摘 要:以薩米特甜櫻桃1年生枝休眠芽為外植體,進行離體快繁技術(shù)研究。結(jié)果表明,最佳誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0mg/L+GA 0.5mg/L;最佳增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.25mg/L;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5mg/L。
關(guān)鍵詞:甜櫻桃;薩米特;離體快繁
中圖分類號:S662.5
文獻標識碼:A
文章編號:1002-2910(2007)04-0005-02
甜櫻桃品種薩米特(Summit),是先鋒(Van)和薩姆(Sam)做親本雜交育成的中晚熟紫色大果型品種。1984年引入我國,表現(xiàn)極豐產(chǎn),果實色澤亮麗,風味濃厚,品質(zhì)優(yōu)良且抗裂果、抗寒和抗旱力較強,發(fā)展?jié)摿艽?sup>[1]。為加快繁殖苗木,進行了離體快繁技術(shù)研究。
1 材料與方法
2006年12月取薩米特的1年生枝條,剪切成長5cm左右的單芽莖段,用洗衣粉溶液浸泡30分鐘,然后用自來水流水沖洗1~2小時,在超凈工作臺上用70%的酒精浸1~2分鐘,無菌水沖洗2次,再用0.1%的氯化汞浸10分鐘,無菌水沖洗3次。將芽外面幾層鱗片剝?nèi)ィ?.1%氯化汞消毒5分鐘,無菌水清洗5次。取芽放入培養(yǎng)皿中,用無菌刀切取嫩芽接種[2~3]。
誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA+GA+糖30mg/L+瓊脂6mg/L。6-BA濃度分別為0.5、1.0和2.0mg/L,GA濃度分別為0.1、0.5和1.0mg/L。共9個組合,每個組合重復3次,研究不同濃度6-BA和GA組合對外植體生長分化的影響。
不定芽增殖培養(yǎng)基以MS、F14和改良MS為基本培養(yǎng)基,分別添加0.05、1.0、2.0mg/L 6-BA和0.10、0.25、0.50mg/L IBA,每個組合重復3次,每重復10瓶。研究基本培養(yǎng)基及6-BA和IBA組合對不定芽分化增殖的影響。
生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA+糖30mg/L+瓊脂6mg/L。IBA濃度分別為0.1、0.2、0.5和1.0mg/L,每處理重復10次,研究不同濃度IBA促進生根的效果。培養(yǎng)基pH值為5.5~5.8,培養(yǎng)溫度25±2℃,光照下培養(yǎng)16小時、黑暗下8小時,光照強度1500~2000lx[4]。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同濃度6-BA和GA對薩米特甜櫻桃外植體生長和分化的影響
接種7~11天后芽開始萌動,15天后基部有愈傷組織產(chǎn)生。35天后統(tǒng)計誘導分化情況,結(jié)果見表1。從表1看出,誘導分化培養(yǎng)基中添加的6-BA為1.0mg/L、GA為0.5mg/L時,誘導率最高,芽苗健壯。6-BA和GA濃度增加或降低,芽的誘導分化率均降低,且芽苗生長細弱。高濃度6-BA會引起芽苗的玻璃化。芽苗玻璃化程度與GA濃度關(guān)系不明顯。6-BA濃度一定時,GA濃度增高,芽苗高度增加;當GA濃度超過0.5mg/L時,芽增高不明顯,甚至有所降低。
2.2 不同培養(yǎng)基和激素組合對薩米特甜櫻桃試管苗分化增殖的影響
接種35天后調(diào)查,MS、F14和改良MS培養(yǎng)基中添加不同濃度6-BA和IBA的芽分化增殖情況,結(jié)果見表2。
從表2看出,不同培養(yǎng)基和添加不同濃度的激素對芽分化增殖生長影響十分顯著。3種培養(yǎng)基差異顯著,以改良MS芽增殖系數(shù)最高,其次為MS,F(xiàn)14較低。芽增殖系數(shù)大小與6-BA濃度關(guān)系密切,生長情況差異也較大。當6-BA濃度為1.0mg/L時,芽增殖系數(shù)大,且生長狀況最佳;隨著6-BA濃度增高,增殖系數(shù)下降,苗生長也差,葉片變黃呈現(xiàn)水漬狀,并且隨著IBA濃度的降低,苗的長勢減弱。表2表明,不同基本培養(yǎng)基均以添加1.0mg/L 6-BA和0.25mg/L IBA的芽增殖系數(shù)高,苗生長健壯,葉色濃綠。對薩米特甜櫻桃來說,最佳分化增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.25 mg/L。
2.3 IBA對薩米特甜櫻桃試管苗生根的影響
將高2cm以上、生長健壯的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導生根,30天后調(diào)查生根狀況,結(jié)果見表3。
從表3看出,生根培養(yǎng)基中添加的IBA濃度在0~1.0mg/L范圍內(nèi),隨IBA濃度增高,生根率、平均根粗和根長增加,但濃度為1.0mg/L時,生長表現(xiàn)差,會抑制芽苗生長。生根培養(yǎng)基以1/2MS+ IBA0.5mg/L效果最好,生根率高,根系生長健壯,芽苗生長粗壯而較高。
3 小結(jié)
以薩米特甜櫻桃1年生枝休眠芽為外植體進行離體快繁,最佳誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+GA0.5mg/L;最佳增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.25mg/L;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.5mg/L。
參考文獻:
[1] 劉慶忠.加拿大甜櫻桃品種薩米特的引種初報[J].落葉果樹,2005(5):22~24.
[2] 閆國華,張開春,周宇,等.中國櫻桃“對櫻桃”不定根離體再生植株的研究[J].園藝學報,2003,30(5):583~585.
[3] 李文金,賈匯紅,王均華,等.歐洲甜櫻桃矮化砧木Rus-25的組織培養(yǎng)與植株再生[J].植物生理學通訊,2004(6):718.
[4] 代紅艷.甜櫻桃品種微繁體系的建立及優(yōu)化[J].果樹學報,2004,21(3):216~219.