摘要 采用PDA平板法檢測了來自新疆自治區(qū)的2個(gè)品種的食葵種子帶菌情況，并測定了9種不同殺菌劑對(duì)食葵種子帶菌消毒處理效果和對(duì)種子發(fā)芽及苗期生長的影響。結(jié)果表明，食葵種子表面攜帶的優(yōu)勢菌群主要為鐮孢霉屬(Fusarium)、鏈格孢屬(Alternaria)和青霉屬(Penicillium)，種子內(nèi)部寄藏真菌主要有鏈格孢屬和曲霉屬(As-pergillus)，其他分離頻率較高的真菌還有根霉屬(Rhizopus)和枝孢屬(Cladosporium)等；2個(gè)食葵品種種子表面攜帶真菌種類有較大差異，種子內(nèi)部寄藏真菌種類差異不大。殺菌劑苯醚甲環(huán)唑、咯菌腈和咪鮮胺具有良好的種子帶菌消毒處理效果。

關(guān)鍵詞 食葵；帶菌檢測；殺菌劑；消毒處理

中圖分類號(hào) S435.655

向日葵(Helianthus annuus Linn．)屬于菊科。在我國約有360年的種植歷史，主要種植區(qū)位于東北、西北、華北和西南等地，分為食葵和油葵兩類。近年來，隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，食葵的種植面積逐年增大。黑斑病、菌核病、銹病和向日葵螟等病蟲害是食葵生產(chǎn)中的主要病蟲害，通常造成減產(chǎn)和品質(zhì)降低，生產(chǎn)中主要采用種子處理、輪作、調(diào)整播期等方法對(duì)其進(jìn)行綜合管理。星火和三道眉作為食葵中的代表品種，因其個(gè)大味美，在新疆乃至全國各地享有盛譽(yù)，種子在產(chǎn)區(qū)間調(diào)運(yùn)頻繁，增強(qiáng)了種傳病害的發(fā)生和蔓延的風(fēng)險(xiǎn)。目前還未見有關(guān)食葵種子帶菌情況和種子藥劑消毒處理的相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)參考國際種子檢驗(yàn)規(guī)程和農(nóng)作物種子健康檢測方法，對(duì)兩個(gè)供試品種進(jìn)行健康檢測及其殺菌劑消毒處理效果方面的初步研究，旨在為食葵種傳病害的控制提供理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1．1 供試材料

1．1．1 食葵品種

三道眉、星火一號(hào)(均由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)農(nóng)十師一八二團(tuán)提供)。

1．1．2 殺菌劑

供試殺菌劑為50％福美雙可濕性粉劑、50％多菌靈可濕性粉劑、25％甲霜靈可濕性粉劑、70％惡霉靈可濕性粉劑、10％苯醚甲環(huán)唑懸浮種衣劑、20％萎銹靈懸浮種衣劑、2.5％咯菌腈(適樂時(shí))懸浮種衣劑、3％戊唑醇懸浮種衣劑、25％咪鮮胺乳油均由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)種子病理藥理實(shí)驗(yàn)室提供。

1．2 研究方法

1．2．1 食葵種子帶菌檢測

參照《種子病理學(xué)》和《植病研究方法》等有關(guān)的方法。

1．2．1．1 種子外部帶菌檢測

隨機(jī)選取每個(gè)品種食葵種子各100粒，放入250 mL三角瓶中，加入50 mL無菌水后充分振蕩，收集懸浮液，以2 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min后，倒去上清液，加人3 mL無菌水懸浮，搖勻后吸取其中10uL至另一離心管中，并加入90 ML無菌水，按此方法得到稀釋了10、100、1000倍的孢子懸浮液，制成濃度梯度，從每個(gè)濃度中吸取100 uL懸浮液加入到直徑為9 cm的PDA平板中涂勻，相同操作條件下設(shè)無菌水空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。放人25～28℃恒溫箱中，于黑暗條件下培養(yǎng)5 d后觀察菌落生長情況，記錄種子表面攜帶的真菌種類和分離比例。

帶菌率＝(帶菌種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100％；

分離比例＝(某類真菌菌落個(gè)數(shù)/菌落總數(shù))×100％。

1．2．1．2 種子內(nèi)部帶菌檢測

將每個(gè)品種的種子在5％NaClO溶液中浸泡5 min，用無菌水沖洗3遍，取其中40粒種子將種殼和籽粒解剖開，將籽粒放置在1％NaClO溶液中浸泡3 min，用無菌水沖洗3遍。將同一品種的種殼和籽粒分別均勻擺放在直徑為9 cm的PDA平板上，每皿擺放5粒籽?；蚍N殼，每個(gè)處理4次重復(fù)。在25～28℃溫箱中12 h光暗交替下培養(yǎng)5～7 d后檢查，記錄種子帶菌情況、不同部位的真菌種類和分離頻率。分離頻率-(帶某類菌種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100％。

1．2．2 種子藥劑消毒效果檢測

將不同品種的食葵種子分別用不同的供試藥劑按照一定的藥(有效成分)種比進(jìn)行處理：50％福美雙可濕性粉劑、50％多菌靈可濕性粉劑和70％惡霉靈可濕性粉劑均按照藥種質(zhì)量比1:200拌種；25％甲霜靈可濕性粉劑按照藥種比1:250拌種；10％苯醚甲環(huán)唑懸浮種衣劑按照藥種比1:600包衣；25％咪鮮胺乳油、20％萎銹靈懸浮種衣劑按照藥種比1: 200包衣；2.5％咯菌腈懸浮種衣劑按照藥種比1:500包衣；3％戊唑醇懸浮種衣劑按照藥種比3:105包衣。各處理種子均勻擺放在直徑為9 cm的PDA平板上，以未包衣種子為對(duì)照，每皿5粒，每個(gè)處理8個(gè)重復(fù)，在25～28℃溫箱中12 h光暗交替條件下進(jìn)行培養(yǎng)，3～7 d后記錄種子帶菌情況和藥劑的消毒處理效果。

1．2．3 種子生長活力測定

參照已有的發(fā)芽試驗(yàn)方法，將每個(gè)品種不同藥劑處理的種子各取出75粒，播種于裝有已滅菌沙子的白色塑料盒中，每盒25粒，每個(gè)處理3次重復(fù)，在25～30℃溫室中進(jìn)行培養(yǎng)，0～3 d進(jìn)行暗培養(yǎng)，3 d后進(jìn)行光暗交替培養(yǎng)。其中第3天調(diào)查種子發(fā)芽勢，第7天調(diào)查種子發(fā)芽率，第14天調(diào)查并記錄幼苗的生長狀況(株高、根長、鮮重)。

2 結(jié)果與分析

2．1 種子帶菌情況

2．1．1 種子外部帶菌

食葵種子的外部帶菌檢測結(jié)果表明(表1)，不同品種種子帶菌情況差異較大，其中三道眉品種外部攜帶的優(yōu)勢菌群主要為青霉屬(Penicillium)和鐮孢霉屬(Fusarium)真菌；星火一號(hào)品種攜帶的優(yōu)勢菌群為青霉屬和鏈格孢屬(Alternaria)真菌，其次為根霉屬(Rhizopus)真菌；兩個(gè)品種都攜帶有少量曲霉屬(As-pergillus)和枝孢屬(Cladosporium)真菌。

2．1．2 種子內(nèi)部帶菌

食葵種子的內(nèi)部帶菌檢測結(jié)果表明(表2)，兩個(gè)供試品種的種子帶菌情況無明顯差異，籽粒和種殼上所攜帶優(yōu)勢菌群均為鏈格孢屬和曲霉屬真菌。星火一號(hào)品種的種仁和種殼內(nèi)部的帶菌率分別為22.50％和27.50％，均低于三道眉品種種子的帶菌率35.00％和37.50％。

2．2 殺菌劑對(duì)種子的消毒處理效果

根據(jù)表3和表4可以得出，9種藥劑用于食葵種子消毒處理效果差異較大。其中，苯醚甲環(huán)唑、咯菌腈和咪鮮胺對(duì)兩個(gè)供試品種上攜帶的青霉屬、曲霉屬和鏈格孢屬真菌都有很明顯的抑制作用，其消毒效果均大于80％；而多菌靈和甲霜靈對(duì)兩個(gè)品種的種子帶菌消毒效果均低于10％，其中多菌靈對(duì)曲霉屬真菌表現(xiàn)出較好的抑制作用；其次，福美雙、惡霉靈、萎銹靈和戊唑醇4種殺菌劑對(duì)兩個(gè)供試品種也具有一定的消毒效果，在35.0％～77.5％之間。

2．3 殺菌劑處理對(duì)種子生長活力的影響

結(jié)果表明(表5，6)，三道眉食葵種子的生長活力較高，其發(fā)芽率和發(fā)芽勢均超過了星火一號(hào)品種。使用不同藥劑進(jìn)行種子處理后，對(duì)種子生長活力表現(xiàn)出不同的影響。其中10％苯醚甲環(huán)唑按照1:600藥種比包衣，可不同程度地降低兩個(gè)供試品種種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率。戊唑醇、福美雙和咪鮮胺處理種子后，種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率均高于空白對(duì)照，表明在供試藥劑濃度下，上述藥劑可有效提高種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率。其他幾種供試藥劑處理對(duì)種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率的影響與空白對(duì)照相比無明顯差異。種苗期的各項(xiàng)生長指標(biāo)(株高、根長、鮮重)測定結(jié)果表明，不同消毒處理種子之間差異不明顯，其各項(xiàng)指標(biāo)都在一個(gè)較為穩(wěn)定的范圍內(nèi)波動(dòng)。

3 結(jié)論與討論

3．1 帶菌檢測

對(duì)來自新疆的三道眉和星火一號(hào)兩個(gè)品種的食葵種子進(jìn)行帶菌檢測。結(jié)果表明，不同品種食葵種子外部攜帶的真菌差異較大，其中三道眉種子外部攜帶的優(yōu)勢菌群以青霉屬和鐮孢霉屬真菌為主，而星火一號(hào)種子則以青霉屬和鏈格孢屬真菌為優(yōu)勢菌群。這種差異可能是由于種子本身及其生長環(huán)境和運(yùn)輸過程的差異引起的。而兩個(gè)食葵品種的種子內(nèi)部所帶真菌相同，均以鏈格孢屬和曲霉屬真菌為優(yōu)勢菌群，這可能是與供試的兩個(gè)品種食葵種子均來自于同一產(chǎn)地有關(guān)，其中星火一號(hào)攜帶各類真菌數(shù)量和分離頻率均低于三道眉。

3．2 殺菌劑消毒處理

9種供試殺菌劑處理種子后具有不同程度的消毒效果。其中多菌靈和甲霜靈對(duì)兩個(gè)供試品種種子的消毒效果均低于10％，因?yàn)榧姿`主要用于卵菌病害防治，而多菌靈雖然對(duì)鐮孢霉屬真菌有較好的效果，但對(duì)鏈格孢屬真菌效果不太理想，故經(jīng)藥劑處理后種子的帶菌率仍然較高；苯醚甲環(huán)唑、咯菌腈和咪鮮胺對(duì)兩個(gè)品種的消毒效果均大于80％，表明藥劑對(duì)供試種子上攜帶的不同真菌均有明顯的抑制作用。福美雙、惡霉靈、萎銹靈和戊唑醇4種殺菌劑對(duì)兩個(gè)供試品種也具有良好的消毒效果。

3．3 生長活力測定

9種藥劑處理不同品種的食葵種子后，藥劑對(duì)其發(fā)芽率和發(fā)芽勢以及各項(xiàng)生長活力測定指標(biāo)無顯著影響，其中在供試濃度下，戊唑醇、福美雙和咪鮮胺幾種藥劑可有效提高種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率。而10％苯醚甲環(huán)唑按照1:600藥種比包衣，可不同程度地降低兩個(gè)供試品種種子地發(fā)芽勢和發(fā)芽率，推測是由于供試藥劑使用濃度過高所致。

上述研究結(jié)果對(duì)于食葵種子科學(xué)調(diào)運(yùn)，及苗期病害的防治具有一定的參考價(jià)值。進(jìn)行種子的健康檢測和藥劑的消毒處理，可以避免或減輕因病害發(fā)生蔓延而造成的產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)上的損失，為實(shí)現(xiàn)食葵的高質(zhì)高產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。