尚美生 喬中東 呂吉元 趙榮瑞
摘要:目的通過觀察孕激素對培養(yǎng)血管平滑肌細胞(VSMCs)ATlRmRNA表達的影響,并尋求探索其潛在的分子機制,為臨床干預(yù)提供實驗依據(jù)。方法分別用孕激素及其特異性受體拮抗劑對培養(yǎng)的血管平滑肌細胞行不同時間、不同濃度的處理,然后用胰蛋白酶—EDTA消化,離心收集,提取總RNA,用RT—PCR對AT,R mRNA進行半定量分析,利用Westem—blot對其相應(yīng)的蛋白進行測定。結(jié)果孕酮對VSMCsATlR的影響呈現(xiàn)明顯的時間依賴性,12 h達到最大值為156%±18%,表現(xiàn)為上調(diào);并呈現(xiàn)濃度依賴性,當(dāng)孕酮濃度是10-10M時對ATlRmRNA的上調(diào)影響達到最大為59.9%±4.2%;孕酮對ATlRmRNA蛋白的上調(diào)以12h為最大,達到最大值為8.44%±1.08%;孕酮受體拮抗劑0.1 nM的米非司酮對VSMCsATlRmRNA無影響,但米非司酮抵消了孕酮對VSMCsATlR mRNA的上調(diào)作用,而孕酮引起的ATlRmRNA的上調(diào)只能被三磷酸肌醇(IP3)的抑制劑Wortmannin所抑制。結(jié)論孕酮對VSMCsATlRmRNA表現(xiàn)為上調(diào),其特征呈現(xiàn)時間和濃度依賴性,其最大上調(diào)作用發(fā)生于12 h,最大作用的濃度為0.1 nM,孕激素的作用機制可能是與其受體結(jié)合后激活了IP3激酶的第二信號系統(tǒng)。
關(guān)鍵詞:動脈粥樣硬化;平滑肌細胞;孕激素;ATl受體
中圖分類號:R329.3R285.5
文獻標識碼:A
文章編號:1672—1349(2005)11—0977—04