杜月娥,徐路瓊

1.云南省大理州中心血站，云南大理 671000；2.云南省曲靖市第一人民醫(yī)院輸血科，云南曲靖 655000

MNS血型系統(tǒng)是由46種抗原組成的高度復(fù)雜的血型系統(tǒng)，其中最為重要的抗原是M、N、S、s 4種，它們對應(yīng)的抗體與輸血反應(yīng)有關(guān)[1]?？?S抗體以IgG型較多，一般由紅細胞免疫產(chǎn)生，IgM型的抗體少見，可導(dǎo)致新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)[2]。中國人S-s+頻率為 93.44%[3]，S抗原的陽性率較低，所以抗-S的檢出率很低，筆者在工作中發(fā)現(xiàn)1例抗-S抗體合并自身抗體的罕見病例，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1病例資料 患者，女性, 78歲, 漢族，孕次不詳，產(chǎn)3次, 因左側(cè)輸尿管結(jié)石伴左腎積水，左側(cè)輸尿管狹窄，泌尿道感染，有冠心病、慢性心功能不全、高血壓到曲靖市第一人民醫(yī)院就診。門診擬“左輸尿管狹窄伴結(jié)石”收治入院，否認輸血史。醫(yī)院術(shù)前常規(guī)手術(shù)備血發(fā)現(xiàn)抗體篩選陽性，申請?zhí)嘏鋺腋〖t細胞2 U。

1.2儀器與試劑 抗-A、抗-B、Ac、Bc、Oc、抗-C、抗-c、抗-D(IgM)、抗-E、抗-e、篩選細胞、多抗、單抗-IgG、抗-C3d抗體均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供;進口譜細胞(Sanquin公司)、單抗卡(強生公司)；日本久保田公司KA-2200型離心機、瑞士達亞美公司Incubator 37 ℃ SⅠ型孵育器、centrifuge12SⅡ型離心機、北京市醫(yī)療設(shè)備廠BHW2型電熱恒溫水浴箱。

1.3血清學方法 試管法進行ABO、RhD、MNS血型鑒定。直接抗人球蛋白試驗，患者紅細胞3洗后配成2%～5%紅細胞懸液分別加多抗(IgG+C3d)、抗-IgG、抗-C3d，試管法立即離心觀察結(jié)果?？贵w篩選用試管法室溫鹽水介質(zhì)直接離心檢測IgM抗體，間接抗人球蛋白實驗檢測IgG抗體。直抗陽性做酸放散試驗，壓積紅細胞(RBC)與酸釋放液A(1∶1)反應(yīng)離心取上清液，B液調(diào)節(jié)pH值至7。放散液與血清分別用進口譜細胞進行抗體鑒定。鹽水法、聚凝胺法和抗球蛋白卡法交叉配血。吸收放散試驗，選大S陰性的壓積細胞300 μL與患者血漿(1∶3)比例混勻30 min，離心取上清液，用冰鹽水洗滌6次后做酸放散，收集放散液與SS細胞和ss細胞進行抗人球蛋白試驗，根據(jù)放散液與SS細胞和ss細胞的反應(yīng)格局判斷抗體類型，見表1。所有試驗按試劑說明書和文獻[4]方法進行。

表1 放散液與SS細胞和ss細胞反應(yīng)格局表

2 結(jié) 果

2.1患者血型鑒定和直接抗球蛋白試驗 患者MNS血型為MNss，ABO血型正定型為 B型, RhD陽性,但反定型與自身細胞和試劑紅細胞都有凝集反應(yīng)，考慮患者存在自身抗體和不規(guī)則抗體。直接抗人球蛋白試驗結(jié)果：多抗(3+)、抗-IgG(2+)、抗-C3d(1+)，均為陽性結(jié)果。

2.2抗體篩選 患者血清和抗體篩選細胞鹽水介質(zhì)有凝集，37 ℃ 3 min散開?？贵w篩選結(jié)果沒有任何格局，可能和自身細胞陽性有關(guān)，需進行抗體鑒定。

2.3抗體鑒定 采用微柱凝膠法，患者紅細胞制備的放散液和患者血清與Sanquin進口譜細胞進行抗人球蛋白實驗。根據(jù)譜細胞的格局表可初步判斷患者體內(nèi)存在抗-S抗體和自身抗體。但如果是抗-S抗體，抗體格局表2號、5號、10號細胞應(yīng)沒有凝集，本病例是否還存在其他不規(guī)則抗體或抗-S抗體(吸收放散試驗)是應(yīng)該考慮的問題。

2.4抗-S抗體效價測定 對倍稀釋患者血清, 加入S抗原陽性紅細胞測定效價, 結(jié)果為4(IAT)。

2.5吸收放散 放散液與進口譜細胞5號SS細胞,6號SS細胞, 10號ss細胞反應(yīng)陽性，凝集強度一致，根據(jù)表1判斷結(jié)果，檢出抗-S抗體和自身抗體。

2.6交叉配血 選ABO、RH(D)同型，S陰性獻血者。主次側(cè)在鹽水、聚凝胺、抗球蛋白卡3種介質(zhì)中均有凝集。患者同時存在自身抗體是導(dǎo)致配血不合的主要原因。術(shù)中緩慢輸注S陰性的懸浮紅細胞2 U，無明顯的輸血不良反應(yīng)，輸注效果明顯，患者術(shù)后恢復(fù)良好。

3 討 論

MNS血型系統(tǒng)是1927年被發(fā)現(xiàn)的，是人類歷史上第2個被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)[5]，IgM型抗-M抗體是MNS血型系統(tǒng)的常見天然抗體[6]，該抗體通常會導(dǎo)致ABO血型正反不符、鹽水介質(zhì)抗體篩查實驗和交叉配血試驗出現(xiàn)陽性結(jié)果，大多沒有臨床意義?？筃和抗S抗體則不同，雖然也有自然發(fā)生的IgM型的抗體,但絕大多數(shù)是由多次輸注紅細胞或妊娠免疫產(chǎn)生的IgG型抗體[7]。輸血工作者應(yīng)詳細了解患者的輸血史和妊娠史，同時要用兩種或兩種以上的介質(zhì)進行抗體篩查實驗，如抗體篩查實驗出現(xiàn)陽性結(jié)果，則在相應(yīng)介質(zhì)下用譜細胞鑒定抗體的特異性，并選擇對應(yīng)抗原陰性的獻血員紅細胞輸注，以避免發(fā)生輸血不良反應(yīng)。

本文中的患者血清和酸放散液在與譜細胞反應(yīng)中出現(xiàn)抗-S抗體和自身抗體格局,通過吸收放散試驗進一步證實了患者體內(nèi)存在抗-S抗體和自身抗體。該患者沒有輸血史 ,有多次妊娠史，可能在妊娠過程中多次受到了S抗原陽性紅細胞刺激后產(chǎn)生了抗-S。這種既有同種抗體和自身抗體的樣本，在輸血前免疫血液學檢測過程中應(yīng)特別慎重。如果患者血清與反定型細胞、抗體篩選細胞的凝集強度與自身細胞的凝集強度有差異,就應(yīng)該考慮可能有自身抗體合并同種抗體,提示在血型鑒定和抗體篩選過程中,用于自身對照的紅細胞必須經(jīng)過洗滌。有自身抗體存在的樣本，必須加以重視，做抗體鑒定和交叉配血實驗時必須通過吸收放散試驗把自身抗體的干擾排除掉，避免漏檢不規(guī)則抗體，保證血清學實驗的準確和輸血安全性[8]。

含有不規(guī)則抗體的患者在輸血前進行抗體篩查試驗尤其重要，不規(guī)則抗體不僅會造成血型鑒定困難，而且在抗體篩選細胞和譜細胞試驗中，不同抗體的凝集格局會造成相互干擾，使抗體鑒定困難。本案例存在自身抗體，不僅干擾了正反定型，還導(dǎo)致抗-S抗體在譜細胞反應(yīng)格局表中不明顯，只有通過進一步的吸收放散試驗、放散液分別與SS細胞和ss細胞反應(yīng)排除類抗體。不規(guī)則抗體同時合并自身抗體時，自身抗體的存在往往會掩蓋同種抗體，血清學檢測中應(yīng)嚴格掌握操作流程，降低同種抗體的漏檢率，以保證臨床用血安全。