摘要:采用正向間接血凝(IHA)試驗(yàn)對(duì)黔西縣7個(gè)500頭以上規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的175份血清,進(jìn)行了豬。蹄疫(FMD)、豬瘟(HC)血清學(xué)監(jiān)測(cè);同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行了豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)血清學(xué)檢測(cè)。結(jié)果顯示:規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)FMD、HC免疫合格率分別為72.0%和79.4%,均達(dá)到國(guó)家農(nóng)業(yè)部規(guī)定70.0%的標(biāo)準(zhǔn);PRRS陽(yáng)性檢出率為8.0%,表明該疫病在黔西縣已有感染,應(yīng)予以重視,加強(qiáng)防治。
關(guān)鍵詞:豬;FMD;HC;PRRS;血清學(xué)監(jiān)(檢)測(cè)
中圖分類(lèi)號(hào):S828;S852.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1007-273X(2008)05-0012-02
近年來(lái)。隨著規(guī)模養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,一些主要?jiǎng)游镆卟?duì)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的威脅也與日俱增,嚴(yán)重影響我縣養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。為了摸清我縣豬病流行動(dòng)態(tài),制定科學(xué)防治對(duì)策,降低動(dòng)物疫病給規(guī)模養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn),我們?cè)诹餍胁W(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上,于2007年4~6月對(duì)我縣7個(gè)500頭以上的規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的175頭豬進(jìn)行了豬口蹄疫(FMD)、豬瘟(HC)血清學(xué)監(jiān)測(cè)及豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)血清學(xué)檢測(cè)?,F(xiàn)將規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)生豬疫病血清學(xué)監(jiān)(檢)測(cè)情況報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 被檢血清
隨機(jī)采集縣內(nèi)7個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)(3個(gè)種豬場(chǎng)、4個(gè)商品豬場(chǎng))的血樣175份。耳靜脈采血后自然凝固分離血清,置冰箱4℃保存?zhèn)溆?。監(jiān)(檢)測(cè)的豬均已用FMD(O型)疫苗和HC弱毒疫苗免疫注射過(guò),沒(méi)有進(jìn)行PRRS疫苗免疫注射。調(diào)查規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的被檢血清情況見(jiàn)表1。
1.2 診斷試劑
口蹄疫(O)型正向血凝抗原、口蹄疫(O)型陽(yáng)性血清、口蹄疫(O)型陰性血清、口蹄疫(0)型稀釋液、豬瘟正向血凝診斷液、豬瘟陽(yáng)性血清、豬瘟陰性血清、豬瘟稀釋液(均為中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn))由省獸防站提供。
豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒(北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn))由省獸防站提供。
1.3 監(jiān)(檢)測(cè)方法
FMD、HC采用正向間接血凝(IHA)試驗(yàn),PRRS采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。
2 操作方法
2.1 豬口蹄疫(FMD)、豬瘟(HC)的操作方法
將稀釋液滴于v型反應(yīng)板各孔中,每孔50μL。取被檢血清50μL,于第1孔中,于稀釋液混勻后吸50μL,加于第2孔,混勻后取出50μL加于第3孔……,直至第8孔混勻后取出50μL丟棄。每孔加抗原50μL,直至第8孔。每塊反應(yīng)板均設(shè)陽(yáng)性血清、陰性血清、稀釋液對(duì)照孔,加完后將反應(yīng)板置微型振蕩器上,振蕩2min使診斷液中紅血球分布均勻,取下反應(yīng)板蓋上玻璃片,靜置2h觀察結(jié)果。
2.2 豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)的操作方法
嚴(yán)格按照抗體檢測(cè)試劑盒提供的程序進(jìn)行檢測(cè)。
3 結(jié)果判定
3.1 豬口蹄疫(FMD)、豬瘟(HC)結(jié)果判定
(1)判定標(biāo)準(zhǔn):紅細(xì)胞全部凝集,形成一層均勻膜,布滿(mǎn)整個(gè)孔底,判為“++++”;紅細(xì)胞在孔底形成一層薄膜,面積比前者稍小。判為“+++”;紅細(xì)胞在孔底形成薄膜凝集,邊緣松散或呈鋸齒狀,判為“++”;紅細(xì)胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集。孔底有小圓點(diǎn),判為“+”;紅細(xì)胞沉于孔底,但周?chē)还饣蛑行挠锌瞻?。判為?”;紅細(xì)胞完全沉于孔底,呈光滑的圓點(diǎn),判為“一”。以“++”以上凝集判為免疫合格。
(2)當(dāng)陽(yáng)性血清對(duì)照孔滴度不低于1:128(第7孔),陰性血清對(duì)照孔除第1孔允許“+”以外,其他各孔應(yīng)為“-”,稀釋液對(duì)照孔為“-”時(shí)試驗(yàn)成立。
(3)被檢血清效價(jià)≥1:32(++)者判為免疫合格。
3.2 豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)的判定標(biāo)準(zhǔn)
嚴(yán)格按照抗體檢測(cè)試劑盒提供的判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定。
4 結(jié)果
隨機(jī)在7個(gè)500頭以上規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)采集血樣175份,進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)(檢)測(cè),結(jié)果為FMD免疫合格率為72.0%,HC苗和HC弱毒疫苗,免疫合格率分別為72.0%(126/175)和79.4%(139/175),達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定70.0%的標(biāo)準(zhǔn),這表明我縣規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)FMD和HC各項(xiàng)防控措施得力,防疫效果好。
(2)FMD和HC兩種疫苗在種公豬和繁殖母豬的免疫合格率分別是86.7%、84.0%和93.3%、94.0%,明顯高于后備母豬和商品豬67.5%、62.9%和72.5%、70.0%,這可能與疫苗免疫次數(shù)有關(guān)。根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析,凡FMD疫苗和HC疫苗僅免疫1次的豬抗體效價(jià)較低,免疫次數(shù)在2次以上的,抗體效價(jià)較高。種公豬和繁殖母豬飼養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),免疫次數(shù)較多,所以免疫抗體效價(jià)較高,因此,建議免疫抗體效價(jià)較低的后備母豬和商品豬在首次免疫的基礎(chǔ)上,結(jié)合抗體效價(jià)檢測(cè)結(jié)果,進(jìn)行強(qiáng)化免疫,確保免疫質(zhì)量。
(3)PRRS是繁殖障礙性疾病,對(duì)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查,PRRS血清學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性率較高的豬場(chǎng),均不同程度地存在母豬繁殖障礙和仔豬發(fā)病死亡。該疫免疫合格率為79.4%,PRRS陽(yáng)性檢出率為8.0%。詳見(jiàn)表2。
5 小結(jié)與討論
(1)本次被檢的175頭豬,已免疫注射過(guò)FMD(O型)疫病主要侵害種公豬、繁殖母豬,新生仔豬。此次血清學(xué)檢測(cè)中,種公豬、繁殖母豬、后備母豬的陽(yáng)性檢出率分別為6.7%、14.0%、10.0%,明顯高于商品豬2.9%,表明感染的種豬是重要的傳染源,建議對(duì)PRRS的血清檢測(cè)為陽(yáng)性的種豬應(yīng)及時(shí)淘汰,以切斷傳播途徑,控制該病的發(fā)生和蔓延,對(duì)發(fā)病仔豬試用超免血清治療以減少經(jīng)濟(jì)損失。
(4)目前對(duì)PRRS的治療尚無(wú)有效藥物,關(guān)鍵是預(yù)防。因此,規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)須做好以下工作:①加強(qiáng)引種檢疫工作。對(duì)引進(jìn)的豬要隔離和觀察60d,并進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。為了說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果,必須了解其在原豬場(chǎng)的免疫接種情況;②對(duì)欲購(gòu)進(jìn)精液。要用PCR法檢測(cè)精液中的PRRS病毒,檢測(cè)合格后方可購(gòu)人;③嚴(yán)格執(zhí)行“全進(jìn)全出”管理程序,對(duì)所有豬群尤其是商品豬應(yīng)采取全進(jìn)全出制;④定期進(jìn)行PRRS檢測(cè),根據(jù)檢測(cè)結(jié)果。及時(shí)淘汰陽(yáng)性病豬,對(duì)受威脅的豬進(jìn)行PRRS疫苗注射;⑤加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,防止該病的發(fā)生。