清理糞污，消滅蚊蠅，并定期進行徹底消毒，引種時要做好檢疫工作，尤其是較大規(guī)模豬場，引種后應(yīng)隔離2個月以上，無異常后方可混群。

致謝：本次調(diào)研工作得到襄樊正大公司譚華祥總經(jīng)理和本院生物工程系王長義主任的大力支持。論文寫作得到熊江林和周華林二位老師的悉心指導(dǎo)和改稿。數(shù)據(jù)收集整理得到本院畜禽疾病診斷中心呂凡、韓宏樹、徐欣、李平、錢莎莎、劉科科、朱鈴、萬家樂等同學(xué)的幫助。市場調(diào)查得到襄樊正大動物保護中心技術(shù)部周傳奎、刑玉廣、楊緒波、孫中全、張欣、任濤同志的熱心幫助。在此一并表示衷心感謝!