摘要:目的:研究蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1(PRMT1)基因表達(dá)的改變與血管內(nèi)皮功能及動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。方法:構(gòu)建PRMT1短發(fā)夾RNA(shRNA)質(zhì)粒。在GenBank中查到大鼠PRMT1基因mRNA序列并輸入siRNA網(wǎng)上設(shè)計(jì)軟件OptiRNA中,選取兩條靶序列,設(shè)計(jì)并合成編碼shRNA序列的DNA單鏈,經(jīng)退火連接后,與雙酶切線性化處理回收的pGenesil-1質(zhì)粒載體連接,用含卡那霉素抗性的LB平板篩選陽(yáng)性克隆,小提質(zhì)粒后行酶切鑒定并測(cè)序。結(jié)果:構(gòu)建的大鼠PRMT1-shRNA質(zhì)粒經(jīng)酶切鑒定及測(cè)序與預(yù)期相符。結(jié)論:本研究結(jié)果為進(jìn)一步研究基因干擾PRMT1基因?qū)ρ獫{同型半胱氨酸(Hcy)、非對(duì)稱性二甲基精氨酸(ADMA)水平及血管內(nèi)皮功能的影響奠定了基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1;短發(fā)夾RNA;基因干擾;同型半胱氨酸;非對(duì)稱性二甲基精氨酸;動(dòng)脈粥樣硬化
中圖分類號(hào):R349 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1672-1349(2008)03-0299-04